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第一章--动物组织学与胚胎学绪论.ppt

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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,动物组织学与胚胎学,河南农业大学牧医工程学院,动物基础科学系,闫峰宾(,13939012416,)畜牧楼,414,课程教学现状:,组织结构大多肉眼看不见摸不着,学习起来很抽象,内容微细零散,难以记忆理解,比较枯燥乏味,课时压缩,知识的掌握上难度加大,注意事项:,反复讲解强调的内容为难点、重点、考点,“,启发式,”,和,“,问题式,”,教学,不能死记硬背,内容要融会贯通,形态结构联系机能,记好笔记,随机点名,与平时成绩挂钩,理论教材,:,1.,动物组织学与胚胎学 杨倩等主编,中国农业大学出版社,,2008,年,第一版,2.,动物解剖学与组织胚胎学 肖传斌等主编,郑州大学出版社,,2009,年,第一版,3.,家畜组织学与胚胎学 沈霞芬等主编,中国农业出版社,,2010,年,第四版,实验教材,:,家畜组织学与胚胎学实验指导,主要参考材料:,(1),马仲华主编,,家畜解剖学及组织胚胎学,第三版,中国农业出版社出版,,2002,;,(2),董常生主编,.,家畜解剖学,第三版,(,兽医专业用,),,中国农业出版社出版,,2001,;,(3),成令忠主编,.,组织学与胚胎学,.,第四版,北京:人民卫生出版社,,2000,(4),秦鹏春等著,.,哺乳动物胚胎学,.,北京:科学出版社,,2001,(5),沈霞芬主编,.,家畜组织学与胚胎学,.,第三版,北京:中国农业出版社,,2001,(6),王树迎 王政富主编,.,动物组织学与胚胎学,.,北京:中国农业科技出版社,,2000,(7),李德雪 尹昕主编,.,动物组织学彩色图谱,.,长春:吉林科技出版社,,1995,(8),张端莲主编,.,组织学彩色图谱,.,科学技术文献出版社,,2000,(9)Laboratory,manual,anatomy,Physiology,fifth,edition,(,10,),李霞主编,.,水产动物组织胚胎学,.,中国农业出版社,,2006,第一章,绪论,教学目的:,1,掌握,动物组织学与胚胎学的概念、研究内容。,2,了解动物组织学与胚胎学的研究方法。,3,掌握,动物组织学常用术语及计量单位。,重点和难点:,1,动物组织学与胚胎学的概念、研究内容。,2,动物组织学与胚胎学的研究方法。,3,动物组织学常用术语及计量单位。,3,研究方法,(,1,),微观结构,A,光学显微镜及其研究技术(,显微结构,),B,电子显微镜及其研究技术(,超微结构,),(,2,),特殊染色方法,A,组织化学技术,B,免疫组织化学技术,C,同位素示踪技术,3,研究方法:,(,1,),微观结构,:,A.,光学显微镜,(Light microscope,,,LM),光学显微镜基本结构,:,1.,照明灯,(Lamp),2.,聚光器,(Condenser),3.,载物台和切片夹,(Mechanical,stage and specimen retainer),4.,推进器,(Mechanical stage,adjustment knob),5.,物镜,(Objectives),6.,粗细螺旋,(Course and fine,focus knob),7.,目镜,(Oculars),8.,照相机等接口,(Connection to camera,etc.),光镜技术,分辨率,(Resolution),也叫分辨力,是指能够分辨开的两物点之间的,最小距离,。,LM,的分辨率约为,0.2,m,。,例:在明视距离(,25cm,)之处,正常人眼所能看清相距,0.073mm,的两个物点,这个,0.073mm,的数值,即为正常人眼的分辨距离。,微细结构的大小及长度 光镜以微米(,m,)作单位,电镜以纳米(,nm,)作单位。,1m=10,1,dm=10,2,cm=10,3,mm=10,6,um=10,9,nm=10,10,=10,12,pm,切片,(Section),:,将组织切薄使光线可以透过。有石蜡切片、冰冻切片、火棉胶切片。石蜡切片的制作过程:取材,固定,水洗,脱水,透明,浸蜡,包埋,切片,铺片,脱蜡,复水,染色,水洗,脱水,透明,封存,固定,(Fixation):,为,保存,新鲜组织的微观结构,尽快将组织浸入到酒精,甲醛,苦味酸,,Bouins,液或,Zenkers,液等固定剂中。,石蜡包埋,(Paraffin embedding):,*,脱水,(Dehydration):,用浓度逐渐升高的,酒精,(70100%),将组织中的水完全置换出来。,*透明,(Clearing):,用,二甲苯,完全置换出酒精。,浸蜡,(Infiltration):,在,6062,C,时,用,液态石蜡,完全置换出二甲苯。室温时,石蜡凝固,成固态,内含待切组织。,切片,:,用切片机将组织切成,m,厚,的蜡片,然后将其,放到温水上,待其完全展开后,,裱到,有粘附剂的载玻片上。,除切片外,还有其他处理组织的方法:,*铺片,(Whole mount):,用于很薄的组织,如肠系膜。,*磨片,(Ground section):,用于很坚硬的组织,如骨和牙。,*涂片,(Smear):,用于液态组织,如血液,精液和唾液。,哈弗斯管 (中央管),骨细胞胞体,骨细胞突起,哈弗斯系统,/,骨单位(银染),哈弗斯骨板,染色,(Staining):,染料可以将微观结构显示不同的颜色以,便观察鉴别。在染色前,需要,脱蜡入水,,因为染料是水溶性的。,最常用的染料是,苏木素,(Hematoxylin,H),和,伊红,(Eosin,E),。,*,苏木素是,碱性,染料,,蓝紫色,,可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为,酸性,,具有,嗜碱性,(Basophilic),。,*,伊红是,酸性染料,,,粉红色,。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。,被伊红着色的结构本身为,碱性,,具有,嗜酸性,(Acidophilic),。,*,不易被苏木素和伊红着色的结构具有,嗜中性,(Neutrophilic),。,肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝,(,一种蓝色染料,),染成紫红色,b.,如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同,该结构具有,异染性,(Metachromasia),。,c.,如果某结构能将银离子还原成银原子,并吸附银原子而使自身显示棕黑色,该结构具有,嗜银性,(Argyrophilic),。,网状纤维具有嗜银性,因此可以用银盐染色来显示。,H&E,染色的中等动静脉,不同的染色方法,其结果不同。,醛复红染色的中等动静脉(弹性纤维),B.,EM,技术,:,.,EM,可分为,透射电镜,(TEM),和,扫描电镜,(SEM)2,类。,.,EM,的原理和,LM,相似,但用,电子束,代替光线,,磁场,代替玻璃透镜。分辨率约为,0.2 nm,,放大几万,几十万,甚至上百万倍。,.,EM,的组织的制备与,LM,的相似,但有以下不同,:,a.,通常使用戊二醛和四氧化锇作,双重固定,。,b.,切片,超薄,(,厚度小于,90nm),,,塑胶,包埋。,c.,用,重金属盐,如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此,所有,原始的电镜图片都是黑白的。,电子密度高(深)、电子密度低(浅)、正染色、负染色,TEM,显示胰腺腺泡细胞内部结构。,SEM,显示巨噬细胞表面,(,2,),.,特殊的染色方法,:,A.,组织化学,(Histochemistry,细胞化学,),法,:,通过生物化学的,方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物,来显示,微细结构的位置,然后用显微镜观察。,PAS,反应,:,用来显示,多糖,的分布。先用过碘酸,(Periodic acid),将多糖氧化,在多糖表面形成戊二醛结构,然后用无色亚硫酸品红,(Schiff,试剂,),还原戊二醛形成,紫红色沉淀,。,肝脏的,PAS,染色,B,免疫细胞化学,(Immunocytochemistry),染色法,:,a.,待测结构或化学物质被看作抗原,(Antigen),,通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体,(Antibody),结合,然后显示标记物,在原位产生不溶有色的反应产物,最后用显微镜观察。,b 2,种基本染色法,:,*,直接法,:,第一抗体被标记。,*,间接法,:,第一抗体也被看作抗原,而第二抗体被标记。因为信号被放大,因此更加敏感。,C.,放射自显影,(Autoradiography):,给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如,I,125,等,间隔照相,从而追踪该物质代谢途径。,二,动物胚胎学定义及其研究内容,1,定义,:研究动物个体发生和发育的过程及其变化规律的科学。,胚前发育,广义动物胚胎学(发育生物学),胚胎发育,2.,研究内容,胚后发育,狭义动物胚胎学(胚胎发育),1.,组织学又叫,微观解剖学,(Microanatomy),,是,解剖学,知识的进一步完善。,2.,结构是功能的基础,学好组织学是学好,生理学,(Physiology),的基础。,3.,只有了解正常结构,才能学习其异常变化。因此组织学是,病理学,(Pathology),的基础。,第二节 动物组胚学在畜牧兽医教育中的地位,附 实验课 应注意的问题,:,1.,体内结构为立体的,三维的,而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的,二维的。,2.,学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合。,
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