实验十一 邻二氮菲吸光光度法测铁的条件实验.ppt

浙江经贸职业技术学院应用工程系,Click to edit Master title style,Click to edit Master text,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,杭州经济技术开发区科学技术局,Click to edit Master title style,Click to edit Master text,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,实验十一 邻二氮菲,分光光度法测铁的条件实验,一、目的要求,1,、掌握邻二氮菲吸光光度法测定铁的条件实验的方法与原理。,2,、熟悉分光光度法的条件试验及测定方案的拟定。,3,、进一步了解分光光度计的构造、性能及使用方法。,二、实验意义,可见分光光度法测定无机离子，要经过两个过程：一是显色过程；二是测量过程；为了使测定结果有较高的灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件。,这些条件：,显色剂用量、酸度、温度、时间及干扰的消除,确定显色反应的最佳实验条件，也就可以在一定程度上保证了实验的准确度和精密度,。,三、实验原理,邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的显色剂。它是测定二价铁的一种高灵敏度的高选择性试剂。,二价铁和水溶液中的邻二氮菲反应，生成一种很稳定的橙红色螯合物，其在,510nm,波长下有最大吸收，且遵守朗伯比耳定律，摩尔吸光系数,1.110,4,。在,pH3,9,的范围内（一般将酸度控制在,pH=5,6,的范围内），颜色的深度不受影响，且可稳定半年之久。最小检出浓度是,50,gL-1(,用,1cm,吸收池,),通常从以下几个方面考虑显色反应的实验条件：显色剂用量、酸度、温度、时间及干扰的消除。,我们的条件实验通常采用单因素实验法。其原理是在几个实验条件中，改变其中一个条件的值，固定其它的条件，然后测定相应的吸光度值，再从中找出符合实验要求的条件。,四、仪器和试剂,1,、醋酸钠：,1molL,-1,；,2,、盐酸羟胺：,100,g,L,-1,；,(,用时配置,),3,、邻二氮菲,(1.5,g,L,-1,),：,4,、铁标准溶液,分光光度计的使用,1,、,使用仪器前，使用者应该首先了解本仪器的结构和工作原理。以及各个操作旋钮之功能。在未接通电源前，应该对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固。通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源开关。,2,、开启电源，指示灯亮，选择开关置于“,T”,，波长调至测试用波长。仪器预热,30,分钟。,3,、,打开试样室盖（光门自动关闭），按“,0”,按钮，使数字显示为“,00.0”,，盖上试样室盖，将空白（参比）放在光路上，使光电管受光，调节透过率“,100%”,旋钮，使数字显示为“,100.0”,。,4,、预热后，按,(4),连续几次调整“,0”,和“,100%”,，仪器即可进行测定工作。,5,、,选择开关置于“,A”,，调节吸光度调零旋钮，使得数字显示为“,.000”,，然后将被测样品移入光路，显示值即为被测样品的吸光度值。,6,、如果大幅度改变测试波长时，在调整“,0”,和“,100%”,后稍等片刻，（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“,0”,和“,100%”,即可工作。,7,、,每台仪器所配套的比色皿，不能与其它仪器上的比色皿单个调换。,五、实验步骤,1,、邻二氮菲与铁的配合物的稳定性,用吸量管准确吸取,10,ug,mL,-1,铁标准溶液,5,mL,，置于,50mL,容量瓶中。加入,100,g,L,-1,盐酸羟胺溶液,1mL,，摇匀后加入,1.5,g,L,-1,邻二氮菲溶液,2mL,和,1molL,-1,醋酸钠溶液,5mL,，以水稀释至刻度，摇匀。,在分光光度计上，用,1cm,比色皿，以水为参比溶液，在最大吸收波长,510 nm,处，从加入显色剂后立即测定一次吸光度，经,15min,，,30 min,，,45min,，,60min,后，各测一次吸光度。以时间,(t),为横坐标，吸光度,(A),为纵坐标，绘制,At,曲线，从曲线上判断配合物稳定的情况。,2,、显色剂用量的影响,取,50mL,容量,6,个，各加入,10,ug,mL,-1,铁标准溶液,5,ml,，,1ml 100,g,L,-1,盐酸羟胺溶液，摇匀,.,再分别加入邻二氮菲溶液,0,，,0.5,，,1.0,，,2.0,，,3.0,和,4.0mL,再各加入醋酸钠,5mL.,以水稀释至刻度，摇匀。,在分光光度汁上，用适宜波长,(510nm),，,1cm,比色皿，以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标，吸光度为纵坐标、绘制,Av,曲线，由曲线上确定显色剂最佳加入量。,注意,:,1,干扰,用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铬与试剂形成有色配合物；钨、相、铜、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的,pH,范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。,2,试剂,本次实验中，所用的试剂有铁标液、盐酸羟胺、邻二氮菲。其中盐酸羟胺是还原剂，用来还原三价铁离子；邻二氮菲是显色剂。,六、操作要点,1,、溶液的配制,用移液管准确移取试剂溶液；注意溶液的加入顺序不能搞错。,2,、测定,要合理地设计条件实验的点，做到不漏做条件。,七、注意事项,1,、试剂的准确加入及加入的顺序；,2,、比色皿的使用；在进行条件试验时，每改变一次条件，比色皿要洗干净。,