科技探索之路-细胞工程的发展历程.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,专题二第二节动物细胞工程,单克隆抗体,制作人：于海书,朝阳市第一高级中学,1,、抗体的化学本质？由什么细胞产生？,2,、浆细胞是如何产生的？,3,、一个,B,淋巴细胞能产生几种抗体？,知识回顾,走进生活,1,、日常生活中什么时候需要注射抗体？,2,、从哪获得的？,3,、以上获取方法有什么缺陷？,单克隆抗体,【,集思广益,】,依据已学过的生物学技术,请尝试设计，可以克服以上缺陷的，,抗体制备方案,。,A,组,如何让小鼠产生相应,B,细胞？,在小鼠什么器官分离？分离得,B,细胞只有一种吗？,诱导动物细胞融合的常用方法？,融合的细胞有几种？,B,组,如何从众多未融合及融合,的,细胞中,筛选出杂交瘤细胞？,（请同学们参考学案,B,组资料卡,给出的信息）,C,组,B,组同学筛选出来的所有杂交瘤细胞都是同一种吗？,如何从中筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞？,选择性培养基筛选,不是,给小鼠注射相应抗原,脾脏,多种,灭活的病毒或聚乙二醇,B-B,，瘤,-,瘤，,B-,瘤,B-,瘤,B-,瘤,瘤,B,B-B,瘤,-,瘤,氨基喋呤,专一抗体检测,克隆化培养,体内培养,从培养液中分离,从小鼠腹水中分离,特点：,制备过程,：,可,大量制备,特异性,强,灵敏度,高,1.,作为诊断试剂,三,、,单克隆抗体的应用,2.,用于治疗疾病和运载药物,”,生物导弹,“,（单克隆抗体）,（抗癌药物和放射性同位素）,瞄准装置,杀伤性弹头,单克隆抗体,本节小结,1,制备,2,特点,3,应用,利用哪些细胞工程技术,两次,筛选的目的,和,方法,作为,诊断,试剂,用于,治疗,疾病和,运载,药物,：,特异性,强,，灵敏度,高,，,可以,大量制备,巩固练习,（,1,）,_,技术是单克隆抗体技术的基础。,（,2,）根据培养基的用途分类，图中,HAT,培养基属于,_,培养基。,（,3,）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是,_,。,（,4,）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用,_,。,（,5,）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的,_,特点，又具备淋巴细胞的,_,特点。,（,6,）淋巴细胞是由动物体,_,中的,_,细胞分化、发育而来。,（,7,）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是,_,。,1.,下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。,动物细胞培养,选择,特异性强,灵敏度高,灭活的病毒,在体外大量增殖,分泌特异性抗体,骨髓,造血干细胞,主动运输,作业：,1.,熟练掌握单克隆抗体的制备过程,2.,完成红对勾练习册,2.2.2,节习题,2.,下图是单克隆抗体制备过程示意图，据图回答：,（,1,）图中,A,过程是从小鼠的脾脏中取得,_,细胞，该细胞能够产生,_,。从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射,_,类物质。,（,2,）,B,过程是一个,_,过程，该过程的进行需要灭活的,_,或,_,的诱导。,（,3,）,假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成,_,种类型的,C,细胞，因此需用,_,培养基筛选出,D,细胞用于 培养，,D,细胞的名称是,，其特点是,_ _ _ _,。,浆细胞,抗体,抗原,细胞融合,病毒,聚乙二醇,选择性,3,又能产生特异性抗体,杂交瘤细胞,既能无限增殖,（,3,）,假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成,_,种类型的,C,细胞，因此需用,_,培养基筛选出,D,细胞用于 培养，,D,细胞的名称是,，其特点是,_ _ _ _,。,选择性,3,又能产生特异性抗体,杂交瘤细胞,既能无限增殖,(4),在培养时通过,_,分裂方式大量繁殖。,D,细胞体外培养需要注意的条件是（要求答,4,项）,_,。,（,5,）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是,_,。,特异性强、灵敏度高,有丝,无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和,pH,；适宜的气体环境,A,组,如何让小鼠产生相应,B,细胞？,诱导细胞融合的常用方法？,融合的细胞有几种？,B,组,如何从,A,组同学得到的，混合多种细胞的培养液中,，,筛选出杂交瘤细胞？,（请同学们参考学案思考,2,给出的信息）,C,组,B,组同学筛选出来的杂交瘤细胞都是同一种吗？,如何筛选出能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞？,给小鼠注射相应抗原,灭活的病毒或聚乙二醇,3,种：,B-B,，瘤,-,瘤，,B-,瘤,选择性培养基筛选,不是,脾脏,A,组,如何让小鼠产生相应,B,细胞？,诱导细胞融合的常用方法？,融合的细胞有几种？,B,组,如何从,A,组同学得到的，混合多种细胞的培养液中,，,筛选出杂交瘤细胞？,（结合学案思考,2,）,C,组,B,组同学筛选出来的杂交瘤细胞都是同一种吗？,如何筛选出能产生我们所需专一抗体的杂交瘤细胞？,给小鼠注射相应抗原,灭活的病毒或聚乙二醇,B-B,，瘤,-,瘤，,B-,瘤,选择培养基,筛选,专一性抗体检测,和,克隆化培养,不是,脾脏,多种,B,细胞,多孔动物细胞培养板,有限稀释法：,对培养液进行稀释，尽量,保证每个小孔中的细胞数不多于,1,个，培养后，对,上清液,进行,抗体检测,。,抗原抗体检验,呈阳性,克隆化培养,和,专一抗体检测,（多次）,1 2,3,4 5,6,7,8,9,10,11,12,（多次）,1.,作为诊断试剂,三,、,单克隆抗体的应用,2.,用于治疗疾病和运载药物,（单克隆抗体）,（抗癌药物和放射性同位素）,瞄准装置,杀伤性弹头,”,生物导弹,“,特点：,可,大量制备,特异性,强,灵敏度,高,1,2,3,4,1,2,3,4,2,2,？,杂交瘤细胞,单个,B,淋巴细胞,细胞群,化学性质单一，特异性强的抗体,克隆,产生,（,单克隆抗体,）,思考：,信息,1,：,一个,B,细胞,在体外,不可能无限增殖,；,有什么办法让,B,淋巴细胞也具有无限增殖的能力？,细胞融合,信息,2,：,我们学过的,癌细胞,有,无限增殖,能力；,一个,B,淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体）,骨髓瘤细胞,(,能无限增殖,),杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体,既能,产生特异性抗体，,又能,大量增殖,的细胞,1975,年英国科学家,米尔斯坦,和,柯勒,的实验,1,、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，,得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗,体，与骨髓瘤细胞融合的是（）,A,、经过免疫的,B,淋巴细胞,B,、不经过免疫的,T,淋巴细胞,C,、经过免疫的,T,淋巴细胞,D,、不经过免疫的,B,淋巴细胞,A,巩固练习,2.,单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和,B,淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）,淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞,B,淋巴细胞自身融合细胞,小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞,杂交瘤细胞,A,B,C,D,C,3,、动物细胞融合的目的中最重要的是（）,A,、克服远缘杂交不亲和,B,、制备单克隆抗体,C,、培育新物种,D,、生产杂种细胞,B,4,、研究单克隆抗体治疗癌症的思路是（）,A,利用单克隆抗体特异性地对抗癌细胞,B,以单克隆抗体作抗癌药物杀死癌细胞,C,抗癌物质在克隆细胞中大量合成,D,单克隆抗体携带抗癌药物特异性地与癌细胞结合,D,5,、,“,生物导弹,”,是指（）,A.,单克隆抗体,B.,杂交瘤细胞,C.,产生特定抗体的,B,淋巴细胞,D.,在单抗上连接抗癌药物,D,6,、,由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成，一是“瞄准装置”，二是杀伤性“弹头”，下列对此描述不正确的是,（）,A“,瞄准装置”是由识别肿瘤的单克隆抗体构成,B“,弹头”是由放射性同位素、化学药物和毒素等物质构成,C“,弹头”中的药物有选择杀伤肿瘤细胞的功能,D“,生物导弹”是利用细胞工程制备出来的,C,抗体的传统生产方法,同种,抗原,反复,注射动物,从动物的,血清,中分离抗体,该法制备抗体的,缺点：,产量,低,、纯度,低,，且抗体的特异性,差,、灵敏度,低,。,分泌,X,抗体,B,淋巴细胞,动物免疫,骨髓瘤细胞,X,抗原,小鼠骨髓瘤细胞,分泌,X,抗体,只有杂交瘤细胞可长期存活下来,细胞融合,氨基喋呤,注射到小鼠腹腔,体外培养,从腹水中获得抗体,从培养液中获得抗体,扩大培养,分泌,X,抗体,B,淋巴细胞,动物免疫,混合细胞,骨髓瘤细胞,X,抗原,小鼠骨髓瘤细胞,培养数天后细胞死亡,无限生长细胞,分泌,X,抗体,只有杂交瘤细胞可长期存活下来,讨论,2,：,有,几种融合细胞？,已知细胞合成,DNA,有,D,和,S,两条途径，其中,D,途径能被,氨基蝶呤,阻断。,淋巴细胞,中虽有这,两种,DNA,合成途径，但一般不分裂增殖。,鼠骨髓瘤细胞,中只,有,D,途径,没有,S,途径，但能无限分裂增殖。,讨论,3,：,请设计一方法，从培养液中,分离,出杂交瘤细胞，并说明原理。,讨论,4,：,是否所有的杂交瘤细胞都是,同一种,？,如何从中,筛选,出能产生我们,所需,专一抗体的杂交瘤细胞？,BB,、,B,瘤,、,瘤瘤,一选,：筛选,杂交瘤细胞,获得产生相应抗体的,B,细胞,二选,：选能产生所需,专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,