高等医药院校教材药物分析课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,高等医药院校教材药物分析,*,高等医药院校教材药物分析,普通高等教育“九五”国家级重点教材,药物分析,供药学类专业用,第四版,刘文英 主编,人民卫生出社,1996年6月,2,高等医药院校教材药物分析,普通高等教育“十五”国家级规划教材,药物分析,供药学类专业用,第五版,刘文英 主编,人民卫生出社 2003年7月,3,高等医药院校教材药物分析,普通高等教育“十五”国家级规划教材,中药制剂分析,供中药类专业用,中国中医药出社,2003年月,4,高等医药院校教材药物分析,绪 论,一、分析的性质和任务,药物分析,是我国药学专业规定设置的一门主要专业课程，是整个药学科学领域中一个重要的组成部分。,它主要运用,化学,、,物理化学,或,生物化学,的方法和技术研究化学结构已经明确的,合成药物或天然药物,及其制剂的质量控制方法，也研究中药制剂和生化药物及其制剂有代表性的质量控制方法。,药物分析任务,是静态的常规检验运用现代分析的方法和技术，深入到工艺流程、反应历程、生物体内代谢过程和综合评价的动态分析监控中。,5,高等医药院校教材药物分析,二、国家药品标准,药典,是国家监督管理药品质量法定技术标准。,中华人民共和国药典,为我国药典的全称,简称中国药典，其后以括号注明是哪一年版，如最新版药典可以表示为中国药典（,2000,年版）；如用英文表示，则,Chinese Pharmaco-poeia,（缩写,Ch.P,）,。,建国以来，我国已经出版了,七版,药典（,1953,、,1963,、,1977,、,1985,、,1990,、,1995,和,2000,年版）。,6,高等医药院校教材药物分析,使用药典需要注意的问题：,1）、立法作用。,2）、与化学试剂的标准不能混淆使用。,3）、符合药典质量标准的药品是合格品而不是优质品。因为:药典是药物的最低标准而不是最高标准。,4）、新版药典生效之日起、旧版药典即自动失去其法律意义。,7,高等医药院校教材药物分析,主要国外药典,美国药典,（The United States Pharmacopoeia，缩写,为,USP）2000年为24版。,美国国家处方集,（The National Formulary，缩写为NF)2000年为19版。,英国药典,（British Pharmacopoeia，缩写为BP），目前版本为2000年版，本书以BP（2000）表示。,日本药局方，,目前为第十三版改正版，本书缩写为JP（13）。,8,高等医药院校教材药物分析,欧洲药典,（European Pharmacopoeia，缩写为Ph.Eup），目前为第三版，分为三卷：第一卷（1979）为一般分析方法；第二卷（1981）和第三卷（1998）均为质量标准规格。,国际药典,(The International Pharmacopoeia，缩写为Ph.Int）,9,高等医药院校教材药物分析,三、药品质量管理规范,药品非临床研究质量管理规定,（Good Laboratory Practice，GLP）,药品生产质量管理规范,（Good Manufacture Practice，GMP）,药品经营质量管理规范,（Good Supply Practice，GSP）,药品临床试验管理规范,（Good Clinical Practice，GCP）,GLP、GMP、GSP、GCP,四个科学管理规范的执行，加强了药品的全面质量控制，有利于加速我国医药产业的发展，提高了药业的国际竞争力。,分析质量管理,（Analytical Quality Control，AQC）。,10,高等医药院校教材药物分析,四、药物分析课程的学习要求,学生通过药物分析第五版教材的学习，应努力掌握以下,六个,方面的基本内容：,1、,药典的基本组成与正确使用：,2、,药物的鉴别、检查和含量测定的基本规律与基本方法；,3、,从药物的结构分析出发，运用化学的、物理化学的以及其他必要的技术与方法进行质量分析的基本方法与原理；,4、,化学药物制剂分析的特点与基本方法。生化药物和中药制剂质量分析的一般规律与主要的方法；,5、,药品质量标准制订的基本原则、内容与方法；,6,、,药品质量控制中的现代化分析方法与技术。,11,高等医药院校教材药物分析,在药物分析的整个学习过程中，要求学生,学会自学,，,善于,独立思考,，既重视药品质量分析的,基础理论知识,的学,习，也重视,基本实验技能,的严谨训练，同时加强,创新能力,的基本素质培养。因此学生,不仅应,研究探讨药物的化学结,构、理化特征、存在状况与分析方法选择之间的关系，,还,应,重视不同分析样本选取最佳分析方法的能力培养，最终,要求学生在我国药物研究,从仿制为主到创制为主,的历史性,转变中，能够具备为提高药品质量所需的,独立分析问题和,解决问题的能力,。,12,高等医药院校教材药物分析,五、药物分析的主要参考书目简介,（一）、书籍,1、药物分析（第一版）、（第二版）、（第三 版）、（第四版）人民卫生出版社、济南出版社,2、体内药物分析 3、生物药制分析,4、医院药制分析 5、中药制剂分析,6、药典注释 7、中成药分析,（二）、期刊,药学学报、中国药学杂志、药物分析杂志、中国中药杂志、中草药、中成药、中药 材、中国现代应用药学杂志、中国医院药学杂志、中国实验方剂学杂志等等。,13,高等医药院校教材药物分析,第一章 药 典 概 况,一、中国药典的内容与进展,中国药典是国家监督管理药品质量的法定技术标准。中,国药典的内容分为,凡例、正文、附录,和,索引,四部,。,（一）凡 例,“凡例”,是解释和使用中国药典正确进行质量检定的基本,原则，并把与正文品种、附录及质量检定有关的共性问题加以,规定，避免在全书中重复说明。,14,高等医药院校教材药物分析,1、名称与编排,2、检验方法和限度,3,、标准品、对照品,系指,用于鉴别、检查、含量测定的标准物质。,4、精确度,“精密称定”,系指,称取重量应准确至所取重量的千分之一；,“称定”,系指称取重量应准确至所取重量的百分之一；,“精密量取”,系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密要求；,“量取”,系指用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具。,取用量为,“约”,若干时，系指取用量不得超过规定量的10%。,15,高等医药院校教材药物分析,（二）正 文,（,1,）,品名（包括中文名，汉语拼音名与英文名）；,（,2,）,有机药物的结构式；,（,3,）,分子式与分子量；,（,4,）,来源或有机药物的化学名称；,（,5,）,含量或效价规定；,（,6,）,处方；,（,7,）,制法；,（8）,形状；,（9）,鉴别；,（,10,）,检查；,（,11,）,含量或效价测定；,（,12,）,类别；,（,13,）,规格；,（,14,）,贮藏；,（,15,）,制剂等,。,16,高等医药院校教材药物分析,举例：,苯 巴 比 妥,Benbabtiuo Phenobarbital,【形状】,【鉴别】,【检查】,酸度;乙醇溶液的澄清度,中性或碱性物质 ;干燥失重;炽灼残渣.,【含量测定】,【类别】,【贮藏】,【制剂】,（三）附录,1、附录组成,2、附录内容举例,17,高等医药院校教材药物分析,（四）索引,（五）2000年版中国药典进展,1、药典凡例和正文部分的增修订,2、药典附录的增修订,3、配套丛书,18,高等医药院校教材药物分析,二、主要国外药典简介,（一）美国药典,1、凡例 （General Notices and Requirements）,2、正文 USP（24）-NF（19）收载药物品种为世界第一位达到3777个。,3、附录 USP（24）附录中一般检查和检定共分为6类。,（二）英国药典,1、凡例 2、正文 3、附录,（三）日本药局方 JP（14）分为两部。,第一部包括凡例、制剂总则、一般试验法和各医药品。,第二部包括通则、生药总则、制剂总则、一般试验法和各医药品，还有原子量表、附录和索引。,19,高等医药院校教材药物分析,三、药品检验工作的机构和基本程序,药品检验工作的基本程序一般为:,取样分析鉴别、检查、含量测定记录、写 出检验报告。,1、取样的基本原则均匀、合理；有代表性，科学性，,真实性。,2、分析的顺序不能颠倒。,3、记录必须真实、简明、完整、具体。,4、报告应符合有关规定。,20,高等医药院校教材药物分析,第二章 药物的鉴别试验,一、概述,药物的,鉴别试验,（identification test）是根据药物的,分子结构、理化性质，采用化学、物理化学或生物化学,方法来判断药物的真伪。,二、鉴别实验的项目,（一）性状,药物的,性状,（description）反映了药物,特有,的,物理性质,，,一般包括,外观、溶解度,和,物理常数,等。,1、外观,2、溶解度,21,高等医药院校教材药物分析,3,、物理常数,物理常数,是鉴定药品质量的重要指标。其测定结果不仅对药品具有鉴别意义，也反映了该药品的纯杂程度。,药典收载的物理常数包括：,相对密度、馏程、熔点、凝点、,比旋度,、,折光率、,黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数,。,（二）一般鉴别试验,一般鉴别试验,（general identification test）是依据某一类药物的,化学结构,或,理化性质,的特征，通过,化学反应,来鉴别药物的真伪。对无机药物是根据其组成的,阴离子和阳离子,的,特殊反应,；对有机药物则大都采用,典型的官能团,反应。,22,高等医药院校教材药物分析,1、有机氟化物,2、有机酸盐,3、芳香第一胺类,4、托烷生物碱类,5、无机金属盐,6,、无机酸根,（三）专属鉴别试验,药物的,专属鉴别试验,（specific identification test）是证实某一种药物的依据，它是根据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。,23,高等医药院校教材药物分析,三、鉴别方法,（一）化学鉴别方法,1、呈色反应鉴别法,2、沉淀生成反应鉴别法,3、荧光反应鉴别法,4,、气体生成反应鉴别法,5,、测定生成物的熔点,（二）光谱鉴别法,1、,紫外,光谱鉴别法,2,、,红外,光谱鉴别法,红外光谱法是一种专属性很强、应用较广（固体、液体、气体样品）的鉴别方法。,主要用于组分单一、结构明确的原料药、特别适用于用其他方法不易区分的同类药物，,如磺胺类、甾体激素类和半合成抗生素类药品。,24,高等医药院校教材药物分析,（三）色谱鉴别法,1、,薄层,色谱鉴别法,瑞士,CAMAG SCANNER 3,薄层扫描仪,岛津CS-9000,双波长薄层扫描仪,25,高等医药院校教材药物分析,2,、,高效液相,色谱鉴别法,气相,色谱鉴别法,26,高等医药院校教材药物分析,3、,纸色,谱鉴别法,（四）生物学法,（五）药物鉴别方法新动向,1、仪器方法用于药物的鉴别数量大大增加，,尤其是红外光谱法和高效液相色谱法,。,2、制剂广泛采用,IR法,鉴别。,3、鉴别条目简练，选择专属的方法进行鉴别，平均每个品种收载2条左右。,27,高等医药院校教材药物分析,四、鉴别试验条件,鉴别试验的目的,是判断药物的真伪。,（一）溶液的浓度,（二）溶液的温度,（三）溶液的酸碱度,（四）试验的时间,（五）干扰成分的存在,28,高等医药院校教材药物分析,五、鉴别试验的灵敏度,（一）反应灵敏度和空白试验,在一定的条件下，能在,尽可能稀,的溶液中观测出,尽可能少量,的供试品，反应对这一要求所能满足的程度，即称为,反应的灵敏度,（sensitivity）。它以两个相互有关的量，即,最低检出量,（minimum detectable quantity）（又称检出限量）和,最低检出浓度,（minimum detectable concentration）（又称界限浓度）来表示。,所谓,空白试验,，就是,在供试品鉴别试验完全相同的条件下，,除不加供试品外，其他试剂均同样加入而进行的试验,。,（二）提高反应灵敏度的方法,1、加入与水互不相溶的有机溶剂提取浓集,2、改进观测方法,29,高等医药院校教材药物分析,附,一、折光率测定法,定义：,利用测定物质的折光率来进行定性定量的分析方法，叫折光法。,折光率是用折光计来测定的，常用阿贝折光计测定。,（一）折光的一般原理：,光线自一种透明介质进入另一个透明介质的时候，由于两种介质密度不同，光进行的速度发生变化，所以，光线就发生如图折射：,30,高等医药院校教材药物分析,31,高等医药院校教材药物分析,32,高等医药院校教材药物分析,33,高等医药院校教材药物分析,34,高等医药院校教材药物分析,35,高等医药院校教材药物分析,36,高等医药院校教材药物分析,37,高等医药院校教材药物分析,38,高等医药院校教材药物分析,39,高等医药院校教材药物分析,40,高等医药院校教材药物分析,41,高等医药院校教材药物分析,42,高等医药院校教材药物分析,43,高等医药院校教材药物分析,44,高等医药院校教材药物分析,45,高等医药院校教材药物分析,46,高等医药院校教材药物分析,47,高等医药院校教材药物分析,48,高等医药院校教材药物分析,第三章 药物的杂质检查,药物的,杂质,是指,药物中存在的无治疗作用、或影响药物的稳定性和疗效、甚至对人体健康有害的物质,。,第一节 概 述,一、药物的纯度要求,药物的纯度,即纯净程度，是反映药品质量的一项重要指标。,对药物质量的评价：三效：高效、长效、速效;,三小：毒性、用量、副作用小。,49,高等医药院校教材药物分析,药物的纯度,通常可以从 （）药物的结构，（）外观性状，（）理化常数，（）杂质检查，（）含量测定等方面作为一个有联系的整体来表明和评定药物的纯度。所以在药物的质量标准中就规定药物的纯度要求。,但是杂质多了：,）药物的理化常数变化,）外观性状变化,）稳定性下降,）含量下降、活性下降,）毒副作用上升,50,高等医药院校教材药物分析,二、杂质的来源和种类,（一）杂质的来源,1、,生产,过程中引入的杂质,：来源 于制备 原料、溶剂、试剂、中间产品、副产品、器械等等。,2、,贮存,过程中引入的杂质：,来源于外界条件 包装、运输、保管不妥（受光线、温度、空气、微生物的影响等等）。,51,高等医药院校教材药物分析,（二）杂质的种类,药物中的杂质来源可分为,一般杂质,和,特殊杂质,。,一般杂质,是指在自然界分布较广泛，在多种药物的生产和贮藏过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、砷盐、重金属等。,特殊杂质,是指在特定药物的生产和贮藏过程中引入的杂质。,容许量。,52,高等医药院校教材药物分析,三、杂质的限量的检查,（一）、没有必要把药物中的杂质完全除去从杂质的来源考虑，完全除去药物中的杂质，即不可能也没有必要。,（二）、药物中杂质允许最大限度的原则：,在不影响药物的疗效和不发生毒性的前提下，允许药物中存在有一定量的杂质。这一允许量被称为杂质的限量。,杂质限量,指药物中所含杂质的最大容许量。,药物中杂质的检查多数采用限量检查（limit test），该检查不要求测定杂质的含量，而只检查其是否超过限量。,由于以上的原因，因此，,药物的杂质 检查又称纯度检查，限度（限量）检查。,53,高等医药院校教材药物分析,A、取一定量供试品 结果,（产生色或浑浊）,B,、取一定量与 被检杂质相同 同上处理 的纯物质或其他对照品标准液 结果 （色或浑浊 ）,药物的限量检查的方法：比色法或比浊法,当,A,B,时,：本项不合格。,当,A,B,时：,本项合格。,当,A=B,时：重做。,依法处理,然后比较,A,和,B,：,54,高等医药院校教材药物分析,杂质的限量,通常用百分之几(%)或百万分之几(10,-6,)来表示。,1,g=,10,-6,g=10,-3,mg,杂质限量的计算：,杂质限量（,L,）=100%,杂质限量=100%,L =,100%,杂质的最大允许量,供试品量,标准溶液的体积（,V）,标准溶液的浓度（,C）,供试品的量（S）,C V,S,55,高等医药院校教材药物分析,应用示例一,对乙酰氨基酚中氯化物检查,取对乙酰氨基酚2.0g，加水100ml时，加热溶解后冷却，滤,过，取滤液25ml，依法检查氯化物（中国药典，附录VIIIA），,所发生的浑浊与标准氯化钠溶液5.0ml（每1ml 相当于10,g的cl,-,）,制成的对照液比较，不得更浓。问氯化物的限量是多少？,L=,C,V,S,100%=,0.01,5,2,10,3,25,100,100%=0.01%,56,高等医药院校教材药物分析,第二节一般杂质的检查方法,一、氯化物的检查法,1、原理：,中国药典对氯化物的检查是,利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银白色浑浊液，与一定标准氯化钠溶液在相同的条件下生成的氯化银浑浊液比较，浊度不得更大。,Cl,-,AgCl（,微量时浑浊）,稀,HNO,3,Ag,NO,3,57,高等医药院校教材药物分析,2、方法：比浊法,A、取一定量供试品 产生AgCl (浑浊）,依法处理,稀HNO,3,AgNO,3,同上处理,B、取一定量标准,NaCI,液,同上,（标准,NaCI,浓度C=0.01,mg CI,-,/,ml,）,（如 A 浊度比B小则本项合格）。,58,高等医药院校教材药物分析,3、注意点：,（,1）加HNO,3,目的；,A、AgCI 不溶于HNO,3,可在HNO,3,中 产生最好,的乳化浑浊；,B、加速 AgCI,的,产生；,C、防止产生Ag,2,0,，Ag,3,PO,4,Ag,2,CO,3,因为,这些,溶,于HNO,3,这样就可以防止,CO,3,2-,，,OH,-,，PO,4,3,-,干扰。,（2）加HNO 3 的 量要合适 （3）CI,-,浓度,（4）温度,59,高等医药院校教材药物分析,（,6）有干扰物必须消除。,A、如：（有色）取两分等量供试品：,a、一份做供试液（A管）依法检查,b、另一份,AgCI,滤液（B 管加入,规定量的标准NaCI溶液作为对照管）。,加稀 HNO,3,过滤,B,、用滤纸过滤时，滤纸中如含有氯化物，可预先用含,有硝,酸的水溶液洗净后使用。,C,、Br,-,、I,-,与AgNO,3,作用均能生成Ag,（卤化银）；硫氰酸盐能与AgNO,3,作用生成硫氰酸银,，,以上均有干扰。因此，必须排除。,（5）严格按照操作顺序进行,AgNO,3,60,高等医药院校教材药物分析,D,、,存在于有机物结构中的氯化物检查。,方法：必须 使结状态的氯变为游离状态的氯。,如 有机破坏的方法：,某些药物含有有机氯杂质可以采用本法。,Cl,Cl,-,（,7,）、溶于水的有机药物（如有机酸碱金属盐）按药典附录方法直接检查氯化物。不溶于水的有机药物，多数加水振摇，使所含氯化物溶解，滤过，取滤液依法检查（也有用丙酮溶解后检查的）。,61,高等医药院校教材药物分析,SO,4,2-,BaSO,4,（SO,4,2-,微量时浑浊）,二、硫酸盐检查法,1、原理：,药物中存在的,微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中 生 成硫酸钡白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件生 成的浑浊比较，浊度不得更大。,2、方法：,比浊法,依法处理,A、供试品一定量 产生BaSO,4,的浑浊,HCl，25%BaCI,2,同上,B、取一定量K,2,SO,4,标准液 同上,HCl,25%BaCI,2,62,高等医药院校教材药物分析,3、注意点：（1）加HCI 要 适量,防止BaCO,3,Ba,3,（PO,4,）,2,等 的生成。（2）本法适宜比浊浓度为0.10.5 mgSO,4,2-,/50 ml。（3）BaCl,2,试液浓度在10%25%范围内。（4）供试液如需滤过，应先用盐酸使成酸性的蒸馏水洗净滤纸中硫酸盐。（5）有色供试品溶液的处理及其他注意事项与氯化物检查法相同。,63,高等医药院校教材药物分析,1,、,原理,铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵生成红色可溶性硫氰酸铁配位离子，再与一定量标准铁溶液用同法处理后所呈的颜色比较，颜色不得更深,。,H,+,3-,移至50mI纳氏,比色管,稀HCI 4mI,过硫酸铵50mg,按上法,三、铁盐检查法,：,Fe,3+,+6 SCN,-,、方法：,比色法,（）供试品 水mI,加水稀释或约35mI后,Fe（SCN）,6,液（30 100）3 mI，再加水适量稀释成 50mI，摇均,如显色与标准溶液比较。,（2）标准铁溶液,处理,显色,（一）硫氰酸盐法,加硫氰酸铵溶,64,高等医药院校教材药物分析,（二）巯基醋酸法,（“巯”音“球”）,BP采用巯氰醋酸（mercaptoacetic acid）法检查药物中铁盐。,原理,硫氰醋酸还原Fe,3,为Fe,2,，在氨碱性溶液中进一步,与Fe2作用生成红色配位离子，与一定量标准铁溶液经同法,处理后产生的颜色,进行比较，以限制铁的量。,3）注意点：,1）加HCI防止铁盐水解,2）加过硫酸铵（NH,4,）,2,S,2,O,8,氧化剂，氧化供试品中 F,2+,生成,Fe,3+,;防止光线使硫氰酸铁还原或分解退色。3）有干扰要排除。,65,高等医药院校教材药物分析,2Fe,3,2HSCH,2,COOH 2Fe,2,SCH,2,COOH 2H,SCH,2,COOH,2Fe,3,2HSCH,2,COOH Fe（SCH,2,COOH）,2,H,Fe（SCH,2,COOH）,2,Fe（SCH,2,COO）,2,2,2H,2,0,2OH,-,红色,66,高等医药院校教材药物分析,1、原理,H,+,（1）,Pb,2,+,PbS,（量少时，呈色 黄,黑）,H,2,S,（2）、凡溶于碱不溶于稀酸的药物，如磺胺类，巴比妥类等，均在碱性溶液中以硫化钠试液为显色剂。,四、重金属检查法：,OH,-,Pb,2+,PbS,Na,2,S,（3）含芳环或杂环的有机药物，先进行结构破坏，使共价的铅变为游离的铅，再采取上述的（1）或者（2）法检查。,67,高等医药院校教材药物分析,.方法,第一法 硫代乙酰胺法,原理,硫代乙酰胺在弱酸性（,p,H3.5,醋酸盐缓冲液）条件下水解，产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物均匀混悬液，与一定量标准铅溶液经同法,处理后所呈现颜色比较，颜色不得更深,。,CH,3,CSNH,2,H,2,0 CH,3,CONH,2,H,2,S,H,2,S Pb,2,PbS 2H,pH3.5,68,高等医药院校教材药物分析,操作方法（比色法）：,依法处理,A、一定量供试品,PbS,HAC、H,2,S,注意点,：,pH：,pH3.5 在此条件下沉淀完全；不溶于HAC的检品在OH,-,中进行。,同上,B、取一定标准铅液,PbS,Pb(NO,3,),2,69,高等医药院校教材药物分析,第二法 适用于在水、乙醇中难溶，或能与金属离子形成配位化合物的有机药物。,原理,将供试品炽灼破坏后，加,硝酸加热处理,，使有机物分解，破坏完全后，再按第一法进行检查。,第三法 适用于,难溶于,稀酸但,能溶解于,碱性水溶液的药物，如磺胺类、巴比妥类药物等。,原理,在碱性介质中，以,硫化钠为显色剂,，使Pb,2,生 成PbS 微粒的混悬液，与一定标准铅溶液经同法,处理后所呈颜色比较不得更深,。,70,高等医药院校教材药物分析,注意点,：,A、加,HNO,3,目的：水解 盐+,H,2,O,酸 +碱 中和,B、临用前配制：溶液愈释愈易水解，所以临用前稀释。,（3）排除干扰物质,（4）含芳环或杂环有机物，按药典方法先炽灼破环使,与有机物分子结合的重金属游离，再依法检查。,（5）微孔滤膜过滤法 。,71,高等医药院校教材药物分析,第四法 微孔滤膜法。适用于重金属限量低的药物。（含25g重金属）的检查。,原理,使重金属生成的硫化物富集于微孔滤膜上，比较供试品和一定量的标准铅溶液同法处理后产生的色斑深浅，确定重金属是否超过限量。,试验装置,图见下页,72,高等医药院校教材药物分析,73,高等医药院校教材药物分析,五、砷盐检查法,（一）古蔡（Gutzeit）氏法,原理,金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中微量砷盐反应生成具有挥发性的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生,黄色至棕色的砷斑,，,与一定量标准砷溶液所生成的砷斑比较，颜色不得更深。,74,高等医药院校教材药物分析,原理：,A,S,O,3,3-,（亚砷酸盐）,A,S,H,3,AsH（HgBr）,2,黄色,As（HgBr）,3,棕色,Zn+HCI,新生态H,2,HgBr,2,试纸,砷斑：,75,高等医药院校教材药物分析,As,3,3Zn 3H,3Zn,2,AsH,3,AsO,3,-3Zn9H,3Zn,2+,3H,2,O AsH,3,AsH,3,3HgBr,2,3HBr As（HgBr）,3,（黄色）,2As（HgBr）,3,AsH,3,3 AsH（HgBr）,2,（棕色）,As（HgBr）,3,AsH,3,3HBr As,2,Hg,3,（棕黑色）,76,高等医药院校教材药物分析,装置:,77,高等医药院校教材药物分析,方法,注意事项,供试品处理,含锑药物，如葡萄糖酸锑钠，用古蔡氏法检查时，锑盐也可被还原为锑化氢，与溴化汞试纸作用，产生灰色锑斑，干扰砷斑的检出：,SbH,3,HgBr,2,SbH,2,（HgBr）HBr,可改用,白道田夫（Betterdorff）法,检查砷盐。方法原理是氯化亚锡在盐酸中将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理后的颜色比较，可控制,78,高等医药院校教材药物分析,供试品中的砷量：,2As,3,3SnCl,2,6HCl 2As 3 SnCl,4,6H,此法的反应灵敏度以As,2,O,3,计20,g。少量二氯化汞的加入，能提高反应灵敏度达20,g/10ml。,（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（silve diethyldithiocarbamate,）,简称Ag（DDC）法,本法为中国药典和USP（24）收载的方法。不仅可用于,砷盐的限量检查，也可用作微量砷盐的含量测定。,原理 金属锌与酸作用，产生新生态的氢，与微量砷盐反应，生成具有挥发性的砷化氢；砷化氢遇二乙基二硫代氨基甲酸银，,79,高等医药院校教材药物分析,AsH,3,6Ag（DDC）3,As（DDC）,3,6Ag 3,HDDC,使其还原产生红色的胶态银，用目视比色法或在510nm,波长处测定吸收度，再以一定量标准砷溶液用同法处,理后得到的有色溶液进行比较。,80,高等医药院校教材药物分析,81,高等医药院校教材药物分析,六、,溶液颜色检查法,有色杂质可能在药物的生产过程中引入，也可能由贮藏,过程产生。对溶液颜色进行检查，可控制药物中有色杂质的,含量。中国药典采用的检查方法有三种。,（一）目视比色法,（二）分光光度法,（三）色差法,原理,方法,82,高等医药院校教材药物分析,七、,易炭化物检查法,易炭化物检查法是检查药物中遇硫酸易炭化或易氧化,而呈色的微量有机杂质。这类杂质多数结构未知，用硫酸,呈色的方法可以简便地控制他们的总量。,方法,注意事项,八、,溶液澄清度检查法,澄清度可反应药物溶液中的微量不溶性杂质的存在情,况，在一定的程度上可反映药品的质量和生产的工艺水平，,对于供制备注射液用原料药物的纯度检查尤为重要。,83,高等医药院校教材药物分析,原理 乌洛托品在偏酸性条件下水解产生甲醛，甲醛与,肼缩合生成不溶于水的甲醛白色浑浊。,（CH,2,）,6,N,4,6H,2,O 6HCHO4NH,S,HCHOH,2,N NH,2,H,2,C,=,N NH2 H,2,O,方法,注意事项,84,高等医药院校教材药物分析,九、,炽灼残渣检查法,中国药典和美国药典对炽灼残渣（residue on ignition）,的定义：有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，,高温炽灼，所产生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。英国药,典称去其为硫酸灰分（sulphated ash）。炽灼残渣检查用,于控制有机药物和挥发性无机药物中存在的非挥发性无机杂质。,方法,注意事项,85,高等医药院校教材药物分析,十、,干燥失重测定法,干燥失重系指药品在规定的条件下，经干燥后所减少,的量，以百分率表示。干燥失重的量应恒重。由干燥至恒,重的第二次及各次称重均应在规定的条件下继续干燥1h后,进行。,（一）常压恒温干燥法,本法适用于受热较稳定的药物。,方法,注意事项,86,高等医药院校教材药物分析,（二）,干燥剂干燥法,本法适用于受热分解、或易于挥发的供试品。,干燥剂：（1）硅胶(吸水力大于硫酸,使,用方便,价廉,变色,可以反复使用）（2）硫酸（吸水次之，较便宜）,（3）五氧化二磷（吸水力强，但价高）,（三）,减压干燥法,本法适用于熔点低、受热不稳定或难驱除水分的药物。,原理,方法,注意事项,87,高等医药院校教材药物分析,（四）热分析法,在程序控制温度的情况下，测定物质的物理、,化学变化与温度关系的一类仪器分析方法称为热分,析法。该方法具有样品用量少，灵敏、快速等优点，,在药物分析中广泛用于物质的熔点、多晶型、纯度、,溶剂化物、水分及热解产物的测定。根据测定物理,量的不同，热分析法又有不同的名称。药物分析中,常用的热分析方法是：热重分析法、差示热分析法、,差示扫描量热法。,88,高等医药院校教材药物分析,1热重分析法（thermogravimetric analysis，TGA）,2差示热分析法（differential thermal analysis）,3差示扫描量热法（differential scanning calorimetry，DSC,）,89,高等医药院校教材药物分析,十一、有机溶剂残留量测定,中国药典附录收载的残留溶剂测定法有溶液直接进样法和顶空进样法两种。,第一法 溶液直接进样法,方法,注意事项,第二法 顶空进样法,方法,注意事项,应用示例一 壬苯醇醚中二氧六环检查,应用示例,二 秋水仙碱中氯仿和醋酸乙酯的检查,90,高等医药院校教材药物分析,第三节 特殊杂质检查方法,一、利用药物和杂质在物理性质上的差异,（一）臭味及挥发性的差异,（二）,颜色的差异,（三）溶解行为的差异,（四）旋光性质的差异,（五）,对光吸收性质的差异,1紫外分光光度法,2原子吸收分光光度法,3红外分光光度法,4荧光分析法,91,高等医药院校教材药物分析,（六）,吸附或分配性质的差异,1薄层色谱法,2 纸色谱法,3高效液相色谱法,4气相色谱法,二、利用药物和杂质在化学性质上的差异,（一）酸碱性的差异,1,规定消耗滴定液的体积,2,PH值法,3指试剂法,92,高等医药院校教材药物分析,（二）,氧化还原性的差异,（三）杂质与一定试剂反应产生沉淀,（四）,杂质与一定试剂反应产生颜色,（五）,杂质与一定试剂反应产生气体,（六）,药物经有机破坏后检查杂质,1硒检查法,2氟检查法,93,高等医药院校教材药物分析,第四章药物定量分析与分析方法验证,第一节,定量分析样品的前处理方法,一、概述,含金属或卤素的药物，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁、碘苯酯、磺溴酞钠等，在分析前需要经过不同方法处理之后，方可进行测定。处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异，如：,有机卤素药物，,所含卤素原子均直接与碳原子相连，但不同药物,中卤素所处的位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差,异。如果卤素和芳环相连接，则结合牢固，与脂肪链的碳原子相连接，则结合不牢固；,94,高等医药院校教材药物分析,而含金属的有机药物，有两种情况：,一是金属原子不直接与碳原子相连,，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，称为含金属的有机化合物，其分子结构中的金属原子结合不够牢固，在水溶液中既可离解出金属离子，如有机结构部分不干扰分析时，可在溶液中直接进行其金属的鉴别或含量定；,二是金属原子直接与碳原子以共价键相连接,，结合状态比,较牢，称为有机金属药物，在溶液中其金属一般不能解离成离子状态，应该根据共价键的牢固程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态，应该根据共价键的牢固程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转变为无机的金属盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测定。,95,高等医药院校教材药物分析,二、不经有机破坏的分析方法,（一）,直接测定法,凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些,C-M,（金属原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，,在水溶液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方,法进行测定,。,（二）经水解后测定法,1直接回流后测定法,2用硫酸水解后测定法,（三）经氧化还原后测定法,1,碱性还原后测定,96,高等医药院校教材药物分析,2,酸性还原后测定,3,利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量,三、经有机破坏的分析方法,（一）湿法破坏,1,硝酸-高氯酸法,2,硝酸-硫酸法,3,硫酸-硫酸盐法,4,其它湿法,（二）干法破坏,97,高等医药院校教材药物分析,（三）氧瓶燃烧法,氧瓶燃烧法（oxygen flask combustion method）系将有机药物放入充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜的分析方法进行鉴别、,检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、硒等其它元素,的有机药物。,98,高等医药院校教材药物分析,本法是快速分解有机物的简单方法，它不需,要复杂设备，就能使有机化合物中的待测元素定,量分解成离子型。该方法被各国药典所收载。,1,仪器装置 燃烧瓶为500ml、1000ml、或,2000ml磨口、硬质玻璃锥形瓶，瓶塞应严密、空,心、底部熔封铂丝一根（直径为1mm），铂丝下,端做成网状或螺旋状，长度约为瓶身长度的2,3，,如图,99,高等医药院校教材药物分析,2,称样,3,燃烧分解操作法,4,吸收液的选择,100,高等医药院校教材药物分析,第二节,定量分析方法特点,一、,容量分析法,（一）,容量分析法的特点,（二）,容量分析法的计算问题,1,滴定度,2,滴定度（T）的计算,3,百分含量计算,（1）,直接滴定法,含量%=,V,T,W,100%,=,V,TF,W,100%,（2）回滴定法（剩余滴定法,）,101,高等医药院校教材药物分析,二、,光谱分析法,（一）紫外-可见分光光度法,1特点 紫外-可见分光光度法是根据物质分子对波长为,200nm,760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的光,谱分析方法。主要特点如下：,（1）灵敏度高，可达10,-4,g/ml,10,-7,g/ml。,（2）准确度高，相对误差为2%,5%。,（3）仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。,含量%=,（,V,A,F,A,V,B,F,B,）,T,W,100%,102,高等医药院校教材药物分析,2郎伯-比耳定律,3仪器校正和检定,4对溶剂的要求,5测定法,（二）,荧光分析法,1特点,2荧光分析仪,3含量测定,103,高等医药院校教材药物分析,三、,色谱分析法,色谱分析法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色,谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。又可根据分离方,法分为：纸色谱、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效,液相色谱法等。,（一）高效液相色谱法,1对仪器的一般要求,系统适用性实验,（1）色谱柱的理论塔板数（n）,（2）分离度,104,高等医药院校教材药物分析,.,测定法,（1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量：,A,S,/C,S,A,R,/C,R,Ax,校正因子（f）,=,含量（C,）,=f,A,S,/C,S,（2）外标法测定供试品中主成分含量：,外标法可分为标准曲线法和外标一点法。,1）标准曲线法：,2,）外标一点法：,105,高等医药院校教材药物分析,(二),气相色谱法,1.,对仪器的一般要求,2.,系统适应性实验,3.,测定法,106,高等医药院校教材药物分析,第三节,药品质量标准分析方法验证,验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和,重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。,一、,准确度,（一）含量测定的准确度,准确度