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2026年细胞学（细胞培养技术）考题及答案

（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______

第I卷（选择题，共40分）
答题要求：每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共8题，每题5分)
w1. 细胞培养时，对培养液的pH值要求较为严格，一般合适的pH范围是（ ）
A. 6.0 - 6.5 B. 6.5 - 7.0 C. 7.2 - 7.4 D. 7.5 - 8.0
w2. 细胞培养过程中，常用的抗生素不包括以下哪种（ ）
A. 青霉素 B. 链霉素 C. 庆大霉素 D. 胰岛素
w3. 用于细胞培养的血清，以下哪种来源质量相对较好（ ）
A. 小牛血清 B. 胎牛血清 C. 马血清 D. 人血清
w4. 细胞培养时，最常用的培养箱是（ ）
A. 普通培养箱 B. 二氧化碳培养箱 C. 厌氧培养箱 D. 光照培养箱
w5. 细胞冻存时，常用的保护剂是（ ）
A. 二甲基亚砜 B. 乙醇 C. 甘油 D. 以上都是
w6. 原代细胞培养时，以下哪种组织来源较容易获取原代细胞（ ）
A. 肝脏 B. 心脏 C. 皮肤 D. 脑组织
w7. 细胞传代培养时，一般当细胞生长至（ ）时进行传代
A. 50%汇合度 B. 70%汇合度 C. 90%汇合度 D. 100%汇合度
w8. 细胞培养过程中，防止微生物污染的关键操作不包括（ ）
A. 无菌操作环境 B. 培养液除菌 C. 定期更换培养箱水盘 D. 频繁开启培养箱门

第II卷（非选择题，共60分）
w9. 简述细胞培养的基本条件（10分）
w10. 请说明细胞冻存与复苏的操作步骤及注意事项（15分）
w11. 材料：在细胞培养实验中，研究人员发现培养的细胞出现生长缓慢、形态异常的情况。经检测，培养液的pH值正常，血清质量也合格，培养箱参数稳定。
问题：请分析可能导致这种现象的原因，并提出相应的解决措施。（15分）
w12. 材料：某实验室计划进行一种新细胞系的培养，该细胞系对营养成分要求特殊。
问题：请设计一个适合该新细胞系培养的培养基配方，并说明各成分的作用。（20分）

答案：
w1. C
w2. D
w3. B
w4. B
w5. A
w6. C
w7. B
w8. D
w9. 细胞培养基本条件：合适的培养液，提供细胞生长所需营养；适宜pH值，一般7.2 - 7.4；合适温度，哺乳动物细胞多为37℃；无菌环境，防止微生物污染；气体环境，如含5%二氧化碳维持pH稳定。
w10. 细胞冻存操作步骤：收集对数生长期细胞，用胰酶消化制成细胞悬液，离心弃上清，加入含保护剂的冻存液重悬细胞，分装至冻存管，按程序降温，放入液氮保存。注意事项：保护剂浓度合适，降温速度要慢。复苏操作步骤：从液氮取出冻存管，迅速放入37℃水浴快速解冻，离心弃上清，加入新鲜培养液重悬接种培养。注意事项：解冻要快，防止细胞内形成冰晶损伤细胞。
w11. 可能原因及解决措施：细胞发生支原体污染，导致生长异常，可使用支原体检测试剂盒检测，确诊后用抗生素处理或重新复苏细胞；细胞老化，可通过传代培养年轻细胞；培养器皿或培养液中存在未知有害物质，更换培养器皿和培养液重新培养观察。
w12. 培养基配方：基础培养基（如DMEM），提供基本营养成分；添加特殊氨基酸，满足该细胞系特殊营养需求；加入适量生长因子，促进细胞生长增殖；添加特殊维生素，维持细胞正常代谢；加入适量血清，提供多种生长因子等。各成分作用：基础培养基提供碳水化合物、氨基酸等基础营养；特殊氨基酸补充细胞特殊需求；生长因子刺激细胞生长；特殊维生素参与细胞代谢调节；血清提供多种未知生长因子等促进细胞生长。