干细胞和组织工程成像技术.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,生物成像技术,可见光及荧光成像,生物发光（,bioluminescence,）与荧光（,fluorescence,）,正电子衍射成像（,Positron Emission tomography,，,PRT,）,放射性标记葡萄糖导入体内，被分裂旺盛组织吸收，常用于检测肿瘤的良恶性,单光子衍射（,Single photon diffraction,）,超声,物理学方法,核磁共振（,nuclear magnetic resonance,）,生物发光成像技术,bioluminescence imaging(BLI),1.,成像的原理和基本内容,2.,实验操作的过程,3.,应用领域和实例,5.,评价及展望,成像的原理和基本内容,荧光酶,酶在,ATP,及氧气的存在条件下，催化,荧光素,的氧化反应才可以发光，因此只有在活细胞内才会产生发光现象，并且光的强度与标记细胞的数目线性相关。,怎么能让没有荧光酶基因和荧光素的细胞发光？,成像的原理和基本内容,实验仪器观察,每次荧光素酶催化反应只产生一个光子，这是肉眼无法观察到的，精诺真公司,(Xenogen Corp.),生产的,IVIS,成像系统，应用一个高度灵敏的制冷,CCD,相机及特别设计的成像暗箱和成像软件，可观测并记录到这些光子。,实验操作总的流程,得到含有荧光酶基因的 细胞株,注入荧光物质，培养,观察监测,癌症与抗癌药物研究,免疫学与干细胞研究,评估组织工程的是否成功,肿瘤细胞株、荧光素酶标记的造血干细胞、荧光素酶基因标记的,HSV-1,病毒,应用领域及实例,1,.,生物发光检测体内药物治疗的复发作用,应用领域及实例,2.,构造肺癌模型,应用领域及实例,3.,评价组织工程成败与否,通过,EGFP,标记的组织工程细胞移植到小鼠体内特制的支架上，,观察该细胞的生长和变化,，从而判断组织工程的成败与否。,评价及展望,优点,缺点,特异性强,，无自发荧光,信号较弱,灵敏度高,，在体内可检测到几百个细胞,检测时间较长,，需要灵敏的镜头，仪器精密度要求高,检测深度在,3-4,个厘米,需要注入荧光素，实验,成本高,精确定量,有些物质不能用生物发光标记，如抗体、多肽等,可做到连续监测,很难用于人体,生物发光成像技术的优缺点,谢谢,第二小组,