临床实用病理学技术培训课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,临床实用病理学技术,*,第一讲 组织切片制作技术常规,（H-E染色法),一、病理标本的接收,二、组织固定,三、取材,四、组织脱水,五、包埋,六、组织石蜡切片,七、常规染色,八、封片,2,临床实用病理学技术,一、病理标本的接收,是临床与病理科交接的首要环节，程序如下：,1、核对病理申请单是否与标本匹配,名称、数目、大小、部位、组织来源、临床诊断等,2、检查标本大小与固定液比例是否合适,4%的中性甲醛或10%的中性福尔马林,小标本：6-10倍量,大标本：切开固定,3、编上病理号，录入电脑存档,3,临床实用病理学技术,二、组织的固定,1、固定的目的和意义,目的：,保持原有的形态和结构（生理、病理、免疫）,意义：,是制作优秀切片的前提和基础,2、注意事项：,1）及时取材 切开固定,2）及时固定,4,临床实用病理学技术,3）液量充分 6-10倍,4）适度固定 24小时内,5）适宜温度 36-38度,6）适当搅拌,5,临床实用病理学技术,3、固定液的选择,1）单纯固定液：,10%中性福尔马林，最常用,乙醇固定液：8095%，少用，主要用于核酸操作的固定,4%的多聚甲醛 用于细胞培养,6,临床实用病理学技术,2）混合固定液：AF;Bouin;Carnoy;Zenker.,4、操作方法：,小标本：610倍液体量,4,小时,大标本：切开固定,18,小时,7,临床实用病理学技术,三、取 材,1、概念：,对标本客观描述+切成小片装入小盒,2、取材环境：略,3、操作过程：,核对、观察与描述（2.0 x1.5x0.3cm)、记录、存档或照相,4、注意事项：略,8,临床实用病理学技术,四、组织脱水,利于透明剂和石蜡的渗入,1、手工脱水,1）器械：,大标本缸；浸蜡缸；脱水篮；恒温烤箱,2）流程：,4%中性甲醛3 h,80%酒精1 h,90%1 h 95%过夜 无水酒精a2 h 无水,9,临床实用病理学技术,酒精b2 h 二甲苯-无水酒精30分钟 二甲苯a30 二甲苯b1 h 石蜡a、b、c(60度）各1 h。,2、半自动/全自,动脱水机,10,临床实用病理学技术,五、包 埋,1、意义,可以达到一定的硬度和韧度，有利于切片,2、步骤,熔化石蜡 注入模具 放入组织块 冷冻 待切蜡块,3、注意事项,1）镊子要加热,2）包埋盒内无水及其他异物,3）蜡温度58-60度,4）注意包埋面及边缘,11,临床实用病理学技术,六、石蜡切片,1、切片方法：,1）,平推式石蜡切片；,2）,旋转式石蜡切片,2、操作步骤 （略）,3、注意事项 （略）,12,临床实用病理学技术,七、常规染色（HE）,苏木精（hematoxylin)和伊红（eosin)染色方法，简称HE染色法。,1、人工染色法：古老而实用，步骤30步（略）,注意事项：,1）烤片温度：恒温箱 75c,2）脱蜡要彻底：3次二甲苯,3）苏木精、伊红染液配制准确，要经常过滤,4）HCL/氨水要经常更换,13,临床实用病理学技术,5）脱水要充分,6）用中性树胶封片,7）在通风良好的环境中操作,8）所有步骤严格按照标准进行,2、自动染色机染色（略）,14,临床实用病理学技术,八、封 片,1、手工封片,注意事项（略）,2、机器封片,1）机器胶带封片机,2）机器盖玻片封片机,15,临床实用病理学技术,谢谢大家,16,临床实用病理学技术,