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TORCH-针对检验科.ppt

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周日,三、临床表现,“,三日麻疹,”,,皮疹消退后,通常无色素沉着及脱屑,,预后良好,。,“先天性风疹综合征”(congenital rubella syndrome,CRS),即出生时体重低于2.5公斤,发育迟缓,出生后全身性器官受损,先天性心脏病,畸形,耳聋、失明等。CRS患儿最常见的是白内障等眼疾患,其次是耳聋,60%有心血管系统缺损。,孕妇在妊娠的不同时期感染风疹病毒造成先天性畸形的风险,三、临床,感染,妊娠时间,1个月,2个月,3个月,4个月,5个月,6个月以后,先天畸形,11-58%,11-36%,7-15%,7%以下,较低,基本没有,Chapter 12.Rubella,in Epidemiology and Prevention of Vaccine-Preventable,Diseases“The Pink Book”.2004,Centers for Disease Control and Prevention:,Atlanta.p.145-158,2026/2/22 周日,弓形虫,一、病原体,弓形虫(,Tox,),2026/2/22 周日,弓形虫生活史,2026/2/22 周日,弓形虫的传播方式有两种:,猫犬粪便中的弓形虫卵囊污染了水或食物而使人感染。,人接触或进食含有传染性包囊的生肉或不熟肉类。,世界各国人群弓形虫感染率不等,从,0.6,到,94,,许多国家感染率在,25,50,左右,在西方国家中以法国感染率最高,达,80,。我国各地人群弓形虫感染率不同,不同作者在不同地方采用不同方法调查的感染率人,0.30,到,47.3,不等,(中华医学预防杂志,1991,;,25,(,1,):,56,)。,二、流行病学,2026/2/22 周日,金根源等,弓形虫病防治手册,2026/2/22 周日,弓形虫的感染分为,先天性感染,和,获得性感染,二类。,先天性弓形虫病,典型症状,:,脑积水、大脑钙化灶、视网膜脉络膜炎和精神、运动的障碍,。在新生儿期有发热、皮疹、呕吐、腹泻、黄疸、肝脾肿大、贫血、心肌炎、癫痫等。,获得性弓形虫病,可因虫体侵袭部位和机体反应性而呈现不同的临床表现。,淋巴结肿大:多见于颌下和颈后淋巴结。,弓形虫眼病:以视网膜脉络膜炎多见,成人视力突然下降,婴幼儿可见手抓眼症。,免疫功能低下者:常表现为脑炎、脑膜脑炎、癫痫和精神异常。,三、临床感染,2026/2/22 周日,一、病原体,单纯疱疹病毒(,HSV,),单纯疱疹病毒可分为1型和2型,两者结构相似,有50%的同源性。,2026/2/22 周日,HSV-1,主要是通过呼吸道、皮肤和粘膜密切接触传播,感染腰以上部位的皮肤粘膜和器官,,发展中国家成人抗,HSV-1,抗体阳性率为,9,0-,100,,,其中原发性感染中,80,90,为隐性感染。,HSV-2,主要是通过性接触传播和母婴传播,感染腰以下部位的皮肤粘膜和器官,目前生殖器,HSV,感染发生率不断上升,在某些西方国家已跃居性病常见病因的第二位,,我国成人,HSV-2,的抗体阳性率为,3-5%,。,新生儿,HSV,感染发病率为,0.05-1/,万例,其中绝大多数为母亲生殖道,HSV,上行播散或分娩时经产道感染所致。,二、流行病学,2026/2/22 周日,疱疹性口炎,(herpeticstomatitis),是小儿容易发生的单纯疱疹病毒,1,型,IgG,(,HSV-1,)引起的急性口腔粘膜感染,也可能单独发生在唇及口周皮肤。,单纯疱疹病毒性角膜炎,(herpes simplex keratitis,HSK),,,简称单疱角膜炎,是由单纯疱疹病毒,1,型,IgG(herpes simplex virus,HSV-1),引起的角膜感染,是一种严重的世界性致盲眼病,其发病率和致盲率均占角膜病的首位。,单纯疱疹病毒性脑炎,(Herpes Simplex Virus Encephalitis,,,HSE),是一种由于单纯疱疹病毒感染脑实质引起的,以发热、口唇疱疹、头痛呕吐、意识障碍、偏瘫、抽搐、精神异常为主要表现,又称急性坏死性脑炎、急性包涵体脑炎,是临床较为常见的中枢神经系统感染性疾病,其中,95,以上为,HSV-1,感染。,生殖器疱疹,三、临床感染,2026/2/22 周日,TORCH,检测现状,2026/2/22 周日,一、检测方法,1,、,SFDA,批准的,TORCH IgG IgM,检测方法,:,ELISA,、化学发光(板式、磁微粒)、胶体金,IgG,检测为间接法,,IgM,检测有间接法和捕获法两种,2,、,SFDA,批准的,TORCH,核酸检测方法:,单纯疱疹病毒,型核酸扩增,(PCR),荧光定量测定试剂盒,(检测生殖泌尿道分泌物、生殖道刮片等样本受感染细胞中单纯疱疹病毒,II,型,DNA,),人巨细胞病毒核酸定量检测试剂盒,(PCR-,荧光法,),(器官移植、骨髓移植及,HIV,阳性,/AIDS,患者尿液、乳汁、血清或淋巴细胞中的人巨,细胞病毒的检测),目前国内主要用,ELISA,方法检测,IgG,和,IgM,抗体进行,TORCH,感染筛查,,极少数大医院使用全自动化学发光免疫分析仪检测,IgG,和,IgM,抗体,,个别实验室进行抗体亲和力的检测,,,核酸检测项目不全,不适合于初筛,可以用于进一步检测。,2026/2/22 周日,1,、四项(弓形虫,-IgM,、巨细胞病毒,-IgM,、风疹病毒,-IgM,、单纯疱疹病毒,-IgM,),2,、六项(弓形虫,-IgM,、弓形虫,-IgG,、巨细胞病毒,-IgM,、巨细胞病毒,-IgG,、风疹病毒,-IgM,、风疹病毒,-IgG,),3,、八项(弓形虫,-IgM,、弓形虫,-IgG,、巨细胞病毒,-IgM,、巨细胞病毒,-IgG,、风疹病毒,-IgM,、风疹病毒,-IgG,、单纯疱疹病毒,2-IgM,、单纯疱疹病毒,2-IgG,),4,、十项(在八项基础上增加单纯疱疹病毒,1-IgM,、单纯疱疹病毒,1-IgG,),首先应该同时检测,IgM,和,IgG,,,IgG,和,IgM,同时检测对临床的指导意义更大;,其次应该开展十项检测,因为单纯疱疹病毒,1,型和,2,型感染的临床症状不同。,二、检测项目,2026/2/22 周日,检查结果,意 义,危险性,处理措施,IgM+,IgG+,早期感染过体内有抗体;近期复发感染或体内潜伏的病毒被激活。,高,同时采取其它检测方法进一步,确诊,若近期感染指标仍旧为阳性同时胎儿情况不佳,应终止妊娠。,IgM+,IgG-,急性期初次感染,极高,临床上少见。处理方法与上相同。,IgM-,IgG+,早期感染过,体内有抗体,有一定免疫力;无近期感染。,低,无需进一步处理。,IgM-,IgG-,无感染史,体内无抗体,无免疫力。视为易感人群,暂无,严格监控,有条件应进行人工免疫。,IgG,抗体,4,倍升高,近期复发感染或体内潜伏的病毒被激活。,高,同时采取其它检测方法进一步确诊,若近期感染指标仍旧为阳性同时胎儿情况不佳,应终止妊娠。,TORCH IgG/IgM,检测的临床意义,2026/2/22 周日,IgG,抗体的检测很重要,1,、,IgG,抗体阳性,同时,IgM,抗体阴性,说明是既往感染,孕妇比较安全,因为即使发生了复发感染,胎儿先天性畸形的几率也非常低。,2,、,IgG,抗体为阴性,同时,IgM,抗体阴性,说明没有感染过,是易感人群,需要在孕期密切关注,建议在前三个月至少再检测一次。,3,、,IgG,抗体的动态变化可以作为补充。,IgG,抗体由阴性转化为阳性是急性感染的标志;,IgG,抗体滴度显著升高是复发感染的标志;,IgG,抗体持续阴性而,IgM,抗体持续阳性可能是,IgM,假阳性。,Fowler KB,,,Stagno S,,,et a1,The outcome of congenital CMV infection In relation to matemal antibody status,N Engl J Med,,,1992,326,:,663-667,2026/2/22 周日,三、检测程序,1,、是否需要筛查,TORCH,反对观点:,筛查孕妇,TORCH,血清学特异性抗体不能确诊孕妇何时感染,胎儿是否受累,也不,能确定是否需要终止妊娠,且需要花费大量人力财力,筛查意义不大。,围产期选择哪些感染性疾病进行筛查,需权衡利弊,应从成本效益出发。,首先,该病有较高的发病率;,其次,该病对胎、婴儿有较大的危害,如致畸或出生后有较严重的后遗症;,第三,对孕妇与胎儿感染有较成熟的诊断技术,并有较有效的阻断母婴传播的,方法和保护胎儿减少或预防后遗症的治疗措施。,支持观点:,TORCH,感染可能致畸,影响人口素质。,我国,TORCH,感染的特异,IgM,抗体检出率为,3.15,至,15.54,,对孕妇进行,TORCH,特,异性实验室检查是有必要的。,需要在临床实验室建立一个切实可行的,TORCH,检测及报告程序。,董悦对围产期,TORCH,感染筛查的重新评价中华妇产科杂志,,2004,,,39,:,725-728,林贵高,李金明,.,临床实验室建立,ToRCH,检验程序的重要性,.,中华检验医学杂志,,2008,年,7,月第,31,卷第,7,期,.,2026/2/22 周日,临检中心推荐的,TORCH,检测程序,使用敏感方法检测,TORCH IgG/IgM,IgG-IgM-,IgG+IgM-,IgG+IgM+,IgG-IgM+,孕期卫生教育,无需进一步检测,让患者,3,周后再检测,孕期,20,周,孕期,20,周,IgG,亲和力检测,IgG,亲和力检测,高亲和力,低亲和力,高亲和力,无需进一步检测,高度传染性,回顾性检测前三个月样本,IgG-IgM-,和,IgG-IgM+,IgG+IgM-,IgG+IgM+,低亲和力,IgG,IgG+IgM+,高亲和力,IgG,高度传染性,复发 低传染性,高度传染性,无需进一步检测,可进一步检测,母体病毒血症评估:,尿液,PCR,、血液,PCR,胎儿健康度评估:,超声、,MRI,侵入性检测:羊膜穿刺、定量,PCR,超声、,MRI,Munro SC,et al.,J Clin microbiol,2005,43:4713-4718,2026/2/22 周日,2,、没有按照,TORCH,检测程序进行筛查,此程序仅是临检中心的推荐程序,没有强制执行。,筛查程序的第一步仍旧做得不够好,,TORCH-IgG/M,的试剂质量尚无标准。,只有个别实验室进行抗体亲和力检测,尚无,SFDA,批准的试剂,没有普遍开展。,进一步的检测方法不完善。,2026/2/22 周日,四、质量控制,1,、没有国家标准、没有行业标准。,2,、没有质控品和质控体系。,3,、临检中心室间质评的结果不理想。,目前临床实验室多采用,ELISA,法进行,TORCH,各项目的检测,影响测定结果的原因很多,:,试剂、人员操作、仪器设备状态。,其中试剂是主要影响因素,国外同类产品间的差异也很大。,Hofgartner WT,,,swanzy SR,,,Bacina RM,,,et al,J Clin Microbiol,,,1997,,,35,:,3313-3315,Wilson M,,,Remington JS,,,Clavet C,J Clin Microbiol,,,1997,,,35,:,3112-3115,2026/2/22 周日,王露楠,李金明,张瑞,.TORCH,血清学检测室间质量评价分析,.,中华检验医学杂志,,2008,年,7,月第,31,卷第,7,期,.,2026/2/22 周日,TORCH,感染的,检测方法,2026/2/22 周日,间接,ELISA,法检测,TORCH-IgG,抗体,包被抗原,血清中特异性,IgG,抗体,酶标记抗人,IgG,抗体,底物,终止液,2026/2/22 周日,间接,ELISA,法检测,TORCH-IgM,抗体,包被抗原,酶标记抗人,IgM,抗体,底物,终止液,血清中特异性,IgM,抗体,血清中特异性,IgG,抗体,血清需用吸附剂去除特异性,IgG,和,RF,因子的干扰,2026/2/22 周日,包被抗人,IgM,抗体,捕获,ELISA,法检测,TORCH-IgM,抗体(中和抗原法),酶标记特异性抗原的抗体,底物,终止液,血清中人,IgM,抗体,此反应模式被国外普遍采用,特异性中和抗原,2026/2/22 周日,包被抗人,IgM,抗体,捕获,ELISA,法检测,TORCH-IgM,抗体(酶标记抗原法),底物,终止液,血清中人,IgM,抗体,酶标记特异性抗原,此反应模式被国内普遍采用,2026/2/22 周日,包被抗原,间接法检测,TORCH-IgM,抗体的干扰因素,酶标记,抗人,IgM,抗体,血清中,特异性,IgM,抗体,血清中,特异性,IgG,抗体,血清中特异性,IgG,抗体竞争结合固相抗原,IgM,型,RF,因子造成假阳性,包被抗原,RF,因子,酶标记,抗人,IgM,抗体,血清中,特异性,IgG,抗体,假阴性,假阳性,2026/2/22 周日,包被抗人IgM抗体,酶标记特异性抗原,血清中人,IgM,抗体,血清中人,IgG,抗体,捕获法一步法检测,IgM,反,应模式:,国内外都是两步法的反应模式,;,一步法反应模式从原理上讲不能避免特异性,IgG,抗体的干扰。,2026/2/22 周日,IgG抗体亲合力(Avidity),测定,机体感染病原体后,初次免疫应答,后产生的抗体,通常为,低亲合力,经,过数周或数月后,经过亲和力成熟的过程,其与抗原的互补更好,而成,为高亲合力抗体。,高亲和力,低亲和力,2026/2/22 周日,IgG亲和力检测可以帮助区分是否为原发感染,因为低亲和力的IgG抗体出现在感然后的前几个月,随着时间的推移,抗体逐渐成熟为高亲和力的抗体,。,感染后3个月内的血清样本IgG亲和指数一般为21%13%,既往感染、复发感染和再次感染的亲和指数一般为78%10%,。,IgG亲和力指数与感染时间的关系如下,图,:,Diagnosis and Management of Human Cytomegalovirus Infection in the Mother,Fetus,and Newborn Infant.,CLINICAL MICROBIOLOGY REVIEWS,Oct.2002,p.680715,2026/2/22 周日,IgG抗体亲和力检测在国外开展比较普遍,但国内尚没有亲和力检测试剂盒上市。,以IgG抗体动态监测代替IgG亲和力检测:,对于IgG和IgM同时阳性的样本,建议2周后重新取样,与第一次取样同时检测,,稀释4个滴度(1:2、1:4、1:8、1:16)。,IgG和IgM抗体检测值和滴度没有变化:IgM假阳性。,IgG抗体滴度4倍升高:复发感染。,IgG和IgM抗体检测值升高:急性原发感染。,2026/2/22 周日,安图,TORCH,产品介绍,2026/2/22 周日,安图做,TORCH,产品有,10,年时间,有较好的技术和市场积淀。,2006,年开始对产品质量进行再改进,,2010,年获得批准文号,该产品经历了四年的再研发,质量上有一个质的飞跃。,与前意大利,DiaSorin,公司的技术总监进行技术合作关系。,从研发到生产各个环节的质量控制保证了产品质量。,2026/2/22 周日,安图,TORCH,产品文号齐全,巨细胞病毒,IgG,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400393,号,弓形虫,IgG,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400394,号,风疹病毒,IgG,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400396,号,单纯疱疹病毒,1,型,IgG,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400391,号,单纯疱疹病毒,2,型,IgG,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400395,巨细胞病毒,IgM,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400938,号,弓形虫,IgM,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400939,号,风疹病毒,IgM,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400941,号,单纯疱疹病毒,1,型,IgM,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400937,号 单纯疱疹病毒,2,型,IgM,抗体测定试剂盒,(,酶联免疫法,),国食药监械,(,准,),字,2010,第,3400940,号,2026/2/22 周日,安图,TORCH,产品,包装精美,2026/2/22 周日,安图,TORCH,十项反应模式相同加样变色不同,样品稀释液,100ul,样本,10ul,37,度,45,分钟,洗板,6,次,酶结合物,100ul,37,度,45,分钟,洗板,6,次,显色,10,分钟,TORCH-IgG,TORCH-IgM,2026/2/22 周日,安图,TORCH,产品完善的质量控制体系,以国际上知名的同类产品为参照建立企业内控盘,Diasorin virion/serion FOCUS Trinity,按照公司质控体系的要求对企业盘的性能进行了详细的研究,用企业内控盘对产品生产各环节进行质量控制,用国际上认可的商品化质控盘完善质控体系,2026/2/22 周日,2026/2/22 周日,标本编号,安图,-IgG,预期值,S/CO,ELA OD,值,QTC711-01,4.1,0.829,阳性,QTC711-02,4.0,0.809,阳性,QTC711-03,5.1,1.014,阳性,QTC711-04,3.2,0.649,阳性,QTC711-05,0.5,0.094,阴性,QTC711-06,4.0,0.806,阳性,国际商业化样本盘,BBI,检测,CMV-IgG QTC711,符合率,100%,2026/2/22 周日,国际商业化样本盘,BBI,检测,Abbott,Abbott,Gull,zeus,安图,Anti-CMV,AxSYM s/co,iMax s/co,ELA s/co,ELA s/co,S/CO,PTC901-01,0.1,0.2,0.1,0.1,0.5,PTC901-02,0.1,0.2,0.1,0.1,0.5,PTC901-03,0.1,0.1,0.2,0.1,0.5,PTC901-04,0.1,0.1,0.2,0.1,0.6,PTC901-05,0.3,0.3,0.4,0.4,0.6,PTC901-06,3.3,3.5,2.6,3.6,4.1,PTC901-07,5.4,6.4,3.2,4.7,5.9,PTC901-08,7,6.6,3.6,4.2,6.2,PTC901-09,8.1,7.9,3.7,3.9,7.9,CMV-IgG,血清转化盘,PTC901,灵敏度与雅培一致,2026/2/22 周日,Abbott,bioMerieux,Centocor,Gull,安图,Anti-CMV,IMX S/CO,Vidas s/co,ELA s/co,ELA s/co,S/CO,PTC901-01,0.2,0.3,0.3,0.1,0.5,PTC901-02,0.2,0.3,0.3,0.1,0.5,PTC901-03,0.2,0.3,0.4,0.3,0.5,PTC901-04,0.2,0.3,0.4,0.5,0.5,PTC901-05,4.8,2.7,3.6,4.3,1.1,PTC901-06,6,3.2,4.8,11.5,8.5,PTC901-07,5.8,3,4.3,12.5,9.4,PTC901-08,5.5,2.8,3.4,10.3,8.3,PTC901-09,5,2.6,2.9,9.3,8.6,国际商业化样本盘,BBI,检测,CMV-IgM,血清转化盘,PTC901,灵敏度与雅培一致,2026/2/22 周日,国际商业化样本盘,BBI,检测,RV-IgM,样本盘,PTR201,与雅培符合率,100%,Abbott EIA,Bio Whittaker,安图,Abbott EIA,Bio Whittaker,安图,结果,s/co,结果,s/co,S/CO,PTR201-13,N,0.7,N,0.1,1.2,PTR201-01,N,0.2,N,0.1,0.2,PTR201-14,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-02,N,0.5,N,0.4,0.3,PTR201-15,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-03,P,2.3,P,1.6,5.6,PTR201-16,N,0.2,N,0.1,0.2,PTR201-04,N,0.2,N,0.1,0.2,PTR201-17,N,0.2,N,0.1,0.2,PTR201-05,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-18,EQ,0.9,P,1.4,0.7,PTR201-06,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-19,P,2.1,N,0.2,2.0,PTR201-07,P,1.2,N,0.3,1.6,PTR201-20,N,0.1,N,0.1,0.3,PTR201-08,N,0.2,N,0.3,0.2,PTR201-21,N,0.2,EQ,0.9,0.2,PTR201-09,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-22,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-10,N,0.1,N,0.1,0.3,PTR201-23,N,0.1,N,0.1,0.2,PTR201-11,P,2.3,P,8.4,13.2,PTR201-24,P,1,N,0.2,1.4,PTR201-12,N,0.2,N,0.1,0.3,PTR201-25,N,0.3,N,0.2,0.3,2026/2/22 周日,国际商业化样本盘,BBI,检测,RV-IgG,样本盘,PTR201,与雅培符合率,100%,厂家,Abbott EIA,Bio Whittaker,安图,厂家,Abbott EIA,Bio Whittaker,安图,结果,s/co,结果,s/co,S/CO,PTR201-13,P,3.2,HP,7.4,4.9,PTR201-01,P,1.1,LP,1.4,4.2,PTR201-14,P,2.4,LP,1.7,3.5,PTR201-02,P,2.4,HP,6.7,4.9,PTR201-15,P,3.3,HP,6.8,5.8,PTR201-03,P,3.1,MP,5.9,3.3,PTR201-16,N,0.1,N,0.1,0.7,PTR201-04,P,2.8,HP,8.9,5.6,PTR201-17,P,2,MP,5.4,5.5,PTR201-05,N,0.1,N,0,0.8,PTR201-18,P,1.1,LP,2.1,4.0,PTR201-06,P,1.2,LP,2.6,4.4,PTR201-19,P,1.7,N,0.5,2.4,PTR201-07,P,2.5,LP,2.2,2.3,PTR201-20,P,3.4,MP,6.1,7.8,PTR201-08,P,1.7,LP,2,3.6,PTR201-21,P,2.2,MP,4.2,5.4,PTR201-09,P,2.7,HP,7.3,6.4,PTR201-22,P,1.4,EQ,0.8,4.8,PTR201-10,P,3,MP,4.1,5.8,PTR201-23,P,2.2,MP,4.7,5.1,PTR201-11,P,2.7,HP,8.6,2.3,PTR201-24,P,1.3,N,0.6,2.2,PTR201-12,P,2.7,HP,8.9,7.4,PTR201-25,P,2.5,MP,5.9,6.9,2026/2/22 周日,TOX-IgM,Symbiosis,ACON,安图绿科,DiaSorin,ID,S/CO,S/CO,OD,OD,280,1,4,1,0,0.685,0.764,282,1,3,1,1,0.404,0.541,281,1,6,1,0,1.046,0.636,290,3,2,0,6,1.065,0.541,285,5,0,0,1,0.283,0.834,289,1,9,1,1,1.578,0.632,284,2,4,4,8,2.100,1.171,287,2,3,2,7,1.399,1.095,2026/2/22 周日,谢谢!,愿与各位同仁共同推进TORCH检测的规范化,2026/2/22 周日,
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