山东中医药大学-中药鉴定学-总论6-7章.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第二节 中药鉴定的一般程序,中药鉴定工作的进行，主要依据中国药典、部颁标准，其次是各省（市、自治区）制定的药品标准等，对检品的真实性、纯度、质量进行评价和检定。,在中药鉴定的常规工作中，一般按照下列程序进行。,一、样品登记,对送检样品进行登记，包括送检单位、日期、鉴定目的、样品数量、一般状态和包装等。,二、取样,（一）取样前的准备工作,应注意品名、产地、批号、规格等级以及包件式样是否一致，然后进行一般性检查，如包装的完整性、清洁程度、有无水迹、霉烂或其他物质污染等。,（二）取样原则,1.中药材,药材总包件在100件以下的，抽取5件；1001000件的，按5%取样；超过1000件的，超过的部分按1%取样；贵重药材及不足5件的一般药材，逐件取样。破碎的、粉末状的或大小在1cm以下的药材，每一包件至少在不同部位抽取23份样品，包件少的抽样总量应不少于实验用量的3倍；包件多的，取样量一般按下列规定：一般药材5001000g；粉末状药材25g；贵重药材510g。,2,.,中成药,液体制剂，如酊剂、酒剂、糖浆剂和口服液等，一般取样200mL，同时需注意容器底部是否有沉渣，若有则应摇匀后均匀取样。固体制剂，一般片剂取样200片，未成片前可取已制成的颗粒100g；丸剂一般取10丸；胶囊剂取样不得少于20个胶囊，倾出其中药物并仔细将附着在囊壁上的药物刮下，合并，混匀，以总重量减去空囊壳的重量计算药物的取样量，一般取样100g；粉状中药制剂，如散剂、颗粒剂等，一般取样100g。其他剂型的中成药可根据具体情况随意抽取一定数量，作为随机抽样。贵重药应酌情取样,。,三）取样方法,各种药材取样方法因其性质和种类而异，但必须保证样品具有足够的代表性，这样才能得出正确的鉴定结果。,三、鉴定的项目及程,一般性的中药鉴定是要求鉴定该样品是否符合法定的药用标准。其鉴定目的主要可分为3个方面：真伪鉴别，纯度检查(检查异质有机物和一般杂质)，品质鉴定。,1.,来源,2.性状3.鉴别,4.,检查,5.含量测定,第三节,中药鉴定的方法,中药的鉴定方法主要有基原(来源)鉴定法、性状鉴定法、显微鉴定法、理化鉴定法、生物鉴定法，简称为“五大鉴定法”。各种方法的采取，因鉴定对象和目的而异。,一、基原鉴定法,基原鉴定法，又称“来源鉴定法”，它是中药鉴定的基础，也是中药研究、生产、开发利用的主要依据。基原鉴定法就是应用植物、动物或矿物形态和分类学等方面的知识，对中药的来源或原料药进行鉴定，确定其正确的学名（或矿物的名称）或中成药的原料组成，以保证在应用中品种准确的一种方法，,1.观察植物形态,2.核对文献资料,3.核对标本,4.,标本的采集与制备,6.断面特征,包括自然折断面和刀横切(或削)的平面。,（1）折断面 指药材折断时的现象，如折断的难易程度，折断时的声响，有无粉尘飞扬，新鲜的药材有无汁液流出等。折断后的断面，如平坦、纤维状、刺状、颗粒性、层状或呈胶丝状等。,杜仲折断时有胶丝相连；黄柏折断面，显纤维性；苦楝皮的折断面，裂片状分层。,（2）横切面 要注意皮、木部的比例，以及色泽、射线与维管束的排列形状。常用的术语有：“菊花心”，指根或根茎的横切面的中心部位具有类似菊花瓣状的放射状纹理，如黄芪等；“车轮纹”指药材的断面纹理呈车辐状，如防己；“网纹”，指断面具网状花纹；“油点”或“朱砂点”，指具有红色或红棕色的油细胞或油室；“霜”或“毛”，指药材析出的结晶，如茅苍术；,“,星点”，指大黄髓部的异型复合维管束（compound vascular bundle）；“云锦花纹”，指何首乌的花朵状纹理(异型复合维管束，存在于皮层)，又称“云纹”；“金井玉栏”，指某些根类药材断面浅棕黄色的形成层环与类白色的皮部，如桔梗。,7.气 药材的气是由于含有挥发性物质的缘故，有些药材的气十分特殊，可作为鉴别的主要依据。,8.味 是鉴别药材时口尝的滋味，又称尝法。,药材的味感与药材所含成分及含量有密切关系，每种药材的味感是比较固定的，,药材的味感,也是评价质量的标准之一,。,如乌梅、木瓜、山楂均以味酸为好；黄连、黄柏以味越苦越好；甘草、党参以味甜为好等等。,9、水试 10、火试,三、显微鉴定法,显微鉴定法就是利显微技术对中药进行分析鉴定，以确定其真伪、纯度、品质的一种鉴别方法。,显微鉴定主要包括组织鉴定和粉末鉴定。组织鉴定是通过观察药材切片（磨片）鉴别其组织构造特征，适合于完整药材或粉末特征相似的同属药材的鉴别；粉末鉴定是通过观察药材的粉末制片(解离片)鉴别其细胞分子及内含物的特征，适合于破碎、粉末状药材或中成药的鉴别。,鉴定者必须具有植(动)物解剖的基本知识，掌握制片的基本技术。由于鉴定材料的不同(完整、破碎、粉末)和药用种类及药用部位的不同，选择显微鉴定的方法也不同。首先要根据观察的对象和目的，选择具有代表性的药材，制备不同的显微制片，然后依法进行鉴别,。,1组织鉴定,通过观察生物药的组织构造特征来达到鉴定目的，主要用于个体较小的完整药材鉴别。,2粉末鉴定,通过观察中药的细胞、内含物等特征来达到鉴定的目的。,3显微常数测定,常用的显微常数主要用于叶类中药的栅表细胞比、气孔数、气孔指数、脉岛数等,4显微化学鉴定,（1）显微化学反应 主要用于药材的临时切片(尤其是新鲜的材料)或粉末。如木质化细胞壁、木栓化细胞壁、角质化细胞壁、硅质化细胞壁、黏液化细胞壁、几丁质细胞壁等；糖类的鉴别：如淀粉、菊糖、黏液质和果胶质类；蛋白质(糊粉粒)类的鉴别；鞣质类成分的鉴别；草酸盐的鉴别；碳酸盐的鉴别和生物碱等化学成分的鉴别等,（2）显微定位 利用显微化学的方法确定药材中化学成分的存在部位(有效部位)，以鉴定药材的质量和品种。本法是中药鉴别和质量评价（quality evaluation）的一种简单、有效的方法之一，但选择特有反应的化学试剂较为困难。,5显微定量,显微定量就是利用显微镜及显微测量的某些手段，对一定重量单味药材粉末中的某些显微特征数量进行分析，或测定粉末性中成药中某个组分百分含量的一种方法。本法亦适用于粉末中药混存物的含量测定。,定重量、定面积法,比率计数定量法,（三）显微特征的观察与描述,1.一般描述方法,（1）组织描述 一般是由外向内依次进行描述。在描述中除要注意其各部分的位置、形态、有无其他组织分布等特征外，还应该注意射线、形成层、栓内层和皮层的特征。,（,2,）细胞形状的描述,（,3,）大小和数量的描述,当目的物的大小或数量差异很小时，可记载,1,个数字，如直径约,30,m,。,当目的物的大小或数量差距不很大时，可记载,2,个数字，即最小值与最大值，如长为,15,40,m,；如有少数达,50,m,，则可记其长为,15,40(50),m,。,如目的物的大小或数量有很大差距时，可记载,3,个数字，即最小值、常见值,(,不是平均值,),和最大值，如长,20,40,80,m,。,（,4,）颜色的描述,描述的方法与性状鉴定中药材的颜色描述方法相同。,2.,粉末显微特征的描述,在进行粉末性中药的显微特征描述时，首先需决定描述这些显微特征的顺序，一般可遵循,“先多数后少数，先特殊后一般，先感观后测试”的原则。,(四)电子显微镜鉴定技术,四、理化鉴定法,理化鉴定法,是利用物理的、化学的或仪器分析方法，鉴定中药的真实性、纯度和品质优劣程度的一种鉴定方法。,1物理常数测定法,包括相对密度、旋光度、折光率、硬度、黏稠度、凝固点、熔点等的测定。这对挥发油、油脂类、树脂类、液体类药(如蜂蜜等)和加工品类(如阿胶等)药材的真实性和纯度的鉴定，具有特别重要的意义。,2.微量升华,微量升华是利用中药中所含的某些化学成分，在一定温度下能够升华的性质，在显微镜下观察其升华物的形状、颜色或加某种化学试剂观察其化学反应作为鉴别的特征。必要时可用显微熔点测定器测定升华结晶物的熔点。如大黄的升华物为棱状针晶或羽状结晶。,3.电泳分析法,电泳,(electrophoresis,EP),是一种分离和鉴定混合物中带电离子的技术，其原理是利用中药含有蛋白质等带电荷的成分，在同一电场作用下，由于各组分所带电荷的性质、电荷数目以及分子质量不同，而泳动方向和速度不同，在一定时间内，各成分的泳动率不同，结合谱带数和染色不同达到鉴定的目的。,4.化学定性分析,化学定性分析是指利用某些化学试剂能与中药中的某种或某类化学成分产生特殊的气味、颜色、沉淀或结晶等反应，来作为鉴别真伪的手段。如含生物碱类、有机酸、黄酮类、蒽醌类等成分的鉴别分析。,5.化学定量分析,化学定量分析是通过对中药含有的某种有效成分、有效部位、杂质或有害物质的含量测定，来控制中药质量的一种方法。中药化学定量分析通常包括重量分析法和容量分析法两大类。,（1）重量分析法 （,2,）容量分析法,6.分光光度法,分光光度,法（spectrophotometry）又称“光谱鉴定,法”，它是通过测定中药中被测物质在某些特定波长处或一定波长范围内光的吸收度，对该物质进行定性和定量分析的方法。,（1）紫外光谱法,（,2,）可见分光光度法,（3）红外光谱法 主要用于中药的定性鉴别和所含化合物的结构分析。,（,4,）原子吸收光谱法,（,5,）荧光光谱法,7.色谱鉴定法,色谱鉴定法根据其分离原理，有吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱与排阻色谱等。,（,1,）薄层色谱法,（,2,）薄层扫描法,系指用一定波长的光，可用于中药的有效成分和杂质的含量测定。,（3）毛细管相鉴定法 毛细管相鉴定法是利用中药中所含的化学成分，经纸片毛细管作初步分离后，再与试剂显色进行鉴定的一种方法。常用于中药中有机酸、氨基酸、酚类和苷类成分的鉴别，常用的方法有毛细管吸附法和毛细管展层法,（,4,）气相色谱法,气相色谱法主要用于含挥分性成分的中药鉴定。,（5,）高效液相色谱法,高效液相色谱（,HPLC,）的原理与一般液相色谱十分相类似，流动相均为液体，包括有液固色谱、凝胶色谱、离子交换色谱和液液色谱。,本法可适用于中药中各类成分的鉴定。,8.,质谱鉴定法,等,五、生物鉴定法,生物鉴定（bioassay）法又称“生物测定法”，主要是利用中药或其所含的化合物对生物体（organism）作用强度的大小，以及用DNA特异性遗传标记特征和基因表达差异等来鉴别中药的品种和质量的一种方法。通常分为生物效应鉴定法和基因鉴定法两大类。,（一）免疫鉴定法,（二）细胞生物学鉴定法,(三)生物效价测定法,（四）DNA遗传标记鉴定法,第四节 中药的常规检查项目,一、水分测定,中药中含有过量的水分，不仅易霉烂变质，使有效成分分解，还会相对地减少了实际用量而不能达到治疗目的。,中国药典规定了水分的含量限度，如人参不得过12，三七不得过14，牛黄不得过9.0，阿胶不得过15.0等。,中国药典中水分测定方法规定有四种，,烘干法(干燥失重法)、甲苯法、减压干燥法和气相色谱法。烘干法适用于不含或少含挥发性成分的中药；甲苯法适用于含挥发性成分的中药；减压干燥法适用于含有挥发性成分的贵重中药。另外，也可应用红外线干燥法和导电法测定水分含量，迅速而简便。,二、浸出物含量测定,三、灰分测定,四、挥发油的含量测定,第五节 中药的安全性评价,中药的安全性检测项目主要包括有害物质检查、重金属检查、药品微生物限量检验、热原检查、毒性试验(toxicity test)、刺激试验(irritant test)、过敏试验、对红细胞影响试验等。,有害物质的检查与有效成分的检查同样重要，是中药质量分析的重要内容之一。中药中如果污染了有害物质如农药、霉菌毒素或重金属等，就会影响人的健康 一、黄曲霉毒素的分析,黄曲霉毒素 为黄曲霉菌等一些菌类的代谢产物，目前已发现的主要有8种毒素（B,1,，B,2,，B,2a,，G,1,，G,2,，G,2a,，M,1,，M,2,）。黄曲霉毒素中以B,1,的毒性最强，可使多种实验动物发生癌症。,二、农药残留量的检测,农药的种类很多，常用的有,DDT,、甲氧,DDT,、,1605,、甲基,1605,等。,三、一般杂质限量检查,1重金属的检查,重金属系指在实验条件下能与硫化氢或硫化钠作用显色的金属。常见的重金属离子有,Ag,+,、,Pb,2+,、,Hg,2+,、,Cu,2+,、,Bi,2+,、,Cb,2+,等，这些离子在微酸性溶液中可被,H,2,S,所沉淀。,2,砷盐的检查,3氯化物的检查,第六节 中药的指纹图谱测定,中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。,其特点是：通过指纹图谱的特征性，能有效鉴别样品的真伪或产地。,通过指纹图谱主要特征峰的面积或比例的制定，能有效控制样品的质量，确保样品质量的相对稳定。,一、中药指纹图谱的内容,中药指纹图谱的研究内容主要包括名称、来源、供试品和参照物的制备、检测方法、指纹图谱及技术参数等。供研究指纹图谱用的供试品取样应按照中国药典（2005年版）规定的中药取样方法进行，以保证供试品的代表性和均一性。,二、药材指纹图谱的标准,（一）中药材指纹图谱,中药材指纹图谱系指中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药材特性的共有峰的图谱。如原药材需经过特殊炮制（如醋制、酒制、炒炭等），则应制定原药材和炮制品指纹图谱的检测标准。,1名称、2来源 3供试品的制备,4参照物的制备,5测定方法,6指纹图谱及技术参数,第七章 中药的质量标准,第一节 中药质量标准概述,中药包括中药材、中药饮片及中成药。中药材的生产、中药饮片的炮制加工及中成药的生产是影响和决定中药质量的三大环节，只有对这三个环节进行严格的控制，才能生产出优质的中药。国家食品药品监督管理局发布了中药材生产质量管理规范（简称中药材GAP），控制影响药材质量的各种因素，规范药材各生产环节乃至全过程，以达到中药材“真实、优质、稳定、可控”的目的；在中药饮片炮制环节，可通过建立全国统一的炮制规范、对饮片生产企业实施GMP认证以及实行饮片批准文号制度等措施来提高饮片质量；在中成药生产环节，国家食品药品监督管理局通过对药品生产企业实施GMP认证，以从根本上保证药品质量。,中药的质量标准是对中药质量及其检验方法所作的技术规定，是中药生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的对中药质量进行评价和控制的依据，以保证中药的,安全性、有效性、稳定性和可控性,。,中药的质量标准是对中药质量及其检验方法所作的技术规定，是中药生产、经营、使用、检验和监督管理部门共同遵循的对中药质量进行评价和控制的依据，以保证中药的,安全性、有效性、稳定性和可控性,。,我国现行的中药质量标准分为三级，,即企业标准、地方标准和国家标准。,企业标准,是药品生产企业制定的中药质量标准；,地方标准,是各省、市、自治区制定的中药质量标准；,国家标准,是由国家颁布的中药质量标准，包括药典和部颁标准。,药品标准具有,权威性、科学性和进展性,等特性。,权威性,是指各级法定药品标准特别是国家药典具有法律效力；,科学性,是指药品标准所规定的检测方法和限度均具有充分的科学依据；,进展性,是指药品标准要随着科学技术水平的提高不断得到修订和完善，使其检测指标专属性更强、质量评价方法更加科学、检验技术更加先进,、,限度制定得更加合理。,第二节 中药质量标准的内容,一、中药材和中药饮片质量标准的内容,1品名 包括中文名、汉语拼音与拉丁名。,2来源 包括原植（动）物的科名、植（动）物名、拉丁学名、药用部位、采收季节和产地加工；矿物药注明类、族、矿石名或岩石名、主要成分及产地加工。,3性状 是对该品种的外观、质地、横断面、气味等的描述。,4鉴别 包括经验鉴别、显微鉴别和理化鉴别。显微鉴别包括横切面、表面观及粉末鉴别；理化鉴别包括化学鉴别、色谱鉴别等。选用的方法要求专属、灵敏。色谱鉴别应设对照品或对照药材。,5检查 该项下规定的各检查项目是针对药材和饮片在生产、加工和贮藏过程中可能含有并需要控制的物质而设定。包括杂质、水分、总灰分、酸不溶性灰分、重金属、砷盐、农药残留量、有关的毒性成分及其他必要的检查项目。,6浸出物 可参照中国药典附录浸出物测定法的要求，选用适宜的溶剂，测定浸出物的量，以控制其质量。,7含量测定 对已知活性成分或有明确指标成分的中药材和中药饮片，应建立活性成分或指标成分的含量测定方法，并制定含量限度。,8炮制 对需要进行炮制的品种，应制定合理的炮制工艺。未注明炮制要求的品种，应按中国药典附录药材炮制通则的净制项的规定进行处理。,9性味与归经 是按中医理论对该品种的性能做出的概括。,10功能与主治 是以中医理论和临床用药经验对该品种功效所作的概括性描述，作为对临床用药的指导。,11用法与用量 药材和饮片的用法一般采用水煎内服，特殊用法另行规定；用量系指成人一日常用剂量，必要时可酌情增减。,12注意 注明主要的禁忌和不良反应。,13贮藏 注明对该品种贮藏与保管条件的基本要求。,二、中成药质量标准的内容（同中药材）,第三节 中药质量标准分析方法的验证,验证内容有：准确度、精密度（包括重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。应视具体方法拟订验证的内容。表7-1中列出的分析项目和相应的验证内容可供参考。,