辣椒红色素的提取和检测.ppt

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,辣椒红色素的提取和检测,生物与环境实验中心化学实验室,2013.05,一、实验目的,1、了解从辣椒中提取辣椒红色素的基本原理和方法,2、进一步掌握索氏提取、薄层色谱和吸光度测定等操作技术。,红辣椒中含有多种色素，其含量可高达3.2g/100g(成熟的干辣椒)，已知的有辣椒红色素（C,40,H,56,O,3,，M=584.85gmol,-1,）、辣椒玉红素（C,40,H,56,O,4,，M=600.85gmol,-1,）和-胡萝卜素，它们都是类胡萝卜素，在结构上都属于二环四萜化合物。辣椒红色素是深红色粘性液体或深胭脂红色结晶的天然食用色素，并具有营养保健作用和抗癌能力。辣椒红色素易溶于乙醇、丙酮、二氯甲烷、植物油而不溶于甘油和水。,二、实验原理,辣椒中含有强烈辛辣味的辣素（辣椒碱），含量一般为,0.20.5,。固态辣椒碱是白色或淡黄色针状晶体，不溶于,水，易溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿。,辣椒碱都是酰胺类化合物，通式为,O OCH,3,RCNHCH,2,OH,其酚羟基具有弱酸性，可溶于,NaOH,溶液中。用有机溶剂提取,红辣椒中的辣椒红色素过程中，需先除去辣椒碱，提取得到,的辣椒色素经浓缩、干燥后，可用薄层色谱进行分析分离，,由分光光度法测定辣椒红色素的色价及含量。,仪器：,圆底烧瓶(250mL)，索氏提取器，直型水冷凝管，蒸馏,头，层析缸，CMC硅胶薄层板(515cm玻璃板)，烧杯(250,mL)，锥形瓶(100mL)，试剂瓶(100mL)，量筒(100mL)，点,滴板1个，温度计(100)，电热套，恒温水浴锅，722光栅,型分光光度计，药物天平，电子天平，组织捣碎机，电吹,风，剪刀(公用)，玻棒，铅笔，小尺子(自备)。,试剂：,红辣椒干、95乙醇，丙酮，石油醚(沸点3060)，,15NaOH溶液。,材料：,毛细管，沸石，,纱布，脱脂棉，滤纸，擦镜纸，,pH,试,纸,。,三、实验仪器与试剂,四、实验步骤,1、辣椒碱的除去,将干的红辣椒剪碎去籽并捣碎，称取20g，加,入180mL（按19的比例）5%NaOH溶液于250mL烧,杯中，在90水浴上加热1.5h后，将杯内液体倾倒,于双层纱布上滤去碱液，用水洗涤至中性，挤干，,放入100mL烧瓶中，用50mL95%乙醇浸提备用。,索氏提取器,去除辣素辣椒粉,120mL95乙醇,沸石23粒,90水浴1.5h,回收,100烘干,计算Rf值,置双层纱布中,自来水洗涤,浓缩液,广囗瓶,辣椒红色素,称量提取率,提取辣椒红色素的实验流程,去除辣素,的辣椒粉,薄层色谱分析,20g辣椒粉,180mL5NaOH,挤干,50mL95乙醇浸提,提取23h,至提取液,颜色很浅,常压蒸馏,补加沸石,乙醇,测460nm吸光度A,称取0.0020g,乙醇溶解,定容成25mL,少量溶解,点样,展开,计算：,换算：,红色素含量,辣椒,红色素,=,1/100,式中 460,被测试样为1%,1cm比色皿,在,最大吸收峰460nm处的吸光度,即为色价;,A实测试样的吸光度,f稀释倍数,m试样质量,A,f,m,六、思考题,1、干红辣椒用NaOH溶液浸泡后，为什么不采用过滤或抽滤的方法进行固液分离？,答：辣椒容易覆盖住滤纸，难以固液分离。,2、干红辣椒的除辣操作时，水浴温度不能超过90，水浴时间不宜过长，其原因是什么？,答：温度太高辣椒红色素会分解,3、薄层色谱中的R,f,值有何意义？不同的展开系统对R,f,值会产生什么影响？,答：,Rf值为溶质迁移距离与流动相迁移距离之比。,展开系统的两种溶剂极性越接近，斑点越分散，越狭长。,4、薄层板上点样量过多或过少，对薄层色谱分离效果,有什么影响？,答：样品过多容易拖尾，样品过少点样不明显，溶剂未挥发就二次点样会使点跑得比较大。,