第一章-天然药物化学结构研究.ppt

Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,Click to edit Master title style,从天然物中分离到化合物单体后,需进行结构鉴定,方法有文献调研、化学法、波谱法等。,1）纯化和干燥化合物的样品,a)均一晶形、明确敏锐熔点,b)三种展开系统均显示单一斑点,c)HPLC、GC分析,四、结构研究方法,2）通过文献调研，理化常数和化学定性分析等初步判断化合物结构类型,3）测定分子式、计算不饱和度,a)元素分析,b)同位素丰度比率,c)HR-MS,不饱和度：,=-/2+/2+1,四、结构研究方法,4）确定分子中含有的官能团、结构片段、基本骨架。,UV、IR、NMR、MS等,UV：,共轭双键、,-,不饱和羰基、芳香化合物,IR,：,特征官能团：羟基、羰基、双键、芳环等,NMR：,化学位移(,)、积分面积、偶合常数(,J,),MS：,EI-MS、ESI-MS、FD-MS、FAB-MS,四、结构研究方法,其中最常用的有四大谱：分别是,紫外光谱,（,U,ltra,v,iolet spectroscopy 缩写为,UV,）、,红外光谱,（,I,nfra,r,ed spectroscopy 缩写为,IR,）、,核磁共振谱,（,N,uclear,m,agnetic,r,esonance 缩写为,NMR,）和,质谱,（Mass spectroscopy 缩写为,MS,）。,X,光,真空紫外区,近紫外区,紫,蓝,青,绿,黄,橙,红,近红外区,远红外区,无线电波,可见光区,100nm,200nm,400nm,800nm,20,m,m,500,m,m,光波区域,10,-10,10,-8,10,-6,10,-4,10,-2,10,0,10,2,wavelength(cm),g,-rays,x-rays,UV VIS,IR,m,-wave radio,分子中电子跃迁（从基态至激发态）。其中，n-*、-*跃迁可因吸收紫外光及可见光所引起，吸收光谱将出现在光的紫外区和可见区（200700nm）。,200nm 400 700nm,紫外区（UV）可见区（VIS）,紫外光谱（UV）,紫外 可见光谱（UV-VIS）共轭体系特征,应用：,推断化合物的骨架类型 共轭系统，。,取代基团的推断。如加入诊断试剂推断黄酮的取代模式（类型、数目、排列方式）,用于含量测定（以最大吸收波长作为检测波长进行含量测定）。,红外光谱,（IR）,分子中价键的伸缩及弯曲振动所引起的吸收,而测得的吸收图谱，称为红外光谱。,4000 3600 3000 1500 1000 625cm,-1,特征频率区 指纹区,特征官能团的鉴别 化合物真伪的鉴别,红外光谱(IR)的八个重要区段,33003000,弱吸收 烯氢、芳氢、,强吸收,O-H,、,N-H,30002700,饱和,C-H,24002100,不饱和三键,19001650 C=O,及其衍生物,16801500 C=C,及芳香核骨架震动、,C=N,等,15001300,饱和,C-H,面内弯曲振动,1000650,不饱和,C-H,面外弯曲振动,应用：,1.含氧官能团的判断；,2.含氮官能团的判断；,3.有关芳香环的信息；,4.确定炔烃、烯烃，特别是双键类型的判断。,氢谱,信息参数：化学位移（）、峰面积、峰裂分（s、d、t、q、m）及偶合常数（,）,化学位移,(chemical shift)：与质子的化学环境（诱导效应、共轭效应、各向异性效应等）。,偶合常数,(coupling constant)与,裂分峰形,。,积分曲线,(integration line)。,帮助了解分子中质子的类型、连接方式以及数目,GH,核磁共振氢谱,（,1,H-NMR）,1 化学位移(Chemical shift),(以四甲基硅烷TMS为内标物，将其化学位移定为0，测定各质子共振频率与它的相对距离，这个相对值称为化学位移），一般 1-10ppm,与,1,H核所处的化学环境（1H核周围的电子云密度）有关,电子云密度大，处于高场，值小,电子云密度小，处于低场，值大,0.9-C-CH,3,1.8-C=C-CH,3,2.1-COCH,3,3.0-NCH,3,3.7-OCH,3,11 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0,-COOH,-CHO,Ar-H,-C=C-H,常见结构的化学位移大致范围,(,(ppm),2 偶合常数,J,(Coupling constant),因偶合使信号发生分裂,表现出不同的裂分,如,s(单峰,),d(二重峰,),t(三重峰,),q(四重峰,)等。,磁不等同两个或两组1H核在一,定距离内相互自旋偶合干扰，,发生的分裂所表现出的不同裂分,符合 n+1 规律,(n=磁等同质子的数目),用偶合常数（,J,）表示,峰裂分的数目,峰裂分的距离,不同系统偶合常数(,J,Hz)大小,s 单峰,d 双峰,t 三重峰,q 四重峰,m 多重峰,3 积分曲线,也称积分面积，与分子中的总质子数相当。,化学位移,积分值,偶合裂分,NOE效应,选择的照射一种质子使其饱和，则与该质子在立体空间位置上接近的另一个或数个质子信号强度增高的效应称为核Overhauser效应，简称NOE。,NOE主要用来确定两种质子在分子立体空间结构中是否距离相近，若存在NOE，则表示相近；NOE 越大，则两者在空间的距离就越近。NOE是确定分子中某些基团的位置，立体构型和优势构象的重要手段之一。,核磁共振氢谱在综合光谱解析中的作用,核磁共振氢谱(,1,HNMR)在综合光谱解析中,主要提供化合物中所含,质子的类型：,说明化合物具有哪些种类的含氢官能团。,氢分布：,说明各种类型氢的数目。,核间关系:,氢核间的偶合关系与氢核所处的化学环境,指核间关系可提供化合物的,二级结构信息,，如,连结方式、位置、距离；结构异构与立体异构,(几何异构、光学异构、构象),等),。,三方面的结构信息,。,核磁共振碳谱,(,13,CNMR),碳谱与氢谱类似，也可提供化合物中,1.,碳核的类型、,2.,碳分布、,3.,核间关系三方面结构信息。,主要提供化合物的碳“骨架”信息,。,碳谱的各条谱线一般都有它的惟一性，能够迅速、正确地否定所拟定的错误结构式。碳谱对,立体异构体比较灵敏,，,能给出细微结构信息,。,核磁共振碳谱,（,13,C-NMR）,不同,13,C 核,C,大小与,13,C 核所处的化学环境,（周围电子云密度）有关,用于,13,C 核类型的推断,(C ppm),150220(c=o),200 150 100 50 0,c=c Ar,5080(c-o),饱和碳原子（060）,主要结构,13,C 核,C,的大致范围,电子轰击质谱（EI-MS）：目前常用。,但对于热敏成分及难于气化的成分,（醇、糖苷、部分羧酸等）,大分子物质（多糖、肽类）难以气化,测不到分子离子峰,亦无法测得分子量,解决措施,质谱,（MASS）,电离新方法,（样品不必加热,气化而直接电离）,化合物乙酰化或三甲基,硅烷化（TMS化）,制成热稳定性好的挥发,性衍生物进行测定,(2)场解析质谱 FD-MS,(3)快原子轰击质谱 FAB-MS,(4)化学电离质谱 CI-MS,(5)电喷雾电离质谱 ESI-MS,(6)基质辅助激光解吸电离质谱(MALDI-MS),(7)场致电离(FI-MS),(8)串联质谱（MS-MS）,质谱在综合光谱解析中的作用,质谱,(MS),主要用于确定化合物的分子量、分子式。,质谱图上的碎片峰可以提供一级结构信息。对于一些特征性很强的碎片离子，如,烷基取代苯,的,m/z,91,的苯甲离子及含,氢的酮、酸、酯的麦氏重排离子等，由质谱即可认定某些结构的存在。,质谱的另一个主要功能是作为综合光谱解析后，,验证所推测的未知物结构的正确性,。,