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2025年大学生物学（免疫学实验）试题及答案

（考试时间：90分钟 满分100分）
班级______ 姓名______

第I卷（选择题，共30分）
每题只有一个正确答案，请将正确答案的序号填在括号内。(总共10题，每题3分，每题给出的选项中，只有一项是符合题目要求的)
w1. 以下哪种实验技术常用于检测细胞表面抗原？（ ）
A. 免疫印迹法
B. 免疫荧光法
C. 酶联免疫吸附测定
D. 放射免疫测定
w2. 在免疫沉淀实验中，常用的沉淀剂是（ ）
A. 蛋白酶K
B. 琼脂糖
C. 抗体
D. 硫酸铵
w3. 流式细胞术可用于分析细胞的多种参数，其中不包括（ ）
A. 细胞大小
B. 细胞表面标志物表达
C. 细胞内蛋白质含量
D. 细胞凋亡情况
w4. 制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术是（ ）
A. 细胞融合
B. 细胞核移植
C. 胚胎干细胞培养
D. 细胞克隆
w5. 免疫组化实验中，用于标记抗体的酶通常是（ ）
A. 淀粉酶
B. 碱性磷酸酶
C. 脲酶
D. 脂肪酶
w6. 下列哪种物质可作为免疫佐剂增强免疫反应？（ ）
A. 生理盐水
B. 弗氏完全佐剂
C. 葡萄糖溶液
D. 蒸馏水
w7. 间接免疫荧光法检测抗原时，荧光信号出现在（ ）
A. 一抗上
B. 二抗上
C. 抗原上
D. 底物上
w8. 免疫比浊法常用于检测血清中的（ ）
A. 蛋白质含量
B. 核酸含量
C. 糖类含量
D. 脂类含量
w9. 淋巴细胞分离液的作用是（ ）
A. 分离红细胞
B. 分离白细胞
C. 分离血小板
D. 分离淋巴细胞
w10. 免疫印迹实验中，将蛋白质从凝胶转移到膜上的技术是（ ）
A. 电泳
B. 转印
C. 洗脱
D. 染色

第II卷（非选择题，共70分）
w11. （10分）简述免疫荧光实验的基本原理及操作步骤。
w12. （15分）在酶联免疫吸附测定（ELISA）中，双抗体夹心法检测抗原的原理是什么？请详细说明。
w13. （15分）某实验室欲制备小鼠抗人IgG单克隆抗体，简述其主要实验流程。
w14. （15分）材料：现有一份血清样本，怀疑其中含有某种特定抗原。请设计一个实验方案，利用免疫沉淀技术检测该抗原，并对实验结果进行预期分析。
w15. （15分）材料：研究人员发现一种新的细胞表面分子，推测其可能与免疫反应相关。请设计实验，运用流式细胞术分析该分子在不同免疫细胞亚群中的表达情况，并阐述实验结果的意义。

答案：
w1. B
w2. C
w3. C
w4. A
w5. B
w6. B
w7. B
w8. A
w9. D
w10. B

w11. 免疫荧光实验原理：利用抗原与抗体特异性结合的特性，将荧光素标记在抗体上，当抗体与抗原结合后，通过检测荧光信号来确定抗原的存在及定位。操作步骤：首先固定细胞或组织样本，然后加入一抗孵育，使一抗与抗原特异性结合，接着用缓冲液冲洗去除未结合的一抗，再加入荧光标记的二抗孵育，最后用缓冲液冲洗后通过荧光显微镜观察荧光信号。
w12..双抗体夹心法检测抗原原理：将已知抗体包被在固相载体表面，加入待检样本，使样本中的抗原与固相抗体结合，再加入酶标记的相同抗体，该酶标抗体与已结合在固相上的抗原结合，形成“固相抗体 - 抗原 - 酶标抗体”复合物。加入底物后，酶催化底物显色，通过检测颜色深浅来确定抗原含量。因为使用了两种针对同一抗原不同表位的抗体夹着抗原，所以特异性强。
w13. 主要实验流程：首先用特定抗原免疫小鼠，使小鼠体内的B淋巴细胞产生针对该抗原的抗体。取免疫后的小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，通过筛选培养基筛选出杂交瘤细胞。对杂交瘤细胞进行克隆化培养，筛选出能稳定分泌特异性抗体的细胞株。将筛选出的细胞株进行体内或体外培养，收集培养液获得单克隆抗体。
w14. 实验方案：取适量血清样本，加入特异性抗体，使其与可能存在的抗原结合形成抗原 - 抗体复合物。加入沉淀剂，使复合物沉淀。离心分离沉淀物，弃上清。对沉淀物进行洗涤后，进行SDS - PAGE电泳分析，通过考马斯亮蓝染色观察条带。预期分析：若出现与目标抗原分子量相符的条带，则证明血清中含有该抗原；若未出现相应条带，则说明血清中不存在该抗原。
w15. 实验设计：用荧光标记的针对该新分子的抗体孵育不同免疫细胞亚群。通过流式细胞仪检测各细胞亚群的荧光强度，从而分析该分子的表达情况。意义：若某免疫细胞亚群高表达该分子，可能提示其在免疫反应中起重要作用，如参与抗原识别、信号传导等；低表达或不表达则可能表明其与该分子无关或作用较小，有助于深入了解免疫细胞功能及免疫反应机制。