第七章--芳香胺类药物的分析.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,芳香胺类药物的分析,*,基本要求,一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。,二、熟悉芳氧丙醇胺类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。,三、了解氨基醚衍生物类药物鉴别和含量测定的基本原理与方法。,2025/10/23 周四,1,芳香胺类药物的分析,第一节,芳 胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,2025/10/23 周四,2,芳香胺类药物的分析,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,2025/10/23 周四,3,芳香胺类药物的分析,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质,（,一）基本结构与典型药物,2025/10/23 周四,6,芳香胺类药物的分析,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,醋氨苯砜,2025/10/23 周四,7,芳香胺类药物的分析,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,2025/10/23 周四,8,芳香胺类药物的分析,1.水解后显芳伯氨基特性：,分子结构中含有芳酰氨基，酸,水解后显芳伯氨基的特性反应。,注意空间位阻的影响。,2.,水解产物易酯化：,对乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成,醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋,酸乙酯香味。,（二）主要化学性质,2025/10/23 周四,9,芳香胺类药物的分析,3.酚羟基特性：,对乙酰基酚有游离酚羟基，可与,FeCl,3,发生,显色反应，可相互区别。,4.弱碱性：,利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显,碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可,相互区别。,5.与金属离子发生沉淀反应：,利多卡因和布比卡因酰氨,基上氮可与,Cu,2+,Co,2+,生成,有色配位化合物沉淀。,2025/10/23 周四,10,芳香胺类药物的分析,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应,分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯,氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH,2,HCl,NaNO,2,重氮盐,OH,-,-萘酚,橙黄,猩红色,2025/10/23 周四,11,芳香胺类药物的分析,直接反应：,苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普,鲁卡因胺,间接反应：,对乙酰氨基酚、醋氨苯砜,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。,2025/10/23 周四,12,芳香胺类药物的分析,丁卡因虽无芳伯氨基，但可与,NaNO,2,反应生成,N,亚硝基化合物的乳白色沉淀。,2025/10/23 周四,13,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,14,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,15,芳香胺类药物的分析,（二）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚+,FeCl,3,蓝紫色化合物,2025/10/23 周四,16,芳香胺类药物的分析,2.羟肟酸铁盐反应,基于普鲁卡因胺分子中的,芳酰胺结构。,P,117,，,布洛芬与铁盐的反应,2025/10/23 周四,17,芳香胺类药物的分析,与铜和钴离子反应：,利多卡因与硫酸铜生成,蓝紫色,配位化合物；,与氯化钴生成,亮绿色,沉淀。,（,三）与金属离子反应,2025/10/23 周四,18,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,19,芳香胺类药物的分析,盐酸普鲁卡因的鉴别,(四)水解产物反应,盐酸普鲁卡因+,NaOH,普鲁卡因,油状物,对氨基苯甲酸钠+二乙氨基乙醇,（使湿润的红色石蕊试纸变兰色）,对氨基苯甲酸钠+,HCl,对氨基苯甲酸（白色）,2025/10/23 周四,20,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,21,芳香胺类药物的分析,(五)制备衍生物测熔点,三硝基苯酚衍生物的制备：,利多卡因和布比卡因,2025/10/23 周四,22,芳香胺类药物的分析,(六)紫外特征吸收光谱法,1.,在,max,处测定供试液的百分吸收系数。,例如：对乙酰基酚在0.4%,NaOH,中于,max,=240nm;E,1%,1cm,=715,在,HCl(0.1nol/L)-,甲醇（,1,：,99,）于,max,=249nm;E,1%,1cm,=880,2,.,在规定的浓度测定,max,例如：醋氨苯砜5,g/ml;,max,=256nm;284nm,再例如：盐酸普鲁卡因胺5,g/ml;,水，,max,=280nm,(七)红外吸收光谱法,2025/10/23 周四,23,芳香胺类药物的分析,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查,1.乙醇溶液的澄清度与颜色：,因其生产工艺用铁粉作还原剂，可,能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生,有色化物，在乙醇溶液中显橙红色或棕色。,四、特殊杂质检查,检查方法：,配制0.1,g/ml,本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色；,如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓；,如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标准液比较，,不得更深。,2025/10/23 周四,24,芳香胺类药物的分析,2.有关物质检查：,Ch.P,是以对氯苯乙酰胺为对照品，,采用,TLC,法 中的杂质对照品法。,3.对氨基酚检查：,利用对氨基酚在碱性条件下可与,亚硝基铁氰化钠生成,蓝色,配位化,合物，采用比色法。,2025/10/23 周四,25,芳香胺类药物的分析,(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,采用,TLC,法中的,杂质对照品法进行检查。,2025/10/23 周四,26,芳香胺类药物的分析,（一）亚硝酸钠滴定法,Ar-NH,2,;Ar-NHCOR;Ar-NO,2,均可采用此法,Ch.P,中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡,因胺及其制剂可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水,解后用本法。,五、含量测定,2025/10/23 周四,27,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,28,芳香胺类药物的分析,1.原理,：,Ar-NHCOR +H,2,O,Ar-NH,2,+RCOOH,H,+,Ar-NH,2,+NaNO,2,+2HCl,Ar-N,2,+,Cl,-,+NaCl +2H,2,O,2025/10/23 周四,29,芳香胺类药物的分析,测定主要条件：,(1),加,KBr,（,2g,）增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO,2,+HCl,HNO,2,+NaCl,HNO,2,+HCl,NOCl +H,2,O,K,HCl,2025/10/23 周四,30,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,31,芳香胺类药物的分析,KBr +HCl,HBr +KCl,HNO,2,+,HBr,NOBr +H,2,O,K,KBr,K,HBr,比,K,HCl,大300倍,生成,NOBr,量大得多,加快反应速度,2025/10/23 周四,32,芳香胺类药物的分析,(2),加过量,HCl,加速反应：,重氮化速度加快；,重氮盐在酸性介质中稳定；,防止生成氨基偶氮化合物。,Ar-N,2,+,Cl,-,+H,2,N-Ar,Ar-N=N-NH-Ar +HCl,一般摩尔比为,Ar-NH,2,:HCl=1:,2.56,。,2025/10/23 周四,33,芳香胺类药物的分析,(3),室温条件下滴定:,温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使,Ar-N,2,+,Cl,-,+H,2,O,Ar-OH+N,2,+HCl,(4)滴定管尖端插入液面下滴定,2025/10/23 周四,34,芳香胺类药物的分析,3.指示终点的方法,(1)永停滴定法,溶液 检流计,终点前：,无过量 无电流,HNO,2,终点时：,有过量 有电流（使指针偏离零,HNO,2,永停在某一位置）,(2),外指示剂法,用,KI-,淀粉指示剂,指示终点的原理：,2,NaO,2,+2KI +4HCl,2NO +I,2,+2KCl +2NaCl+2H,2,O,G,VV,R,1,R,2,+,V,2025/10/23 周四,35,芳香胺类药物的分析,(二）非水溶液滴定法,基于盐酸丁卡因、盐酸利多卡因和盐酸布比卡因,侧链叔胺氮在滴定盐酸丁卡因时，因其在冰醋酸中碱,性弱，加醋酐可增加其碱性。,2(,CH,3,CO),2,O,(CH,3,CO),3,O,+,+CH,3,COO,-,相当于,BHCl +Hg(Ac),2,BHAc +HgCl,2,BHAc +HClO,4,BHClO,4,+HAc,2025/10/23 周四,36,芳香胺类药物的分析,1.对乙酰基酚原料的含量测定,在0.4%,NaOH,介质中；257,nm,D%E,1%,1cm,样,E,1%,1cm,标,100；,E,1%,1cm,715,2.对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上）,1片稀,HCl 24ml+H,2,O,至,1000ml,，,30min,后，精密量,取5,ml,，,+,0.4%,NaOH10ml+H,2,O,至,50ml,，,257,nm,测定,A。,W110005100100C（g/100ml),W(g)=200 C;C=A/715,溶出度,W,标示量,10080,为合格,（三）分光光度法,2025/10/23 周四,37,芳香胺类药物的分析,（四）比色法,盐酸普鲁卡因+1,2-萘醌-4-磺酸钠,pH4-9,棕红色化合物，,max,482nm,处测定,A,2025/10/23 周四,38,芳香胺类药物的分析,（五）盐酸普鲁卡因胺的快速荧光测定,ex400nm（,激发波长）、,em485nm（,发射波长）处测定荧光强度，标准曲线法定量。,盐酸普鲁卡因胺+荧胺,pH7.5,荧光物,2025/10/23 周四,39,芳香胺类药物的分析,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中,常含有降解产物对氨基苯甲酸；以,苯甲酸,为内标同时测定两,者的含量，该法简单准确。,色谱条件：,色谱柱为,BondapakC,18,300mm4mm,流动相为甲醇1,HAc(40:60);UV,检测器250,nm.,（六）,HPLC,法,2025/10/23 周四,40,芳香胺类药物的分析,第二节,苯乙胺类药物的分析,一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,*,2025/10/23 周四,41,芳香胺类药物的分析,常见的苯乙胺类药物,2025/10/23 周四,42,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,43,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,44,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,45,芳香胺类药物的分析,（二）,主要化学性质,1.弱碱性,本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮,显弱碱性。,2.酚羟基特性,本类药物结构中有酚羟基，可与,FeCl,3,络合显色,;,加碱碱化则发生氧化。,3.光学活性,多数药物结构中有手性碳原子，具有旋,光性。,2025/10/23 周四,46,芳香胺类药物的分析,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl,3,络合显色 碱液,紫红色,2025/10/23 周四,47,芳香胺类药物的分析,。,(二）甲醛硫酸反应,在此试剂中形成醌式结构而显色。,药 物,三氯化铁,甲醛硫酸,肾上腺素 0.1,mol/LHCl,显绿色,甲氨试液显红紫红 红色,重酒石酸去甲肾上腺素 绿色,加,NaCO,3,试液显紫色红色 淡红色,盐酸去氧肾上腺素 紫色 玫瑰红橙红棕红,盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5,NaCO,3,试液显蓝紫色红色 棕色暗紫色,2025/10/23 周四,48,芳香胺类药物的分析,(三）氧化反应,本类药物具有,Ar-OH，,易被氧化剂,I,2,H,2,O,2,K,3,Fe(CN),6,氧化而显色，,例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被,I,2,H,2,O,2,氧化后，生成肾上腺素红；,盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被,I,2,氧化，,生成异丙肾上腺素红。,2025/10/23 周四,49,芳香胺类药物的分析,(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱,例如：,盐酸异丙肾上腺素 0.05,mg/ml ,max,=280nm A=0.50,这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别,2025/10/23 周四,50,芳香胺类药物的分析,(五）与亚硝基铁氰化钠(,Rimini,试验）,是鉴别脂肪伯氨基的特殊反应；可用于重酒石酸间羟胺鉴别。,D,亚硝基铁氰化钠 丙酮,Na,2,CO,3,红紫色,P,147,，对乙酰氨基酚中特殊杂质对氨基酚的检查,2025/10/23 周四,51,芳香胺类药物的分析,(六)双缩脲反应,是鉴别芳环氨基醇的特殊反应；可用于盐酸麻黄,碱，盐酸伪麻黄碱鉴别：,D CuSO,4,+NaOH,显,蓝紫色,乙醚，醚层(,紫红色,)水层(,蓝色,),2025/10/23 周四,52,芳香胺类药物的分析,酮体检查,本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢,化不完全，易引入酮体杂质。,采用,UV,法检查：,利用酮体在310,nm,有吸收，本类药物无吸收。,例如：肾上腺素本项检查 配2.0,mg/ml =310nm A0.05,盐酸去氧肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.02,盐酸异丙肾上腺素 配2.0,mg/ml =310nm A0.15,三、特殊杂质检查,2025/10/23 周四,53,芳香胺类药物的分析,(一)非水溶液滴定法,本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。,1.重酒石酸去甲肾上腺素的测定,相当于,B,的有机酸盐可直接滴定。,2.盐酸克仑特罗的测定,相当于,B,的,HX,酸盐不能直接滴定，需加,Hg(Ac),2,处理后滴定,。,3.硫酸沙丁胺醇的测定,相当于,B,的,H,2,SO,4,盐可直接滴定,也可处理后滴定。,四、含量测定,2025/10/23 周四,54,芳香胺类药物的分析,(二)溴量法,本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及,其注射液用此法。,基本原理：,2025/10/23 周四,55,芳香胺类药物的分析,(三)比色法,利用药物分子结构中的,Ar-OH,与,Fe,3,络合显色，进行比色,测定；,也可利用药物分子结构中的,Ar-NH,2,重氮化偶合显色，进行,比色。,2025/10/23 周四,56,芳香胺类药物的分析,例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定,上述偶合剂可与,HNO,2,显色，干扰比色测定，可先加氨基,磺酸铵分解过量的,HNO,2。,HNO,2,2H,2,NSO,3,NH,4,2N,2,+(NH,4,),2,SO,4,+H,2,SO,4,+H,2,O,2025/10/23 周四,57,芳香胺类药物的分析,(四)提取酸碱滴定法,硫酸苯丙胺的含量测定：,BH,2,SO,4,+NaOH+NaCl,乙醚,提取,B,+H,2,SO,4,蒸去乙醚,NaOH,标准液滴定,终点,2025/10/23 周四,58,芳香胺类药物的分析,(五)荧光分光光度法,肾上腺素测定,：,ex,410nm、,em,520nm,处测定荧光强度，对照法定量。,肾上腺素+,I,2,肾上腺红,一定条件下,N-,甲基-3,5,6-三羟基吲哚,2025/10/23 周四,59,芳香胺类药物的分析,(六),HPLC,法,例一、,重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定,采用,HPLC-UV,法；用外标一点法进行定量测,定。,例二、,血浆中儿茶酚胺类（肾上腺素类）药物的测定,采用,HPLC-EChD,法；用标准曲线法进行定量,测定。,2025/10/23 周四,60,芳香胺类药物的分析,第三节,芳氧丙醇类药物的分析,一、药物结构与主要理化学性质,2025/10/23 周四,61,芳香胺类药物的分析,2025/10/23 周四,62,芳香胺类药物的分析,氧烯洛尔,化学名为,1-邻烯丙氧基苯氧基-3-异丙氨基-2-丙醇.本,品为白色结晶粉末,乙醇、丙酮中易溶；异密、氯仿中略溶；,水中微溶。,盐酸卡替洛尔,化学名为5-3-1,1-二甲基乙基)氨基-2-羟丙氧基,-3,4-二氢-2(1,H)-,喹诺酮盐酸盐。本 品为白色结晶粉末,水中溶,解，甲醇中略溶，乙醇中极微溶解，乙醚中几乎不溶；在冰醋,酸中极微极微溶解,2025/10/23 周四,63,芳香胺类药物的分析,(一)化学鉴别反应,1.沉淀反应 利用,其碱性与生物碱沉淀剂生成沉淀,盐酸卡替洛尔硫氰酸铬铵试液 淡红色,2.,氧化反应,利用侧链的不饱和双键可被高锰酸钾氧化,氧烯洛尔,KMnO,4,MnO,2,(,棕色沉淀),(二)紫外分光谱鉴别法,盐酸卡替洛尔：8,g/ml,max=215nm;252nm,氧烯洛尔：40,g/ml,max=275nm,二、鉴别试验,2025/10/23 周四,64,芳香胺类药物的分析,三、盐酸卡替洛尔中有关物质检查,本品采用,TLC,法中的,高低浓度对照法,2025/10/23 周四,65,芳香胺类药物的分析,四、含量测定,（一）非水溶液定法,盐酸卡替洛尔，氧烯洛尔原料可采用此法,盐酸卡替洛尔,BHCl+HClO,4,BHClO,4,+HCl,用电位法指示终点,HCl,不干扰，无需加醋酸汞处理。,2025/10/23 周四,66,芳香胺类药物的分析,（二）紫外分光光度法,本法主要用于制剂分析。例如盐酸卡替洛尔注射液采用本法。,采用对照品比较法：,C,X,=A,X,/A,R,C,R,标示量,C,X,D/V,取,ml,规格,ml/,标示量,100,2025/10/23 周四,67,芳香胺类药物的分析,（三,）HPLC,法,应用示例：,人血浆中样烯络尔及其异构体的测定,色谱条件：,预柱为十八烷基硅胶柱；,分析柱为手性,ODR,柱(,C,18,固定相上涂渍3,5-二,甲本氨基甲酸酯纤维素，作为手性剂);,流动相为,NaClO4(0.4mol/L)-,乙腈(70:30)的磷酸,缓冲液；检测器：237,nm,样品预处理：,血浆样品用醋酸纤维素膜透析，预柱纯化和富,集，然后通过,RP,手性,HPLC,法分析。,回收率：,可达80以上；线性范围：0.05,g/ml2.50g/ml,日内和日间精密度的,RSD14%.,2025/10/23 周四,68,芳香胺类药物的分析,练习与思考,A,型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,水杨酸,D.,对氨基苯甲酸,E.,氨基酚,2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,苯甲酸,E.,苯酚,3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是,A.,水杨醛,B.,间氨基酚,C.,对氨基酚,D.,酮体,E.,苯甲酸,2025/10/23 周四,69,芳香胺类药物的分析,B,型题,A。,硫酸铜反应,B.,氧化反应,C.,还原反应,D.,水解后重氮化-偶合反应,E.,重氮化-偶合反应,1.盐酸利多卡因,2.肾上腺素,3.盐酸普鲁卡因,4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,2025/10/23 周四,70,芳香胺类药物的分析,A。,溴量法,B.,紫外分光光度法,C.,亚硝酸钠滴定法,D.RP-HPLC,法,E.,非水滴定法 5.盐酸去氧肾上腺素 6.肾上腺素注射液 7.盐酸普鲁卡因 8对乙酰氨基酚,A,D,C,B,2025/10/23 周四,71,芳香胺类药物的分析,X,型题,1.直接能与,FeCl,3,产生颜色反应的药物有,A。,盐酸普鲁卡因,B.,盐酸去氧肾上腺素,C.,对乙酰氨基酚,D.,盐酸利多卡因,E.,盐酸丁卡因,2.直接和水解后能发生重氮化-偶合反应的药物有,A。,盐酸丁卡因,B.,盐酸普鲁卡因,C.,对乙酰氨基酚,D.,对氨基酚,E.,盐酸肾上腺素,2025/10/23 周四,72,芳香胺类药物的分析,