【干货】间充质干细胞功能及应用.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,间充质干细胞,功能及临床应用,MSC,简介,MSC,安全性评价,MSC,功能与应用,中国的政策,间充质,干细胞,简介,1,#,间充质,干细胞,间充质干细胞（,mesenchymal,stem,cells,，,MSC,），,来源于发育早期的,中胚层，,1968,年,MSC,在骨髓中,发现,，后发现其,具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。,BM-MSC,接种在珊瑚状羟基磷灰石微载体（,3,小时后的扫描电镜,500X,）,Tissue,Eng 2002;8(6):911-920,间 充 质 干 细 胞,没满,4X,长满,4X,间 充 质 干 细 胞,贴壁生长,特定表面标志,阳性,(95,%),阴性,(2,%),CD105 CD45,CD73 CD34,CD90 CD14 or CD11b,CD79 or CD19,HLA-DR,多向分化潜能,体外分化能力,:,软骨，成骨，脂肪,The International Society For Cell Therapy,Cytotherapy,8:315-317,2006,鉴定标准（,最低,标准）：,Annu Rev Pathol 2011;6457-478,无处不在,MSC,脂肪,骨髓,脐带,脐带血,牙髓,外周血,胸腺,羊膜,富含,MSC,的人体组织,图片来自网络,年龄与骨髓,MSC,含量的变化,研究的里程碑,安全,1,，,1995,年间充质干细胞首次应用于临床治疗，评价血液肿瘤患者使用后的安全性和有效性。,研究的里程碑,2,，,1999,年,science,发表文章，首次证明,MSC,的多向分化能力！,分化,研究的里程碑,3,，,2002,年,Exp,Hematol,和,blood,发表文章，首次证明,MSC,具有免疫抑制能力,！,免疫调节,研究的里程碑,4,，,2006,年国际细胞治疗协会（,ISCT,）颁布了间充质干细胞的定义（最低鉴定标准）,。,统一的标准,研究的里程碑,5,，,2012,年,Osiris,公司申报,MSC,作为药品上市得到加拿大,FDA,的批准，,MSC,的临床应用达到一个历史性高度！,MSC,药物,1,，活性差、功能低的间充质干细胞（自体骨髓间充质干细胞）,2,，,脐血单个核,细胞（,mononuclear cell,，不是,monocytes,）,冒充间充质干细胞（部分医院和企业）,3,，干细胞制剂里添加各种药物（激素）,4,，,治疗方案没有经过,优化,5,，各种忽悠的,干细胞类型，,比如：外周血干细胞（外周血含有少量的间充质干细胞，但目前无法扩增到临床所需的细胞数）、母乳干细胞（退一步说，即使母乳里含有干细胞，但经过胃酸和肠道消化，早就死翘翘了）、植物干细胞、心脏干细胞（专业上有心肌干细胞）等,负面消息（包括无效）的特点,MSC,的新理解,Cell Immunol 2012;272(2):112-116,MSC,是机体免疫系统安全信号的来源！,血液病,1994,年,Matzinger,提出“,danger model”,核心：免疫系统只关心其是否受到损坏来启动免疫反应或诱导免疫耐受,受到损坏（,dangerous,）,活化,APC,活化,T-cell,未受到损坏（,not dangerous,）,诱导免疫耐受,signals,遗憾,：当时没有,明确涉及,dangerous signals,和,safe,signals,的,定义和内涵。,Danger Model,应用受限,2001,年,Matzinger,提出具体的“,dangerous signals”,Signals,Dangerous siganls,Safe signals,endogenous:,Hsp,DNA,RNA,TNF,CD40L,exogenous:,unmethylated CpG sequences in microbial,（,2001,年）,?,意义,：能够解释更多免疫学现象，成功地解释了坏死细胞为何能诱导免疫应答反应。,Danger Model,应用受限,MSCs,是免疫系统“安全信号”的来源,acute phase,chronic phase,safe signals,self-MSCs,Cell Immunol,.2012;272(2):112-6,MSC,在,免疫中的作用,思 考,人体含丰富的,MSC,MSC,具有很强的免疫调节功能,为何还会出现自身免疫性疾病？,间充质,干细胞,安全性评价,2#,“成瘤性,/,致癌”的担忧和恐惧是,干细胞,临床应用的最大障碍！,担忧和恐惧的最早来源是胚胎干细胞的强致癌性，包括后来的,iPS,。,What about mesenchymal stem cell(,间充质干细胞,),？,Think,about,hemopoietic stem cell(,造血干细胞,),！,不是,所有,的干细胞都具有成瘤性,/,癌变！,1,，间充质干细胞广泛存在于人体中，包括外周血、骨髓、脂肪、所有组织器官的基质（,Ann Med 2005;37(7):469-479,）。,如果间充质干细胞具有成瘤性，那么肿瘤一定伴随着每个人的完整人生！,2,，每次患者输血或造血干细胞移植（骨髓移植），都伴随着输入少量的间充质干细胞。,但从来没有证据证明输血和造血干细胞移植能导致肿瘤的出现！,3,，间充质干细胞作为药品，已经在国外上市，那是否意味着安全性已经得到国外的认可？能否得到中国专家、医生、民众的认可？,值得反思的三点,安全性评价,临床使用安全性报道,：,-,J Gastroenterol Hepatol 2012;27 Suppl 2112-120,-Stem Cells Transl Med 2012;1(10):725-731,安全性评价,临床使用安全性报道,：,-Stem Cells Dev 2013;22(24):3192-3202,-J Tissue Eng Regen Med 2011;5(2):146-150,安全性评价,临床使用安全性报道,：,8,个,随机,对照,临床试验,（,RCTs,）,发现,MSC,治疗组和对照组的感染率没有差异，明确提出,MSC,治疗不会增加感染的,风险,，,MSC,治疗组和对照组在恶液质和成瘤方面没有,差异,。,J Invasive Cardiol 18:,552556,；,Chin Med J(Engl),117:14431448,；,J,Am Coll Cardiol 54:,22772286,；,Stem Cells 28:,10991106,；,Clin,Pharmacol Ther 83:,723730,；,Leukemia,22:593599,；,Zhonghua,Xin Xue Guan Bing Za Zhi,34:107110,(Chinese,),；,Journal,of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research,11:12771279(Chinese),安全性评价,临床使用安全性报道,：,对,目前大量的临床试验的文献进行,分析,（,Meta-Analysis,）,，,发现,MSC,输入治疗与,发烧,存在一定的关联性，而与其他文献所报道的不良反应没有必要的联系,，认为,MSC,治疗是安全,的,。,PLoS,One 2012;7(10):,e47559,MSC,治疗软骨损伤，,41,个病人的,45,个关节软骨，最长观察,11,年,5,个月，没发现患者得肿瘤等,副作用，证明了,MSC,的长期安全性！,J,Tissue Eng Regen Med 2011;5(2):146-150.,安全性评价,风险控制,基因组稳定性,体外扩增导致的基因突变,微生物,病毒,细菌,支原体,辅料素,内毒素,胎牛血清残留,稳定性评价,生产工艺,Array-CGH and,cytogenetic analyses showed that,BM-MSCs,expanded in,vitro did,not show chromosomal abnormalities.,Telomerase activity,and hTERT transcripts were not expressed in any,of the,examined cultures and telomeres shortened during,the culture,period,.,(Cancer Res 2007;67(19):9142-9149,),P14,P18,稳定性评价,稳定性评价,P30,Although,hUC-MSCs with genomic,alterations,do not undergo malignant transformation,periodic,genomic monitoring,and donor management focusing on genomic stability are recommended before these cells are used for,clinical applications,.(Cell Death Dis 2013;4e950),生产工艺管理要求,干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则（试行）,干细胞制剂的质量控制,明确提出要求：,“,应制定干细胞采集、分离和干细胞（系）建立的标准操作及管理程序，并在,符合,GMP,要求,基础上严格执行。,”,GMP,级车间,欧盟,GMP,关键点,（,Cytotherapy 2015;17(2):128-139,）,间充质,干细胞,功能及应用,3#,多向,分化,免疫调节能力,消炎,能力,促进,器官特异性干细胞增殖,修复,组织,器官,软骨损伤,/,缺损、血管新生,GVHD,、自免肝、,RA,、,SLE,、移植,排斥,各种炎症、脑水肿、溃疡性结肠炎,肝病、神经系统疾病、再障,心梗、中风,间充质干细胞,功能,应用,多重治疗机制，但有偏重！,MSC,研究的差异性,Cell,Cycle;9(15):2923-2924,MSC,分泌的趋化受体（绿色）和趋化因子（蓝色）,Stem Cells 2008;26(9):2287-2299,MSC,具有很强的趋化性,Cell Stem Cell 2009;5(1):54-63,MSC,在肺部滞留，激活,TSG-6,的高表达。,MSC,在肺部的清除和激活,Control Nude NOD/SCID Nude Balb/c Balb/c,MSC,MSC,Fibroblast,Fibroblast,MSC,体内代谢,Zangi L,et al.Stem Cells 2009;27:2865-2874,天数,Circulation 2005,;,112(10,):1451-1461,Cytotherapy 2015;,肺部没有损伤,肺部有损伤,Circulation 2005;112(10):1451-1461,脐带,MSC,和,骨髓,MSC,（细胞因子表达）,Biology of Blood and Marrow Transplantation,13:1477-1486,2007,我们的结果,:Haematologica,.2006;91:1017-26,Cytokine,UC-MSC,BM-MSC,IL-6,+,+,LIF,+,+,IL-3,-,-,GM-CSF,+,-,G-CSF,+,-,SDF-1,+,+,M-CSF,+,+,VEGF,+,+,FLt-3,+,+,SCF,+,+,2,MG,+,+,评价,MSC,的质量,克隆形成能力,细胞大小,免疫调节能力,分泌细胞因子的量,MSC,免疫调节因子,趋化因子,营养因子,血管再生因子,抑制疤痕因子,抗凋亡因子,HGF,、,TGF-1,、,PGE2,、,IDO,RANTES,、,SDF-1,、,MIP-1,、,MCP-1,HGF,、,NGF,、,FGF-2,、,PDGF-AA,、,PDGF-BB,、,EGF,VEGF,165,、,FGF-2,、,EGF,、,PDGF-AA,、,PDGF-BB,、,HGF,、,FGF-2,VEGF,165,、,FGF-2,、,HGF,Stem Cells 2015;33(6):1878-1891,空气洁净度,脐带,脂肪,骨髓,影响,MSC,的质量的因素,MSC,功效,来源,病理生理,细胞活率,体外培养,健康,患者,培养营养,年青,年老,活率越高越好,概念的差异,临床研究：,clinical study,是以人体疾病,的诊断、治疗、预后、病因和预防为主要研究,内容。,临床试验：,clinical trial,指,任何在人体（病人或健康志愿者）进行,药物的系统性研究,，以证实或揭示试验药物的作用、不良反应及,/,或试验药物的吸收、分布、代谢和排泄，目的是确定试验,药物的疗效与安全性,。临床试验一般分为,I,、,II,、,III,、,IV,期临床试验和,EAP,（,expanded access program,）临床试验,。,间充质干细胞,临床试验：全球（,554+115,项）,2015-11-1,搜索词,结果,间充质干细胞,临床,试验,：中国（,109+9,项）,2015-11-1,搜索词,结果,全球分布（区域）,Up to 2015-11-01,MSC,的全球,clinicaltrials,项目,完成临床试验发表文章的病种,MSC,免疫系统,心血管,造血系统,神经系统,运动医学,呼吸系统,GVHD,、肾移植,Crohns,病,、,RA,急性心梗、,心肌缺血、心衰,难治性心绞痛、,扩张型心肌病,下肢缺血,再障、,GVHD,帕,-,罗二氏,综合征,脊髓,损伤、,MS,膝骨关节炎,软骨缺损,骨发育不全,支气管肺发育不全,COPD,MSC,质量,最佳治疗方案,最佳治疗效果,间充质干细胞,美国,FDA,对间充质干细胞治疗的支持！,间充质干细胞,国家,年份,公司,细胞来源,适应症,加拿大,FDA,2012,美国,Osiris,公司,骨髓,GVHD,韩国,FDA,2011,FCB-Pharmicell,公司,自体骨髓,急性心梗,韩国,FDA,2012,Medi-post,公司,脐带血,退行性关节炎和膝关节软骨损伤,韩国,FDA,2012,Cuepistem,公司,自体脂肪,复杂性,Crohn,病并发肛瘘,新西兰,FDA,2012,美国,Osiris,公司,骨髓,GVHD,瑞士,FDA,2012,美国,Osiris,公司,骨髓,GVHD,作为药品上市：,慎用症,：,严重,的,精神病史,，,目前病情仍未稳定,者；,肿瘤或癌症患者（取决于使用目的）；,高度过敏体质或有严重过敏,史,（产品的辅料）；,极,个别期望值过高，或者不,切合,实际,的,要求,者,；,间充质干细胞,免疫性疾病,间充质干细胞,World J Stem Cells 2014;6(5):526-539,World J Stem Cells 2014;6(5):526-539,The balance between these opposing pathways may serve to promote,host defense,on one hand and at the same time create a loop,that prevents,excessive tissue damage and promotes repair.(Cell Stem Cell 2013;13(4):392-402,.),不同来源的,MSC,的免疫功能比较,脐带,MSC,的免疫抑制功能优于健康人和,SLE,患者骨髓,MSC,，而且,MHC-I,类抗原表达量最低。,J Immunol 2014;193(9):4381-4390,思 考,现在的免疫学认识是否足以解释,MSC,临床现象？,MSC,免疫调节能力,aGVHD,组,MSC,治疗组,小鼠,GVHD,临床表现：,倦怠,、纳差、消瘦、体重下降,、,弓背,、,脱毛、腹泻,等,免疫重建,胸腺,组织具有可塑性，可通过治疗阻止或恢复胸腺功能。,我们证明间充质干细胞能促进胸腺的发育和免疫系统的重建！,Cell Mol Immunol 2014;11(3):275-284,骨髓,MSC,治疗,GVHD,a phase II study.Lancet 2008;371(9624):1579-1586,中国第一例,2006-9-26,造血干细胞移植治疗后，出现移植物抗宿主病（,GVHD,），表现为腹泻、皮疹瘙痒、肝脏损伤等，外周静脉输入间充质干细胞后，腹泻及皮疹消失、肝功能正常，血象显示造血干细胞正常造血。,脐带,MSC,治疗,GVHD,病例,1,肝功能改善,12/12,（,100%,）,腹泻次数减少,5/6,（,83.3%,）,皮疹消退,12/12,（,100%,）,口干眼干,1/1,（,100%,）,血象改善,3/3,（,100%,）,道培医院治疗,12,例患者的情况,GVHD,的表现：,生存率,100%,类风湿性关节炎（,RA,）,T,细胞介导的全身性自身免疫性疾病，由于病人免疫耐受机制的缺失，造成关节滑膜炎和关节损伤。,患者，女性，,26,岁，类风湿病史,10,年。,症状：头昏,疲劳乏力、颈椎僵硬,双手指骨关节变形、肿胀，活动受限，胃肠功能也减退，食欲不振，精神萎靡。,08,年,8,月,5,日，进行,UC-MSC,移植治疗。第二天，手指明显消肿，其它关节肿胀也消退，全身症状明显减轻，胃肠功能逐渐恢复，精神状态良好，现在可正常工作。,MSC,治疗类风湿性关节炎,悲喜孕事,MSC,治疗类风湿性关节炎,Stem Cells Dev 2013;22(24):3192-3202,治疗方案：,前三个月，每个月一次，,再隔,2-3,个月，第,4,次治疗。,异体骨髓,MSC,治疗,Crohns,病,多中心、,II,临床研究,Clin Gastroenterol Hepatol 2014;12(1):64-71,脐带,MSC,治疗,SLE,40,名活动期,SLE,患者（死亡,3,例），,1x10,6,/kg,，在第,0,天和第,7,天各静脉注射一次。,没有对症组。,a multicenter clinical study.Arthritis Res Ther 2014;16(2):R79,MSC,在肾移植中的应用,A,Randomized Controlled,Trial.JAMA,2012;307(11):1169-1177,肾移植,2,周后，,外,周静脉输入自体骨髓,MSC(1,2,),x10,6,/kg,间充质干细胞,组织器官损伤性疾病,异体骨髓,MSC,治疗,COPD,（慢阻肺）,Quality of Life,？,每个月一次，连续,4,次，,1x10,8,MSC/,次。,Chest 2013;143(6):1590-1598,自体骨髓,MSC,治疗多发性硬化,症（,MS,）,an open-label pre-test:,post-test study,with blinded outcome,assessments,10,名患者，,8,名健康者，治疗,一次，,(1-2)x10,6,/kg,，观察,1,年,。,Trials 2011;1262,自体脂肪,MSC,治疗膝骨关节炎,1x10,8,AD-MSC,关节腔注射能有效改善膝盖关节功能，减少疼痛。,Stem Cells 2014;32(5):1254-1266,异体骨髓,MSC,治疗心肌梗塞,随机、双盲临床研究：心肺功能明显改善，左心室射血分数明显提高。,没有统计再次心脏血管堵塞情况。,急性心梗再通后，外周静脉输入,(0.5-5)x10,6,/kg,的,MSC,，一次治疗。,J Am Coll Cardiol 2009;54(24):2277-2286,脐带,MSC,治疗心肌梗塞,多中心,II,期研究：心肌活力明显增强，左心室射血分数明显提高。,没有统计再次心脏血管堵塞情况。,。,急性心梗再通后，冠脉介入注射,6x10,6,MSC,，一次治疗。,BMC Med 2015;13162,自体骨髓,MSC,治疗慢性脊髓损伤,损伤局部介入注射,5x10,6,MSC,，一次治疗。,Stem Cell Res Ther 2014;5(6):126,异体骨髓,MSC,治疗儿童骨发育不全,MSC,治疗后，促进骨骼生长和骨密度增加。,三,个病人，没有对照组，没提及治疗方案。,Nat Med 1999;5(3):309-313,骨髓,MSC,治疗心肌缺血,12,个月后，,6-minute walk test,31,个病人,MSC,细胞数为,(2-20)x10,7,/,人,治疗一次,经心,内膜干细胞注射（,TESI,）,短期效果：提高生活质量，改善心脏功能。,JAMA 2012;308(22):2369-2379,模型鼠,治疗组,正常鼠,MSC,治疗脑中风,脐带,MSC,治疗，缺血区的血管密度增加，提高缺血区的血供！,MCAO(,中脑动脉闭塞,)rat model,患者，男性，,26,岁，突发大面积脑梗塞，全身瘫痪，知名专家诊断，“他们可能不能再坐起来了”。,07,年,12,月，,08,年,7,月,5,日两次输入患者儿子的脐带间充质干细胞，目前患者恢复了四肢的知觉，谈笑自若，,与正常人没有区别。,患者自行行走到医院进行第二次干细胞治疗。,MSC,治疗脑梗塞,MSC,治疗糖尿病足,田某某，女，,22,岁，因面部红斑，在当地医院诊断：系统性红斑狼疮，经激素冲击治疗无效，出现双侧股骨头坏死，此后患者出现头晕、疲乏，经第四军医大学附属医院诊断为再生障碍性贫血。,患者于,2010,年元月份入院检查，,血常规提示：,WBC 2.8,10,9,/L,，,Hb,：,76g/L,，,PLT 31,10,9,/L,，,血沉,80mm/h,，,MR,提示双侧股骨头无菌性坏死。,MSC,治疗再障,诊断：,1.,系统性红斑狼疮；,2.,慢性再生障碍性贫血,中度贫血；,3.,双侧股骨头无菌性坏死。,处理及效果：,经用间充质干细胞,8,10,7,静脉输注，,六周后,再次输注，复查血常规提示：,WBC 3.7,10,9,/L,，,Hb,：,90g/L,，,PLT 45,10,9,/L,，血沉下降至,40mm/h,，腹部,B,超提示肝胆肾胰未见明显异常。,MR,提示双侧股骨头无菌性坏死，与原片对照无进展。,十二周后,第三次输注，全身静脉间充质干细胞,4,10,7,静脉输注，,双侧股骨头插管,（髂外动脉内旋支），分别给予,1,10,7,干细胞，局部酸困不适减轻，面部红斑消退，面色红润，,半,年后生化及血常规正常。,任,xx,，男,76,岁，因患银屑病，经各方治疗效果不佳，长期服用甲氨蝶呤，,3,年前出现腹胀，下肢水肿，于,2010,年入院诊断为银屑病（红皮病型），肝硬化失代偿期 大量腹水，低蛋白血症，下肢水肿重度，经肝动脉插管注入间充质干细胞,1,10,8,/80ml,，术中无不良反应，,次日全身皮肤瘙痒停止，脱屑大幅减少，两月后患者皮肤呈局灶恢复,。,MSC,治疗银屑病并发肝硬化,患者治疗前后体征改变记录,前,后,朱,：女，,27,岁，,2008,年开始身体不适，,2010,年,3,月确诊为卵巢早衰。,去过多家三甲医院诊治，医生建议服用雌激素治疗，直至,50,岁。,2010,年,5,月开始服用雌激素。,2010,年,9,月，经朋友介绍，来医院进行间充质干细胞治疗。两周后潮热症状明显减轻，,1,个月后停用雌激素。到目前为止，应用干细胞治疗,3,次（,1,次,/,月）。建议治疗,6,次以上。,目前月经周期基本正常，各项指标恢复良好。,间充质干细胞治疗卵巢早衰,治疗后骨密度增加大约,5.7%,治疗后骨密度增加大约,2%,BMD 0.5217g/cm,2,BMD 0.5309g/cm,2,BMD 0.5601g/cm,2,BMD 0.5918g/cm,2,松质骨,Mrs.Na (Female/78,),密质骨,MSC,治疗放射性肺损伤,MSC,尾静脉注射，治疗放射性肺损伤大鼠模型。,28,天后，组化染色提示,MSC,治疗减少肺部炎症渗出、减少肺纤维化的形成。,Cytotherapy 2015;17(5):560-570,MSC,治疗放射性肺损伤,MSC,治疗放射性肺损伤，在于减少肺部炎症、减少肺上皮细胞的凋亡；减少促纤维化因子的表达，从而预防肺纤维化的形成。,Cytotherapy 2015;17(5):560-570,MSC,治疗放射性肠损伤,Cell Death Dis 2013;4e685,MSC,治疗肝病,在,clinicaltrials,登记注册的项目数,（,2015-11-1,）,应用受限,MSCs,及其向肝细胞分化后的,肝细胞样细胞（,HLCs,）,的功能比较：,MSCs,HLCs,免疫调节能力 减弱,分泌,HGF,减少,趋化能力 减弱,急性肝衰竭的疗效 减弱,MSCs,及其向肝细胞分化后的,肝细胞样细胞（,HLCs,）,的功能比较：,结论：直接用,MSCs,治疗急性肝衰竭的疗效优于分化后的,HLCs,。,Cytotherapy 2014;16(3):309-318,.,我国肝衰竭患者,2,年死亡率,1,，我国,报道肝衰竭的病死率为,73.9%,，其中急性肝衰竭为,87.8%,、亚急性肝衰竭为,69.3%,、慢性肝衰竭为,66.5%,，凝血功能越差，病死率越高（临床肝胆病杂志,2009,25(5):352-354,）；,2,，中山大学传染病医院（,3,附院）肝衰竭,2,年的死亡率到,50%,（和,MSCs,治疗组没差异）（,Peng,L.,D.Y.Xie,et al.(2011).Hepatology 54(3):820-828.,）。,3,，北京,302,医院肝衰竭,2,年的死亡率到,60%,，间充质干细胞（,MSCs,）治疗后降低到,30%,（,Shi,M.,Z.Zhang,et al.(2012).Stem Cells Transl Med 1(10):725-731,）,。,肝衰竭患者的选择,肝衰竭,肝移植,间充质干细胞,失败,成功,优先,MSC,治疗肝病的多重机制,Stem Cell Res 2013;11(3):,1348-1364,1,#,文献,题目,:,Autologous,bone marrow mesenchymal stem cell transplantation in liver failure patients caused by hepatitis B:short-term and long-term,outcomes(Hepatology,2011;54(3):,820-828),结论,:,短期内能改善肝功能，但长期没有效果。,治疗方案,:,骨髓来源的,MSC,，治疗,1,次，肝动脉介入，但没有细胞数。,间充质干细胞治疗肝衰竭的文献分析,P=0.715,临床大样本数据直接证明,自体骨髓,MSC,治疗肝衰竭,无效,！,2,#,文献,题目,:,Human mesenchymal stem cell transfusion is safe and improves liver function in acute-on-chronic liver failure,patients,(,Stem,Cells Transl Med 2012;1(10):725-731.,),结论,:,间充质干细胞能改善肝功能，提高肝衰竭患者的生存率，减低,MELD,评分。,治疗方案,:,脐带来源的,MSC,治疗,3,次，每个月一次，外周静脉，,0.5x10,6,/kg,间充质干细胞治疗肝衰竭的文献分析,3,#,文献,题目,:,Clinical therapeutic effects of human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells transplantation in the treatment of end-stage liver disease,(Transplant Proc 2015;47(2):412-418),结论,:,在,24,周的观察期内，肝功能改善明显，但凝血功能没有改善。,治疗方案,:,脐帯来源的,MSC,，治疗一次，肝动脉介入，,3x10,7,/,每人,MELD Score:from 8.49 to 7.57,但是，本文没有提及肝衰竭患者的生存率！,间充质干细胞治疗肝衰竭的文献分析,文献,MSC,来源,细胞数,治疗次数,输入途径,生存率,MELD,评分,1#,骨髓,-,1,次,肝动脉,介入,50%,没变化,2#,脐带,0.5x10,6,/kg,3,次,外周静脉,70%,下降,3#,脐带,3x10,7,/,每人,1,次,肝动脉,介入,-,没对照组,总结表：,体会,:,疗效与三方面密切相关：,治疗方案，,MSC,的来源，,适应症的选择,注,:,第二个文献所用的,MSC,是我公司提供的干细胞产品。,间充质干细胞治疗肝衰竭的文献分析,2013,年以来的,4,名肝衰竭患者,2013,年以来的,4,名肝衰竭患者,经过,6-8,次的,UC-MSC,治疗，,全部摆脱肝衰竭的病理状态，,凝血功能达不到诊断肝衰竭的标准！,MSC,治疗肝衰竭,1#,2013-12-3,北京,302,医院肝硬化诊疗中心,治疗时间：,2013-8,至,2014-11,。,治疗方案：每个月一次，,每次,6x10,7,脐带,MSC,诊断：乙肝肝硬化（失代偿期）,肝衰竭（慢加急）,肝性脑病,食管胃底静脉曲张破裂大出血,脾切除术后,肝硬化,&,肝衰竭,1#,时间,ALT/AST,（,U/L,）,白蛋白,（,g/L,）,总胆红素,（,umol/L,）,凝血酶原时间（,S,）,凝血酶原活动度,INR,B,超,2013-7-30,6/29,35.6,60.2,26.7,30%,2.52,肝硬化,（肝门静脉主干和左右支内,栓子,形成）,2013-8-11,12/39,36.5,40.7,19.8,47%,1.96,2014-1-12,35/77,43,19.4,15.5,62.7%,1.34,2014-6-17,23/37,32.7,35.2,14.9,78%,1.17,肝硬化,（肝门静脉主干和左右支内,栓子,形成）,2014-9-25,50/80,36.4,39,11.7,82%,1.06,肝脏弥漫性病变，无血栓,2014-11-2,29/46,37.9,26.3,11.5,93%,1.04,肝脏弥漫性病变，无血栓,正常值,0-40/0-50,40-55,3.4-20.5,11-15,80-120%,肝病专业评分,1#,时间,Child-Pugh,MELD,2013-7-30,12,分（,C,级）,20,分,2014-6-17,9,分（,B,级）,11,分,2014-11-2,5,分（,A,级）,4,分,MSC,治疗肝衰竭,2#,诊断：,1,，肝衰竭，慢加急,2,，肝硬化 失代偿期,3,，肝性脑病,4,，肺炎,5,，胆囊结石,MSC,治疗肝衰竭,2#,检查项目,治疗前,2,次治疗后,4,次治疗后,6,次治疗后,谷丙,ALT,1586,61.7,41.3,42.5,谷草,AST,2753,104.2,65.1,66.9,总胆红素,44.4,32.7,14.7,24.1,白蛋白,27.4,36,28.5,31.6,凝血酶原时间,PT,21.1,16.2,16.4,15.9,国际标准化比值,INR,1.86,1.39,1.41,1.36,MSC,治愈,肝硬化的第一例,国内首次从人脐带中分离培养出间充质干细胞！,1,，影像学未发现肝硬化迹象；,2,，,HBV,病毒拷贝数阴性；,3,，,HBsAg,阴性；,4,，从,2009,年开始停止服用抗病毒药物,MSC,正规治疗,2,年（,2007-2009,年）：,而后每年约,1-3,次的频率,2007,年,2,月,1,日,第一次,输入,MSC,脐带,MSC,治疗,肝衰竭,的方案,1,，连续,8,次，每个月,1,次，每次,6,（,2,）袋（,1x10,7,/,袋）；,2,，外周静脉输入；,3,，常规治疗：抗病毒、输白蛋白、保肝利肝、利尿、抗生素（感染）,4,，凝血功能指标,INR2.5,，治疗效果不佳。,5,，肝癌慎用。,肝衰竭：,0.5-1,年,肝硬化：,2-4,年,肝硬化,：治疗方案：接上述肝衰竭的治疗，以后每季度治疗,1,次；,治疗方案：前,2,年，每两个月治疗一次；后,2,年，每个季度治疗,1,次。,为何不主张自体骨髓,MSC,治疗？,衰老的,MSC,细胞质量,分化能力,再生能力,迁移能力,Ann N Y Acad Sci 2006;1067235-242,为何不主张自体骨髓,MSC,治疗？,疾病,自体骨髓,MSC,的功能异常,参考文献,系统性红斑狼疮,生长缓慢，免疫调节能力下降，治疗无效,Lupus 2010;19(7):850-859,类风湿性关节炎,克隆形成能力减低和增殖速度减慢，,增殖能力、迁移能力、免疫抑制能力和表达分泌,VEGF,的量均有所下降,Ann Rheum Dis 2008;67(6):741-749,；,J Immunol Res 2015;2015284215,高剂量化疗,克隆形成能力减低和增殖速度减慢,Ann Hematol 2010;89(7):701-713,免疫,性血小板减少,症,细胞形态改变，胞体扁宽，免疫调节能力下降,Cytotherapy 2009:1-8,再障,免疫调节能力下降,Exp Hematol 2005;33(7):819-827,多发性骨髓瘤,免疫调节能力下降,Leukemia 2007;21(1):158-163,急性髓系白血病,细胞因子分泌量下降（,MCP-1,、,GM-CSF,、,IL-6,）,Blood Cancer J 2015;5e302,更重要的是：自体骨髓,MSC,只够治疗,1,次！,思 考,我们该如何分析“,MSC,治疗无效”的文献报道及临床实际案例？,间充质,干细胞,中国的政策,4#,间充质干细胞,临床试验：,中国食品药品监督管理总局（,C,FDA,）批准,1,，,“骨髓原始间充质干细胞,”,在,2004,年获得,SFDA,批准进入期临床试验，于,2006,年,4,月,21,日获得,SFDA,的期临床试验,批件,。,2,，,“自体骨髓间充质干细胞注射液,”,在,2005,年获得,SFDA,的临床试验,批件,进入期临床试验,。,至今未见有完成,II,期临床试验的结果报道！,3,，,“间充质干细胞心梗注射液,”,在,2006,年获得,SFDA,的临床试验,批件,进入期,临床试验,，在,2013,年,12,月完成,I,期临床试验，,有效性评估达到,60%,以上,。,至今未,见上述有,完成,II,期临床试验的结果报道,！,WHY,？,No,.,1,中国,干细胞政策始于第三类医疗技术,No.2,卫计委和,CDFA,在收紧，科技部在大力开展。,国家十二五规划重点项目，干细胞医疗研究跃居生物医药首位。,“,863,”,、,“,973,”,和国家自然科学基金全部设有干细胞专项科研基金,No.3,2015,年,3,月，卫生部和国家食品药品监督管理局联合组织制定了征求意见稿,干细胞,临床研究,管理办法（试行）,和,干细胞制剂质量控制和临床前研究指导原则（试行）,）来进一步规范干细胞临床试验研究活动。预示,着：,我国,的干细胞产业将步入高速规范发展期,间充质干细胞,干细胞临床研究管理方法,干细胞,临床研究指应用人自体或异体来源的干细胞经,体外操作,后输入（或植入）人体，用于疾病预防或治疗的临床研究。体外操作包括干细胞在体外的分离、纯化、培养、扩增、诱导分化、冻存及复苏等，不包括基因水平的操作。,第二条：,Thanks!,