HIV筛查实验室的质量管理与控制.pptx

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2018/12/6 Thursday,#,1,HIV,筛查实验室的质量管理与控制,2,质量保证,3,一、人员培训,人员要求,3,名以上,技术人员,至少,1,人具有中级职称、,2,年以上血清学检验工作经验,上岗要求,上岗前必须接受技术培训并获得合格证书,每年接受复训一次,培训内容,HIV,检测相关基础知识、检测技术及管理要求、实验操作、质量管理与控制、生物安全。,4,使用新方法前,对人员进行培训,获得资格,开展相应工作,检验人员,检测人,复核人,签发人,不能一人同时承担多个角色！,5,二、环境条件,HIV,筛查实验室,实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（,BSL-2,）要求。,配备开展,HIV,抗体检测所需的设备：,生物安全柜,、酶标仪、洗板机、恒温孵育箱、离心机、加样器、冰箱等。,6,HIV,检测点,须有,HIV,抗体检测区域或专用实验台，能开展简便、快速的检测。,须配备快速试验所必须的物品，包括冰箱、消毒与污染物处理设备、一次性耗材、安全防护用品等。,7,三、样品的采集和保存,尽量避免,溶血,细菌污染,抗凝不完全,假阳性,内源性,HRP,红细胞破裂释放活性物,纤维蛋白原干扰,注：血清置,4,冰箱,5,天内完成检测,8,四、检测方法和试剂选择,试剂,国家食品药品监督管理局注册批准、批检合格、在有效期内，经临床质量评估敏感性和特异性高。,更换试剂批号时应进行,平行实验,。,检测方法,使用可靠的检测方法，常用：,ELISA,和快速检测。,9,五、设备维护与校准,酶标仪,/,洗板机,加样器,温度计,高压锅,国家法定部门定期校准（,每年至少,1,次,）,精密仪器,生产厂家校准（,每年至少,1,次,）,均须做好日常维护及使用记录,蛋白印迹仪,流式细胞仪,病载仪,10,六、文件和文件管理,1.,标准操作程序（,SOP,）,至少建立以下,SOP,样品的接收、登记、处理和保存,检测方法和步骤,试剂使用和保存,仪器的使用、维护和校准,质量控制要求及程序,结果解释与报告,保密程序,实验室数据、相关文件记录与保存,不确定样品追踪和处理,实验室安全防护、清理及消毒,11,SOP,应包括的内容,标题和编号,编写和修订日期,编写和修订人员姓名,方法、目的和应用范围,检测设备,试剂及有效期,安全防护相关步骤,结果的解释和报告,附录,每年修订一次,12,2.,实验原始记录,原始记录表,试剂厂家,测定方法,试剂批号,试剂效期,操作人员姓名,复核人员姓名,检测日期,13,3.,结果报告,试剂盒质控品,外部质控品,满足要求,不满足要求,分析结果,重新检测,复核人签字,签发人签字,14,4.HIV,标本的保存记录,标本保存记录,标本类型,贮存量,贮存温度,贮存起始时间,标本保管人,标本复核人,15,5.,样品登记和保存,收样,建立唯一编码,登记相关信息,保存,姓名、性别、年龄、检测日期,16,6.,文件存档,实验原始记录、打印数据、,WB,试验的反应条带或照片、样品登记表、样品保存记录表等应妥善存档保存,10,年以上,。,17,质量控制,18,一、实验室质量控制的定义,为达到质量要求所采取的作业技术和活动。,定义,19,二、酶免或发光法抗体检测的室内质量控制,1,、室内质量控制的质控品,试剂盒内部对照,判断试验有效性，但,不能作为室内质控品,。,室内质控品,监控检测的重复性。可只设弱阳性质控，以试剂盒临界值的,23,倍,为宜。,20,3,、,室内质控血清的制备,收集阳性血清,（无溶血、黄疸、脂肪）,56,、,30min,灭活,3000r/min,离心,15min,正常人血清或,10%,小牛血清,PBS,溶液稀释,测量值,分装，,-20,冻存,21,4,、,质量控制方法,Levey-Jennings,质控图,使用累积和技术或趋势分析技术的图形提供系统偏移和漂移的状况。,22,质控图参数,在不同的批次检测取得的至少,20,个数据,至少做,5,个批次的检测，每个批次中不少于,4,个质控品检测结果,平均值,标准差,变异系数,控制限,样本量足够,样本量较少,23,质控的规定和使用,目前很多质控规则已被采用，最常用的是,1,2S,和,1,3S,规则。,24,告警（,1,2S,）：当外部对照的,S/CO,值超过,2S,范围时，系统处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要进一步观察。若将,1,2S,做失控标准，有较高的假失控概率，所以一般不采用。,警告,:,1,2S,规则违背,25,失控（,1,3S,）：当外部对照的,S/CO,值超过,3S,范围时，系统处于失控状态，本次结果不能被接受。,失控,:,1,3S,规则违背,26,位移：连续几次（,3-5,次）外部质控都落在均值的一侧。提示试验条件发生了较大改变。,发生位移,27,出现以下情况也应该应该暂停实验，找出原因。,连续两次同一方向超出,2S,28,连续四次同一,方向超出,1S,29,失控原因的处理和分析,处理,出现数据违背控制规则,填写失控报告单,上交实验室主管,是否发出检验报告,决定,30,失控原因的分析,立即重新测定同一质控品,用新的质控品重测失控项目,检查仪器状态,检查试剂,联系仪器厂家,排除人为或偶然误差,排除质控品变质或污染,失控,失控,失控,失控,31,“即刻法”质控,样本量较少，无法绘制“,L-J,”质控图时，前,20,个数据可采用“即刻法”。该方法只需,3,个测定值即可开始进行质控。,32,先将测定值从小到大排列，,X,1,最小，,X,n,最大；,计算,X,和,S,；,计算,SI,上限,值和,SI,下限,值。,SI,上限,=,（,X,最大,-X,）,/S,，,SI,下限,=,（,X-X,最小,）,/S,；,对照,SI,值表，检查是否失控。,33,SI,值表,n,n,3s,n,2s,n,n,3s,n,2s,3,1.16,1.15,12,2.55,2.29,4,1.49,1.46,13,2.61,2.33,5,1.75,1.67,14,2.66,2.37,6,1.94,1.82,15,2.71,2.41,7,2.10,1.94,16,2.75,2.44,8,2.22,2.03,17,2.79,2.47,9,2.32,2.11,18,2.82,2.50,10,2.41,2.18,19,2.85,2.53,11,2.48,2.23,20,2.88,2.56,34,当,SI,上限,和,SI,下限,n3s,时说明该值已在,3s,范围之外，属“失控”。,注：“即刻法”只能在前,20,次内使用，超出即可采用,L-J,质控图法。,35,三、快速法抗体检测质控,1,、试剂内对照,在质控窗口内出现质控带，该质控带是试剂自带的内部过程质控，说明实验室操作全部完成并且实验所用材料处于工作状态。清洁的检测区背景是内部阴性过程质控。如实验完成后未出现红色质控带，说明试剂盒内质控无效，该试验结果无效，样品须重检。,36,2,、室内质控品对照,外部质控品可采用商用质控品或自制质控品。质控品应包含抗体阳性样品和阴性样品。自制质控品可使用本室保留的阳性样品。下列情况需做质量控制：,更换试剂批号,更换检测人员,更换包装,更换试剂厂家,建议：每个检测日检测一次阳性和阴性质控品；如果日检测量大于,50,份样品，至少应作,2,次质控,。,