液态活检与你同行课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,液态活检与你同行,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,液态活检与你同行,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,液态活检与你同行,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,液态活检与你同行,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,液态活检与你同行,*,液态活检与你同行,MIT Technology Review,杂志发布了,2015,年度十大突破技术,(10 Breakthrough Technologies 2015),的榜单。液态活检技术光荣上榜。,2,液态活检与你同行,3,“,液态活检”,Christian Rolfo,Biochimica et Biophysica Acta,2013,.,Lowes L E,et al.J.International journal of molecular sciences,2016,17(9):1505.,A liquid biopsy is a liquid biomarker that can be easily isolated from many body fluids blood,saliva,urine,ascites,pleural effusion,etc.)and,as well as a tissue biopsy,a representative of the tissue from which it is spread.,包括：,循环肿瘤细胞（,CTC,）,;,循环肿瘤,DNA,（,ctDNA,）,;,肿瘤外泌体（,exosome,）,3,液态活检与你同行,液体活检发展历程,01,液体活检临床应用,02,液体活检,VS,组织检测,03,CONTENT,4,液态活检与你同行,Part 1,液体活检发展历程,5,液态活检与你同行,6,癌症患者的,ctDNA,、,cfDNA,及其发现,cfDNA,即,循环游离,DNA,，机体细胞释放入外周血液循环后发生部分降解的内源性,DNA,。,ctDNA,即循环肿瘤,DNA,，是指肿瘤细胞,DNA,经脱落或细胞凋亡后释放进入循环系统。可来自原发肿瘤或转移形成的新肿瘤。,（是,cfDNA,的一种）,甚至在肿瘤形成早期血液中往往还没有,CTCs,但是却已经开始有,ctDNA,。,Ma M,et al.J.Annals of translational medicine,2015,3(16).,6,液态活检与你同行,1991,膀胱癌患者尿液,DNA-,TP53,突变,1999,乳腺癌,TP53,突变,胰腺癌,KRAS,突变,2004,肝癌和卵巢癌发现,TP53,突变,2007,食管癌,CpG,岛甲基化,2003,结直肠癌发现,KRAS,突变,2007,肺癌发现,KRAS,突变；黑色素瘤,BRAF,突变,ctDNA,成为肿瘤研究热点，下一代癌症指标,几十年来，人们发现,ctDNA,与肿瘤密切相关，能够准确反映肿瘤的动态变化。,肾癌,DNA,不稳定性,2008,7,液态活检与你同行,8,循环肿瘤细胞（,CTCs,）,循环肿瘤细胞（,CTCs,）指从实体瘤中脱离出来并进入外周血液循环的肿瘤细胞。,1869,澳大利亚医生,Ashworth,发现,CTCs,1989,肿瘤转移中发现,CTC,1999-2003,开展大量临床实验,2013,1976,1976,年,CTC,细胞被重新定义,2004,2017,FDA,批准用于临床,单细胞测序技术确立,CTC,的肿瘤替代性,CTC可能在肉眼可见肿瘤形成之前进入外周血，是肿瘤转移的“种子”。,8,液态活检与你同行,9,外泌体及其发现,Raposo G,，,et al.J.J Cell Biol,2013,200(4):373-383.,外泌体研究尚处于临床早期，全球临床试验,26,例,1986,2013,1996,膜性囊泡研究的三位科学家获得诺贝尔奖,发现外泌体,EB,病毒转化的,B,细胞内膜性囊泡可激活,T,细胞,天然存在于体液中，包括血液、唾液、尿液和母乳。,外泌体,(Exosome),是活细胞分泌的来源于晚期核内体,(,也称为多囊泡体,),的膜性囊泡。,9,液态活检与你同行,10,液体活检技术对比,ctDNA,富集容易检测难但肿瘤代表性,较强,CTC,检测容易富集难,外,泌体的稳定性,较强，但距临床应用还较远,10,液态活检与你同行,Part 2,液态活检临床应用,11,液态活检与你同行,ctDNA,的临床应用,Heitzer E,et al.J.Clinical chemistry,2015,61(1):112-123.,早期诊断，检测残余病灶,动态监测治疗反应；指导靶向用药,判断预后,12,液态活检与你同行,14,ROS1,融合基因,2007,年全基因组分析在肺癌上发现,ROS1,基因。,在前期临床的研究中，,crizotinib,显示出对抗,ROS1,驱动的肿瘤细胞的活性。,活,Nat Med.2012 Feb 12;18(3):378-81.,14,液态活检与你同行,15,ROS1,融合基因（临床研究,PROFILE 1001,）,Shaw A T,et al.NEJM,2014,371(21):1963-1971.,入组病例：,ROS1,队列研究入组,ROS1,突变阳性患者,50,人,检测方法：,FISH,检测,研究结果：,ORR,：,72%,，,mPFS,为,19.2,个月,15,液态活检与你同行,16,ROS1,融合基因（临床研究,OO-1201,）,.,吴一龙,2016 CSCO,关键入组标准,集中,RT-PCR,检测,ROS1-,阳性,确认,ALK,融合,阴性,局部晚期或转移性,NSCLC,既往接受过,3,线的系统,治疗,ECOG PS 0 or 1,可评估的疾病,治疗稳定的脑转移患者可入组,克唑替尼,250mg Bid PO,，,持续剂量,28,天一周期,（,N=127,）,临床终点,主要终点：,ORR,次要终点：持续响应时间,响应时间,疾病控制率,PFS,OS,安全性,临床结局,OO-1201是一项针对东亚人群（中国、日本、韩国）的期临床研究，其中包括中国患者74例，是迄今为止规模最大的ROS1阳性NSCLC临床研究。,16,液态活检与你同行,17,ROS1,融合基因（临床研究,OO-1201,）,.,吴一龙,2016 CSCO,基线统计与疾病特点,17,液态活检与你同行,18,ROS1,融合基因（临床研究,OO-1201,）,.,吴一龙,2016 CSCO,基线疾病变化百分比,IRR-,评估的靶病变疾病变化百分比,18,液态活检与你同行,19,ROS1,融合基因（临床研究,OO-1201,）,.,吴一龙,2016 CSCO,治疗中发生,10%,的不良反应,19,液态活检与你同行,Part 3,液态活检,VS,组织检测,20,液态活检与你同行,21,血液检测肿瘤基因突变的关键问题,血液检测是否有生存获益,?,1,血液检测与组织的一致性程度,?,2,21,液态活检与你同行,血液检测的优势与临床获益,进展追踪（比影像学更早）,血液检测无痛微创、容易获取,无取样空间限制,22,液态活检与你同行,23,ctDNA,检测,RAS,突变与组织检测的一致性,Vidal J,et al.J.Annals of Oncology,2017,28(6):1325-1332.,IF:11.855,55,例组织中检测阳性的患者，,53,例血液样本阳性，,总体一致率,达到,96.4%,。,60,例组织检测,RAS,野生型的患者，,54,例血液检测中为野生型，总体符合率,90%,。,其余,6,例患者，血液检测到突变而组织未检测到,。,55,例组织阳性,60,例组织阴性,115,例转移型,mCRC,患者的组织和血液样本,研究结论：,115,例,mCRC,患者组织和血浆样本,RAS,分析总一致性为,93%,。,血液检测的可靠性不亚于组织检测，甚至高于组织检测,23,液态活检与你同行,24,ctDNA,检测与组织检测的一致性,Vidal J,et al.J.Annals of Oncology,2017,28(6):1325-1332.,临床案例：,NRAS61,等位基因突变的术前术后动态监测案例,KRAS146,等位基因突变的术后监测案例,一个,IV,期结直肠癌肝转移的患者，检测到血浆和组织,NRAS61,突变后,4,周后开始贝伐单抗,-FOLFOX,治疗，显著的,ctDNA,下降与疾病稳定和,12,周时,CT,扫描结果相关联；八个月后，患者疾病复发，,RAS,等位基因突变率相应增加，启动二线治疗方案,FOLFIRI-,阿柏西普三个月后，,CT,检测并且稳定，此时检测不到,ctDNA,RAS,突变。,一个,IV,期结直肠癌多发转移的患者，血液活检分析检测到一个,KRAS146,等位基因突变，随后手术组织样本的检测证实了血液检测的结果。,FOLFOX-,贝伐单抗的治疗早期，,ctDNA RAS,突变率逐渐降低，,12,周时检测不到,ctDNA,，治疗停止后，,ctDNA KRAS146,突变率增加，随后再次进行化疗，,ctDNA KRAS146,突变率随之下降。,24,液态活检与你同行,作者,年份,期刊,样本数,癌种,方法,突变一致率,Shu Y,et al,2017,Scientific Reports,605,除脑瘤外的,29,种肿瘤,NGS,87.0%,Ma2016,2016,Gene,219,III-IV,期的,NSCLC,患者,ARMS,82%,（,EGFR,）,IFUM trial,2014,2014,Journal of Thoracic Oncology,1060,NSCLC,患者,试剂盒,94%,（,EGFR,）,Villaflor,2016,Oncotarget,NSCLC,患者,NGS,79%,Vidal J,et al,2017,Annals of Oncology,115,转移型结直肠癌,试剂盒,93,%,（,RAS,）,血液检测与组织检测具有较高一致性,组织和血液样本的不一致性原因可能有：,肿瘤的异质性,组织和血液的采样时间差异,肿瘤时期,肿瘤的类型,25,液态活检与你同行,项目,推荐等级,适用人群,临床应用药物,意义,EGFR,1,类推荐,所有病理诊断为肺腺癌、含有腺癌成分和具有腺癌分化的,NSCLC,患者；无嗜烟者、小活检标本或混合组织学类型的患者,.,厄洛替尼（,1,类推荐）,阿法替尼（,1,类推荐）,吉非替尼（,1,类推荐）,敏感位点,：,19,号外显子缺失、,21,号外显子（,L858R,L861,）,18,号外显子（,G719X,，,G719),，,20,号外显子（,S768I,）,耐药位点,：,20,号外显子插入突变，,KRAS,突变,ALK,1,类推荐,克唑替尼（,1,类推荐）,色瑞替尼（,1,类推荐）,ALK,重排,FISH,阳性,ROS1,2A,推荐,克唑替尼（,2A,推荐）,ROS1,重排,FISH,阳性,PD-L1,2A,推荐,pembrolizumab,（,1,类推荐）,PDL1 IHC50%,EGFR,T790M,2A,推荐,EGFR-TKI,药物耐药进展后,Osimertinib（,1,类推荐）,T790M,突变阳性,脚注：,1.NCCN,强烈推荐更为广泛的分子检测,包括那些已经有针对性药物的罕见突变,或者有可能进行临床研究。更为,广泛的分子检测是改善NSCLC治疗的关键因素。,2.,首先考虑活检样本，如果重复活检不可行，也可考虑血浆活检。如果血浆,T790M,突变检测阴性，可考虑反过来进行组织的基因检测。,3.,如果活检,T790M,为阴性，考虑血液检测，如果血浆T790M突变检测阴性，考虑可反过来进行基于组织的检测。,NCCN,NSCLC,基因检测项目,26,液态活检与你同行,27,液体活检的检测方法的选择,共识一：精准医学是一项系统工程，包括：,发现具有临床意义的基因异常（包括可靶点抑制、预测和或预后标志物）；,发明可靶向特异基因异常的药物；,寻找证明其特异的有效性安全性证据,应用于临床证明了证据的可重复性。,任何一项缺少都不允许。,共识二：液体活检的检测对象包括：循环肿瘤细胞，血浆,DNA,，,Exosome,。,共识三：,检测已知的、单个临床可药物抑制的靶点，液体活检技术推荐,ARMS,法；检测已知的、多个平行,临床可药物抑制的靶点，液体活检技术推荐,NGS,方法。,共识四：用于发现未知基因，探索疗效监测、预后判断和发现耐药机制等，液体活检技术建议使用,NGS,。,共识五：液体活检包括,CTC,和,ctDNA,可能用于肺癌早期诊断和复发监测，但目前仅限于科研探索。,共识六：,NGS,用于临床研究，需平衡患者利益、伦理要求和科学发现之间的关系，以患者利益为至上。,27,液态活检与你同行,THANK YOU FOR WATCHING,28,液态活检与你同行,