尿液化学.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第四节 尿液化学检验,一、尿液酸硷度检验,二、尿液蛋白质测定,三、尿液糖测定,四、尿液酮体测定,五、尿液胆红素测定,六、尿胆原、尿胆素测定,七、尿中含铁血黄素定性检查,上一页,下一页,返回,尿液酸碱度即尿,pH,值，可反映肾调节体液酸碱平衡的能力。尿液容易因细胞生长而变质，故测尿液,pH,值标本必须新鲜。,一、,尿液酸碱度检验,上一页,下一页,返回,测定方法,酸碱指示剂法 见本章第五节。,临床上进行肾小管酸、碱负荷试验时，可用酸度计精确测定出尿,pH,值。,报告方式,报告时直接报告出,pH,值，也可用“酸性”、“弱酸性”、“中性”、“碱性”描述。,参考区间,正常新鲜尿液多为弱酸性，,pH,值约,6.0,。因饮食种类影响和生理活动变化，,pH,波动在,5.4,8.0,之间。,一、,尿液酸碱度检验,上一页,下一页,返回,临床意义,尿,pH,在诊断上有特别重要意义的是：,肾小管性酸中毒，虽然肾小球滤过功能正常，但肾小管排,H,和,H,与,Na+,交换能力明显减弱，此时尿,pH,值仍可大于,6.5,，甚至呈中性或弱碱性。,判断泌尿系统结石种类：草酸盐、磷酸盐、碳酸盐结石多见于碱性尿；尿酸盐、胱氨酸结石多见于酸性尿。,初步判断感染细菌种类：具有分解尿素能力的细菌如变形杆菌、铜绿假单胞菌所致的泌尿系统感染存在时，尿液多为碱性。,一、,尿液酸碱度检验,上一页,下一页,返回,二、尿液蛋白质测定,正常人肾小球滤液中有小分子量蛋白质（约,2g,24,尿），但在通过近端肾小管时，多数蛋白质被重吸收，终尿中蛋白质含量极微，约为,0.02g,0.08g,24,尿，一般尿蛋白定性试验为阴性。,健康人尿液中蛋白质含量很少，仅为,30130mg/d,，,随意一次尿蛋白质为,580mg/L,。,尿液蛋白质定性为阴性。若尿液蛋白质定性为阳性，即为,Proteinuria,。,上一页,下一页,返回,（一）正常尿中蛋白质成分,如将正常人尿液中微量蛋白质浓缩后经免疫电泳等技术测定，可按其分子量大小分成三组：,第一组：高分子量蛋白质，,分子量万，,含量极微，包括由肾小管分泌而来的,sLgA,和由髓伴升支及远曲小管上皮细胞所分泌的,T-H,糖蛋白。,第二组：中分子量蛋白质，,分子量介于万万之间。,包括血浆中大部分的蛋白质，但以白蛋白为主，占尿液中蛋白质总量的。,第三组：低分子量蛋白质，,分子量万，,因多数已经重吸收，因此在尿中含量极少，包括免疫球蛋白的,Fc,片段、,-,微球蛋白、,-,微球蛋白、自由轻链和溶菌酶等。,上一页,下一页,返回,健康人尿中蛋白质以,白蛋白,为主，还有少量,TH,蛋白、分泌型,IgA,、,1,-,微球蛋白、,2,-,微球蛋白,等。,蛋白尿的定义,各种原因造成尿内蛋白质含量超过,0.15g,24,，,或浓度,0.1g/L,，常规蛋白定性检查为阳性反应即称为蛋白尿，也称,临床蛋白尿。,（二）蛋白尿形成的原因和机理：,上一页,下一页,返回,蛋白尿生成的原因,1,、肾小球滤过蛋白质超过了肾小管重吸收能力。,2,、肾小管病变导致其吸收功能受损。,3,、血浆蛋白成分增加，超过了肾小管重吸收能力。,4,、肾小管分泌,T-H,糖蛋白增加。,蛋白尿生成原因,定义：,指泌尿系统并无器质性病变，尿内一过性暂时出现蛋白。可见于：,（,1,）功能性蛋白尿；,（,2,）体位性蛋白尿；,（,3,）摄食性蛋白尿。,特征：,尿蛋白电泳仅有白蛋白峰。,1.,生理性蛋白尿,上一页,下一页,返回,（,1,）功能性蛋白尿：,包括剧烈运动、发热、寒冷、以及精神过度紧张等因素所引起的蛋白尿。,在休息或刺激消失后即可恢复正常，尿蛋白定性一般,不超过（）。,原因,:,前者是由于肾缺血和乳酸增加，使局部环境改变，蛋白分子缩小和肾小球滤性增加而产生；后者是由于神经反射而使肾血管痉挛或充血，导致肾小球渗透性增加而产生蛋白尿。,上一页,下一页,返回,（,2,）体位性蛋白尿,如脊柱前凸者，直立时压迫左肾静脉而致肾脉脉压升高，使通过肾小球过滤的蛋白质重吸收不全，呈暂时性蛋白尿。当卧床休息后不出现蛋白尿，故称直立性蛋白尿。,上一页,下一页,返回,（）摄食性蛋白尿：,如注射分子量小于万的蛋白质，或食入大量蛋白质（清蛋白分子量为,.5,万），这些蛋白能通过肾小球滤过膜而出现于尿中。,上一页,下一页,返回,2.,病理性蛋白尿,定义：,系指因器质性病变，尿内持续性出现的蛋白尿。从蛋白质来源上可分为以下几种类型：,肾性：,肾小球滤过膜受损,肾小管重吸收功能障碍,非肾性：,肾以下器官感染,异常蛋白质的排泄：（特殊形式蛋白尿）,上一页,下一页,返回,（,1,）肾性蛋白尿,又称,真性蛋白尿,、是由于肾脏病变，血浆 蛋白出现在尿中而形成的蛋白尿。从产生的机理上可分为：,肾小球性蛋白尿,肾小管性蛋白尿,混合性蛋白尿,上一页,下一页,返回,肾小球性蛋白尿,因炎症等因素的损害，导致肾小球毛细血管壁通透性增加及肾小球毛细动脉网的各层静电屏障作用减弱所致的蛋白尿。,特征：,以白蛋白增多为主，约占,70,80,，,2,微球蛋白正常或轻度增多，尿蛋白含量常,2g/24,（尿）。,主要见于肾小球疾病如急性肾小球肾炎等。,上一页,下一页,返回,产生的机制,孔径学说,肾小球病变时，漏出蛋白质分子的大小，取决于,受损膜孔大小,的变化。先是小微孔的孔径扩大，中等分子量的蛋白滤出增加，因此尿内白蛋白（分子量,66500,）增多，以后滤膜增厚变性，小微孔减少或消失，大微孔增多增大，大分子量蛋白如,Ig,（分子量,160000,）随着病变的进展而显著增加。,上一页,下一页,返回,产生的机制,肾小球病变时，根据孔径学说，漏出蛋白质分子的大小，取决于受损膜孔大小的变化。先是小微孔的孔径扩大，中等分子量的蛋白滤出增加，因此尿内白蛋白（分子量,66500,）增多，以后滤膜增厚变性，小微孔减少或消失，大微孔增多增大，大分子量蛋白如,Ig,（分子量,160000,）随着病变的进展而显著增加。实验证明，肾小球的炎症还可使肾小球基底膜上的酸性糖蛋白减少，使其原带有的负电荷消失，破坏肾小球基底膜静电屏障作用，引起蛋白滤出增加。,上一页,下一页,返回,选择性蛋白尿与非选择性蛋白尿,选择性蛋白尿,-,若肾小球损伤较轻，以万万的中分子量蛋白尿为主时，通过测定尿中白蛋白球蛋白比值，其比值者为选择性蛋白尿，表示病变不甚严重，对类固醇激素疗效好。,非选择性蛋白尿,-,病变加重，大分子量蛋白质如,Ig,、,Ig,甚至,Ig,也漏出，则称为非选择性蛋白尿，预后不好。,上一页,下一页,返回,肾小球性蛋白尿,选择性蛋白尿：,判断肾小球损伤程度有一定的参考价值，肾小球损伤比较轻时，主要滤过的物质是清蛋白、转铁蛋白等相对分子量为,49,万的蛋白质。蛋白质定量为,+,，当尿蛋白定量,3.5g/24h,时，称为肾病性蛋白尿，最典型的例子是肾病综合症。,非选择性蛋白尿,：反应的是肾小球毛细血管壁有严重的损伤，尿蛋白成分以大和中分子量的蛋白质存在，如免疫球蛋白、补体、清蛋白等。多见于原发性肾小球疾病及继发性肾小球疾病如糖尿病肾炎、红斑狼疮肾炎。如果不及时治疗，会导致肾衰。,是因为感染或中毒所致肾小管损害或继发于肾小球疾病时，近曲小管损伤，重吸收能力下降，出现的蛋白尿称之为肾小管性蛋白尿。,尿中以小分子蛋白质为主（,-2,微球蛋白、溶菌酶），白蛋白正常或轻度。,尿蛋白定量：,12g/24h,定性：为,+,常见疾病：肾小管间质病变、中毒性肾间质损害、草药中毒引起的选择性肾小管蛋白尿，常伴有明显的管型,肾小管性蛋白尿,混合性蛋白尿,肾脏病变同时累及肾小球和肾小管，其蛋白尿,特征,为低分子量和高分子量蛋白均大量增多，是肾功能不全的指标。见于慢性肾炎，慢性肾盂肾炎、肾小球滤过率降低，慢性阻塞性或非阻塞性间隙性肾脏病变等有关疾病。,上一页,下一页,返回,（,2,）特殊形式的蛋白尿,肾小球和肾小管功能均正常，但由于血浆中含有大量低分子蛋白质，致使肾小球滤过液内的蛋白质超过肾小管的重吸收能力而产生溢出性蛋白尿。,上一页,下一页,返回,血红蛋白尿,在急性溶血性疾病时，红细胞大量破坏，血浆中游离血红蛋白超过肾阈值（,1.5g/L,）后，即可出现于尿中。可用隐血试验检查。,上一页,下一页,返回,肌红蛋白尿,骨骼肌或心肌损害时，释放出大量肌红蛋白（分子量,16700,），易随尿排出。,用,80%,饱和硫酸胺沉淀,Hb,后再行隐血检验，若结果呈阳性反应，可证实其存在。,上一页,下一页,返回,溶菌酶尿,单核细胞性白血病合并高溶菌酶血症、慢性鎘中毒时，血浆中溶菌酶浓度增高，尿中排出也增多。,上一页,下一页,返回,本,-,周蛋白尿,本,-,周蛋白（,BJP,）于,1948,年,ence,-Jones,首先发现而命名。,它实属免疫球蛋白的轻链部分，因此又称轻链尿。主要由骨髓瘤细胞制造，因其轻重链的产生失去同步性（每致轻链过剩），或轻重链结合上有缺陷而致血中轻链过剩。,上一页,下一页,返回,本,-,周蛋白尿,本,-,周蛋白分子量很小，单体者仅,22000,，其二聚体也仅为,44000,，可自由地通过肾小球滤膜，若其量超过近曲小管所能重吸收的极限，则自尿排出。,BJP,尿可见于,50,70,的多发性骨髓瘤和,16,25,的原发性巨球蛋白血症患者。,上一页,下一页,返回,组织蛋白尿,由于炎症或药物等刺激泌尿系统分泌的蛋白质增多，如,-,糖蛋白、粘蛋白，肾小管代谢产生的蛋白质和肾组织破坏解离的蛋白质等。,其他：如核蛋白、蛋白胨等。前者见于泌尿系炎症尿中，后者可见于有组织破坏、肿瘤，或脓肿吸收时。,上一页,下一页,返回,（,3,）非肾性蛋白尿,指尿内混有来自肾脏以下的泌尿生殖器官的大量血、脓、粘液等含蛋白成份的物质，可致尿蛋白定性阳性。故又称为假性蛋白尿。,这些混入物可引起肉眼可见的混浊且易沉于管底，而真性蛋白尿并不影响尿的外观，它可以在完全透明的尿内存在，但在振荡时产生大量不易消失的泡沫。,上一页,下一页,返回,二、尿液蛋白质测定方法,（一）定性试验目前临床上应用的蛋白定性试验，检出的灵敏度不尽相同，从,0.05,.15g/,不等。,上一页,下一页,返回,尿液蛋白质的定性检验,加热乙酸法,：,加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，促使蛋白沉淀。,灵敏度为,0.15g/L,，,影响因素少。,磺基水杨酸法,：在略低于蛋白质等电点的,pH,条件下，蛋白质带有正电荷的氨基与带负电荷的磺基水杨酸根相结合，形成不溶性蛋白沉淀。,灵敏度,0.05-0.1g/L,，,某些药物可以造成假阳性。,干化学试带法,：蛋白质与溴甲酚蓝、四溴酚蓝二酯结合，蛋白质离子吸引带相反电荷指示剂，形成复合物发生颜色改变。,只与白蛋白反应，不与球蛋白反应。,庆大霉素、磺胺、含碘造影剂等,1,加热乙酸法,原理,加热使蛋白质变性凝固，加稀乙酸使尿液,pH,值下降接近蛋白质等电点（约为,H4.,），有利于变性蛋白凝固沉淀。加酸还可消除尿中受热而出现的磷酸盐结晶等。,上一页,下一页,返回,试 剂,.0,乙酸溶液：,冰乙酸,5mL,加蒸馏水至,100,L,上一页,下一页,返回,操 作,取试管一支，加清晰尿液至试管的,/,处，用试管夹斜持试管下端，于酒精灯火焰上加热尿液的上,/,段，使之沸腾。滴加冰乙酸滴滴，再继续煮沸，以试管下段未曾受热处作对照，立即按表判读结果。,上一页,下一页,返回,注意事项,（）本法检出灵敏度为,50,g,L,15,mg,L,，干扰因素很少被确认为尿蛋白定性试验 的参考方法。尿蛋白含量较低时，加酸后才有混浊出现，因此必须坚持加热,-,加酸,-,再加热的程序。加入的乙酸量要适当，过多过少均可导致阳性反应程度的减弱。,上一页,下一页,返回,注意事项,（,2,）长期禁盐患者，因尿中电解质含量过少可致假阴性，试验时须先于尿液中加滴一滴饱和氯化钠液，再行操作。,（,3,）陈旧尿液含大量细菌可引起假阳性，标本内含有其他分泌物（如女性生殖道分泌物）或碘造影剂、降血糖药等也可出现假阳性。,上一页,下一页,返回,请您思考：,导致加热乙酸法假阴性的因素有哪些？,答案：,1.,加入的乙酸量过多过少,2.,长期禁盐尿中缺乏电解质,上一页,下一页,返回,原理：,在略低于等电点的,pH,条件下，蛋白质带有阳电荷的氨基与带有阴电荷的磺基水杨酸根相结合形成不溶性蛋白盐沉淀而显现混浊现象。,2.200g/,磺基水杨酸法,上一页,下一页,返回,本法操作简便、灵敏度高，可检出少于,50,g,的蛋白尿，又可用以筛查本,-,周蛋白，本法对选择性及非选择性蛋白尿反应基本一致。故已被确定为蛋白尿定性试验的首选方法。,上一页,下一页,返回,00g/L,磺基水杨酸水溶液：,取磺基水杨酸,20g,，用蒸馏水溶解后加至,100,。,试 剂,上一页,下一页,返回,操 作,（,1,）试管法：取试管,1,支加清晰尿液约,1,，滴加磺基水杨酸溶液,1,滴轻轻混匀，于,1min,内观察结果。,（,2,）凹玻片法：在凹玻片的两个凹孔内，各加尿液滴（,0.2,），于一凹孔内加磺基水杨酸液,1,滴另一孔不加作对照，轻轻混匀，在黑色背景下立即观察结果。,上一页,下一页,返回,结果判断,清晰透明无变化 阴性（）,仅在黑色背景下可见极轻度混浊 极微量,不需黑色背景即可见到轻度混浊 微量,明显的白色混浊，但无颗粒沉淀 十,明显混浊出现颗粒 十十,明显混浊出现絮状沉淀 十十十,严重混浊并有大凝块 十十十十,上一页,下一页,返回,注意事项,（,1,）本法操作简便，灵敏度高。可检出,50g,的蛋白尿。易见极微量蛋白，无临床意义。判断结果时间应严格控制在,1min,内，否则可使反应强度升级。,（,2,）尿液明显混浊不适用本法测定。,（,3,）本,-,周蛋白、蛋白胨、粘蛋白等均可呈阳性反应。,上一页,下一页,返回,注意事项,（,4,）超大剂量的青霉素（青霉素钾盐,4,万,ml,）、,SMZ,（,200,L,），,PAS,（对氨水杨酸,50,L,）时，可致明显混浊，但加热煮沸后均消失，有别于蛋白尿，且此类浓度临床治疗上难以达到。有机碘造影剂可致假阳性，应注意用药史。此外尿中含高浓度尿酸或尿酸盐时也可是假阳性，特点为滴加试剂,1min,后，尿液逐渐呈蛛丝状混浊，其后漫漫扩散，薄薄覆盖于尿液表面，加热或加碱可迅速消失。,上一页,下一页,返回,请您思考：,导致磺基水杨酸法呈假阳性的因素有哪些？,答案：,1.,观察结果的时间过长,2.,超大剂量的青霉素，,SMZ,、,PAS,等药物,3.,有机碘造影剂,4.,高浓度尿酸或尿酸盐,上一页,下一页,返回,3.,试纸法,原理,:,利用酸碱指示剂的蛋白质误差理,各种酸碱指示剂都有一定,p,变色范围，在一定,pH,缓冲液中色调比较稳定当溶液中存在蛋白质时，,由于蛋白质离子与带相反电荷的指示剂离子的吸引形成复合物，引起指示剂的进一步电离，,从而超越缓冲范围，指示剂发生颜色改变溶液中蛋白质浓度越大，变色程度亦相应越大，,这一现象称指示剂的蛋白质误差。,上一页,下一页,返回,原理,:,利用酸碱指示剂的蛋白质误差理,四溴酚蓝为酸性的酸碱指示剂（变色范围,3.0,.6,）在溶液中产生指示剂阴离子，在,p,3,的枸椽酸缓冲液中（此,p,值应低于蛋白质的等电点，使蛋白质在溶液中呈阳离子）与溶液中的蛋白质作用，产生颜色变化后与标准色板比色，测得结果。,上一页,下一页,返回,方法,取试纸条浸入被检尿中，立即取出，在盛尿瓶边刮去多余尿液，约,S,后，与所附标准色板进行比色,结果判断,上一页,下一页,返回,注意事项,.,四溴酚蓝对白蛋白的反应较球蛋白、血红蛋白、本一周氏蛋白及粘蛋白灵敏，主要对白蛋白起反应，但肾病患者尿中蛋白质除白蛋白外还有球蛋白故不适用于肾脏病患者。,2.,试纸必须防潮、防日晒，避免油污酸碱，使用时手勿触及试剂部分,.,浑浊尿不影响比色。但尿色异常如血尿、血红蛋白尿、黄胆尿等，则有妨碍血尿可离心后用上清液检查。,上一页,下一页,返回,注意事项,尿液过酸（,pH,）或过碱（,p,）时，超越试纸缓冲力，可出现假阴性或假阳性反应必要时用稀乙酸或氢氧化钠调整尿液,p,到之间后再测定蛋白质,尿液必须新鲜，陈旧尿液可因尿素分解而呈碱性，造成假阳性。其他药物、酮体等对本试验均无影响球蛋白、本,-,周蛋白，一般不呈阳性反应。,上一页,下一页,返回,(,二,),尿中本,-,周蛋白检验,本,-,周蛋白是免疫球蛋白的轻链单体或二聚体，因抗原性不同而分为,(,appa,）型和（,ambda,）两型。在浆细胞恶性增生时由异常浆细胞合成并且在未与重链装配前，即从细胞内分泌于血浆中。由于分子量小，故可自由地通过肾小球滤膜而排于尿中。本,-,周蛋白具有在,40,时凝固、接近,100,时又溶解的特性故又称为凝溶蛋白。其定性检查常用热沉淀法。,上一页,下一页,返回,原理,利用本,-,周蛋白加热凝固，煮沸时溶解，温度降低后又出现凝固的特点，测定其存在。,试剂,2mol/,乙酸,-,乙酸钠缓冲液（,pH4.90.1,）：冰乙酸,4.1,l,、乙酸钠,17.5g,，蒸馏水溶解后加至,100,。,上一页,下一页,返回,取新鲜透明尿液,4,l,置试管内，加乙酸缓冲液,1ml,，混匀。在,56,水浴中,15min,尿液混浊或出现沉淀，再将试管移置于沸水中,3min,，如混浊变清或减弱，即为本,-,周蛋白阳性,.,如尿液中同时存在白蛋白和球蛋白，煮沸后混浊沉淀比,56,时增加，可将沸水中的标本趁热立即过滤，滤液从透明至温度降低后又混浊，再煮沸又透明，为本,-,周氏蛋白阳性。,操 作,上一页,下一页,返回,本,-,周蛋白的定性检测尚有盐析法、浓盐酸法及对甲苯磺酸试验等,确证试验以醋纤膜电泳为主要手段。本,-,周蛋白可在球蛋白区出现一条浓集的区带,-M,带。,上一页,下一页,返回,注意事项,.,尿液必须新鲜，否则白、球蛋白分解变性可干扰试验。,.,尿液,p,必须调整到,4.5,左右。混浊尿液应离心后取上清液试验。,.,除去尿液中白、球蛋白时，动作要迅速并需保持高温，否则也将本,-,周蛋白滤掉。,上一页,下一页,返回,注意事项,.,本,-,周蛋白含量过高时，可将尿液稀释后再测，否则在,100,时溶解不完全,;,含量太少时，可将滤液分,3,管，各加等量,30g/,磺基水杨酸分别置室温、,56,和,100,中，当,56,管比室温和,100,管显混浊（后两者均无沉淀）时，可判为阳性。,上一页,下一页,返回,(,三,),尿蛋白定量,总体要求,:,测量范围宽并有较高的灵敏度和特异性，不受白蛋白和球蛋白比值的影响，操作简便快速。常用方法有双缩脲比色法、考马斯亮兰,250,比色法。丽春红,-,法及磺基水杨酸,-,硫酸钠比浊法等。,上一页,下一页,返回,尿液蛋白质的定量检验,比浊法,磺基水杨酸,三氯乙酸,钨酸,氯化苄甲乙氧胺,氯化苯甲烃胺,双缩脲法：,经典方法,通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度,碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀,染料结合法,直接法,考马斯亮蓝,G-250,邻苯三酚红,染料和蛋白质结合时，其最大吸收峰发生漂移,沉淀法,丽春红,S,苯胺蓝,蛋白质与结合的染料在,TCA,的作用下共沉淀。然 后碱性环境使沉淀复溶，测定吸光度。,尿液蛋白质电泳,尿液标本,葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、聚乙二醇,乙酸纤维膜电泳、琼脂或琼脂糖电泳、,SDS-PAGE,电泳,胶体金、胶体银、考马斯亮蓝,G-250,染色,光密度计扫描、结果分析,尿液蛋白质检查的意义,生理性蛋白尿：,体位性、功能性,病理性蛋白尿：,肾前性、肾性、肾后性,蛋白尿的分类：,轻度蛋白尿,4g/24h,蛋白尿的选择性,蛋白尿的选择性是判断肾小球损伤严重程度的指标,选择性蛋白尿,非选择性蛋白尿,选择性蛋白指数（,SPI,）,SPI=,（尿,IgG,/,血清,IgG,）,/,（尿,Alb/,血清,Alb,）,SPI0.2,选择性差,其他几种选择性蛋白指数,球蛋白,/,白蛋白：,0.5,非选择性蛋白尿,肾小球蛋白比（,RGP,）：,SDS-PAGE,电泳,RGP=,分子量为,6.6,万,-9.0,万的蛋白质量,/,分子量超过,15,万的蛋白质量,7,选择性好,思考题：,试分析比较急性肾小球肾炎和慢性肾盂肾炎患者的尿液特点。,急性肾小球肾炎：肾小球性蛋白尿，白蛋白增多为主，约占,70-80%,，,2,微球蛋白正常或轻度增加。尿蛋白定量,2g/24h,慢性肾盂肾炎：肾小管性蛋白尿，,2,微球蛋白增加为主。白蛋白正常或轻度增加。尿蛋白定量20,mg/L,或尿总蛋,白,30mg/24h,作为尿微量白蛋白的临界值。,临床意义,1.,早期肾损害的筛检定期监测有助于早期发现肾脏损害,2.,过敏性紫癜的肾功能监测早期发现有助于指导临床防止并发肾损害。,3.,肾小球肾炎的病情观察,4.,其它 尿路感染等,2,-,microglobulin,性质：一种低分子量的蛋白质（,1.18,万），是细胞膜上完整组织相溶性抗原,HLA,的一部分。,检测方法：放射免疫分析（,RIA,）、,酶免疫分析（,EIA,）,参考值,:,血,2,-M 3.0mg/L,尿,2,-M0.2 mg/L,临床意义：肾小管疾病、血清,2,-M,异常增高,尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查,1.hemoglobin,正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合，以复合物的形式运转至单核,-,巨噬细胞系统被代谢，不能从尿液中排出。,疾病时尿液中血红蛋白有两个来源：,1.,发生,血管内溶血,，超过珠蛋白的结合能力，游离血红蛋白从尿液中排出。,2.,尿路（尤其是上尿路）出血,，红细胞在,低渗或者高渗,的环境下破坏逸出的血红蛋白。,检测方法：,试纸法：,利用血红蛋白中,亚铁血红素,具有,类过氧化物酶,作用，在邻联甲苯胺等供氢体存在下，使过氧化物还原为水，而邻联甲苯胺被氧化成有色物质。,免疫测定方法：,利用,抗人血红蛋白单克隆抗体,临床意义：,1,、尿路炎症、结核等尿中红细胞增多时为阳性。,2,、尿中,Hb,增多见于阵发性,Hb,尿症，还见于各种中毒、感染、烧伤、输血不合等,3,、明显的血尿和,Hb,尿，可用显微镜鉴别。,尿血红蛋白 测定方法及评价,测定方法,原理,评价,湿化学法,氧化还原法,简便、快速，敏感度高，但 受,Vit,C,等氧化物干扰，特异性差，为过筛检查,干化学试带法,氧化还原法,同上,单克隆抗体免疫胶体金法,抗原抗体结合法,特异性强操作简便、快速,肌,红蛋白尿检查,肌红蛋白（,myoglobin,Mb,）,是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素的蛋白质。当有肌损伤时，肌红蛋白释放进入血循环，因其分子量较小，易通过肾小球滤过，而排入尿中。其能溶于,80%,饱和度的硫酸铵溶液中，而血红蛋白则不能，可资区别。,检测方法：化学法,临床意义：,1,、阵发性肌红蛋尿,2,、创伤：挤压综合症、子弹伤、烧伤等,3,、组织局部缺血：如心肌梗塞早期、动脉阻塞缺血,4,、代谢性肌红蛋白尿,5,、原发性肌疾病,6,、过度剧烈运动或长期行军,3.hemosiderin,当发生血管内溶血时，大部分血红蛋白随尿排出，其中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收后在肾小管上皮细胞内分解形成血铁黄素，再随细胞脱落至尿中排出。,检测方法：,Prussian,反应，当尿中含有铁血黄素时，其中高铁离子与亚铁氰化钾作用，在酸性环境下，产生蓝色的亚铁氰化钾沉淀。,注意事项：,1.,避免铁污染；,2.,清晨第一次尿阳性率较高,临床意义：,血管内溶血、行进性血红蛋白尿。,Tamm,Horsfall,protein,TH,蛋白由,Henle,袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔基复合体产生，是一种肾特异性蛋白质。是构成管型的一种重要蛋白。,检测方法,：酶联免疫吸附法、放射免疫法,临床意义,：协助诊断上尿路疾患,有助于泌尿系统结石形成机制的研究。,尿液酶测定,尿液酶的来源：,血液的酶：,淀粉酶、溶菌酶,肾实质的酶：,肾小管刷状缘,（,-GT,、,AAP,、,LAP,、,ALP,、,-GLU,）、,溶菌体,（,NAG,、,ACP,、,-,葡萄糖醛酸苷酶）、,胞浆,（,LDH,）,及线粒体,（,AST,）,尿路及生殖系统的酶：,前列腺,（,ACP,、,NAG,）、,精液,（,LDH,、,hyaluronic,acid,）、,肿瘤细胞,尿液酶测定时尿液标本的处理方法：,尿液通常为弱酸性，且蛋白质浓度较低，不利于尿酶活力的保存，因此必须,及时测定和处理,。,大部分尿酶活性比血浆酶活性低，在测定时适当加大标本用量或延长酶作用时间。,尿液中含有较高浓度的低分子物质，如尿素、尿酸、肌酐、硫酸盐、磷酸盐等，他们可能是某些酶的抑制剂，因此必须对尿液标本进行预处理：,超滤法、透析法、凝胶过滤法,1.N-,乙酰,-,-D-,氨基葡萄糖苷酶,(N-acetyl-,D-,glucosaminidase,NAG,）,NAG,是一种位于溶酶体内的酸性水解酶，存在于所有组织中，以前列腺和肾近球肾小管溶酶体含量最高。,临床应用：,各种肾脏疾病：急慢性肾功能不全、肾病综合症,肾移植排斥反应：早期诊断,药物性肾损害：,其他系统疾病：糖尿病肾病、高血压肾病,2.,-,葡萄糖苷酶（,-glucosdiase,-GLU,）,-GLU,主要存在于,肾小管上皮细胞刷状缘，,在血清中的含量极低，且分子量大（,9,万），不易通过肾小球，因而尿中的,-GLU,主要来自肾小管上皮细胞。,测定：用麦芽糖做底物，经,-GLU,的水解作用生成葡萄糖，再用葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖的生成率。,临床意义：,肾小管损伤的敏感指标,3.,谷氨酰转移酶（,-glutamyl,transferase,，,-GT,）,-GT,广泛存在于人体各组织中，以肾、肝、胰等组织含量最高。,尿中,-GT,浓度较高，原尿无需预先浓缩。,用,-,谷氨酰对硝基苯胺做底物，测定游历的对硝基苯胺量。,临床意义：,-GT,常作为药物性肾损害的诊断指标。,-GT,在急性肾炎、肾盂肾炎、肾结石时升高,-GT,在慢性肾衰、肾癌时降低。,尿液绒毛膜促性腺激素检验,HCG,是胎盘绒毛膜滋养层细胞产生的一种具有促性腺发育的蛋白类激素。由,和,两个肽链（或亚基组成）。其主要功能是刺激黄体，有利于雌激素和黄体酮持续分泌，以促进子宫蜕膜的形成，使胎盘生长成熟。临床上将其作为早期妊娠及滋养层肿瘤诊断的主要参考指标。,尿液,HCG,检验,（一）胶乳凝集抑制试验,（二）酶联免疫试验,（三）放射免疫吸附试验,（四）胶体金标记免疫试验,方法学评价,HCG,检查方法有生物法、化学法、免疫学等，免疫法的检测手段不断更新，向特异、简便、快速、普及等方向发展。,HCG,检查的临床意义,1,、诊断早期妊娠。,2,、异常妊娠与胎盘功能的鉴定,3,、滋养细胞肿瘤诊断与治疗监测,4,、其他,谢谢大家！,