抗磷脂酶A2受体(PLA2R)抗体.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,抗磷脂酶A2受体（PLA2R）抗体,-,特,发性膜性肾病特异性诊断指标,康圣环球肾内项目组,-,方堃,主要内容,1、,原,发性膜性肾病的疾病概况,2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值,3、抗PLA2R抗体的指标检测性能,主要内容,1、,原,发性膜性肾病的疾病概况,2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值,3、抗PLA2R抗体的指标检测性能,膜性肾病，又称膜性肾小球肾炎。,一种针对正常肾小球上皮细胞膜上的抗原成分产生的,自体,抗体,介导的肾小球损害，免疫复合物由上皮细胞膜上脱落,到基底膜的上皮细胞形成,典型的免疫复合物沉着,。沉着的,免疫复合物激活补体，补体膜攻击复合物引起蛋白尿。,病变过程中激活的细胞因子导致基底膜细胞外基质成分改,变引起基底膜增厚。,临床特点：临床以肾病综合征(NS)或无症状性蛋白尿为主要,表现,膜性肾病（MN）,膜性肾病-定义,特,发性MN（,I,MN)70-80%,抗PLA2R抗体,（,90%,）,膜性肾病（MN）的病因,THSD7A,或,查无自身抗体或已知的继发病因,（,10%）,继发性MN(sMN)（可参见KDIGO列表）20-30%,病原体感染（例如HBV、HCV、梅毒和疟疾）,自身免疫性疾病（例如,系统性红斑狼疮、,类风湿性关节炎、干燥综合征和类天疱疮）,癌症,其他疾病（例如镰状细胞贫血、格林-巴利综合征）,药物诱导（例如非甾体类抗炎药，黄金，,汞,和青霉胺,、布洛芬、双氯芬酸等,）,膜性肾病-分类,特,发性膜性肾病-致病机制,PLA2R,表达于人肾小球足细胞表面，抗磷脂酶,A2,受体,抗体阳性的膜性肾病患者中，抗原,/,抗体复合物沉积在肾小,球基底膜上，激活补体系统，最终引起足细胞和肾小球滤过,屏障损伤，蛋白进入原尿，随后出现,蛋白尿,。,Beck LH Jr.Bonegio RG,Lambeau G,Beck DM,et al.M-type phosphorlipaseA2,receptor as target antigen in idiopathic membranous nephropathy.N Engl J Med,361:11-21,2009,特,发性膜性肾病,诊断,病理：肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积，导致毛细血管基底膜弥漫性增厚。,Fervenza,F.,C.,et,al.,Clin,J,Am,Soc,Nephrol,2008;3:905-919,光镜：基底膜增厚，钉突,形成，无系膜细胞增生,免疫荧光：IgG和C3沉积,电镜：上皮下电子致密,物沉积,诊断,:,肾,活检,组织学检查（光镜、免疫荧光染色）,肾脏组织电镜检测,主要内容,1、,原,发性膜性肾病的疾病概况,2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值,3、抗PLA2R抗体的指标检测性能,（1）,原,发性膜性肾病的诊断和鉴别诊断,抗PLA2R抗体是,原,发性膜性肾病的高特异性和灵敏度的血,清学标志物，可以用于区分,原,发和继发性膜性肾病。,(,Hoxha,Harendza,et,al.,2011,Dahnrich,Komorowski,et,al.,2013,),抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值,37例MN患者纳入研究,IMN：37例,sMN：8例,疾病对照：22例,健康对照：30例,PLA2R是,原,发性膜性,肾病的靶抗原!,抗PLA2R仅出现于,原,发性膜性肾病中,Beck et al.,N Engl J Med 361,11-21(2009),（2）疾病活动性和病情预测,抗PLA2R抗体的水平与临床疾病活动性密切相关，,抗体含量的变化与临床结局存在一致性，,是预测疾病进程的良好指标。,抗PLA2R抗体滴度越高，,低白蛋白、,eGFR,下降越明显，肾病范畴蛋白尿比例越高；,疾病的自发缓解率越低；,抗体滴度高组仅有很小比例（,4%,）的患者获得自发缓解，当,IMN,自发缓解或免疫抑制剂治疗获得缓解后该抗体迅速转阴；,肾功能衰竭风险及非肾病患者发生肾病综合征的风险越高；治疗时间越长。,抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值,Beck,et,al,Kidney,Int,77,765-770,（,2010,）,抗PLA2R与,临床结局存在一致性,抗PLA2R抗体滴度越高，,低白蛋白、,eGFR,下降越明显,Chin J Inter Med,，,September 2015,，,Vol.54,，,No.9,抗体滴度越高，自发缓解率越低,Hofstra,JM,et,al.,J,Am,Soc,Nephrol,23,:,1735,1743,2012,合并肾衰病例极少表达较低滴度的抗PLA2R抗体,自发性痊愈的病例极少表达较高滴度的抗PLA2R抗体,结果,抗,PLA2R,抗体,低滴度,抗,PLA2R,抗体,中等滴度,抗,PLA2R,抗体,高滴度,P,值,部分缓解,42%,31%,41%,n.s.,完全缓解,27%,35%,30%,n.s.,肾衰竭,4%,12%,19%,n.s.,持续蛋白尿,27%,23%,11%,n.s.,自发缓解,38%,31%,4%,0,01,需要免疫抑制治疗,48%,54%,88%,-,Hofstra,et,al,J,Am,Soc,Nephrol,23,1735-1743,（,2012,）,抗PLA2R抗体滴度,疾病活动性与病情预测,（3）治疗监测：,成功的免疫抑制治疗,原,发性MN患者可观察到抗PLA2R抗体,滴度的下降，并在复发时抗体滴度再度升高。,抗体滴度在蛋白尿水平升高之前升高，并在蛋白尿水平降低,前降低。,(,Beck,Fervenza,et,al.,2011,Hoxha,Thiele,et,al.,2014,),抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值,抗PLA2R抗体水平可检测病情,Hoxha et al.,J Am Soc Nephrol 25,1-10(2014),CNI,=,钙调神经磷酸抑制酶,Alk,=,烷化剂,RTX,=,利妥昔单抗,3种治疗方案无显著差异,抗PLA2R抗体水平迅速下降，,且先于尿蛋白,（4）风险评估：,40%的,原,发性MN患者在肾移植后会再次复发，尤其是移植,前抗PLA2R抗体阳性的患者复发的风险更高。,(,El-Zoghby,Grande,et,al.,2009,),抗体滴度可以用于评估肾移植后是否进行免疫抑制治,疗或判断治疗剂量，有助于预防肾移植后MN复发。,(,Seitz-Polski,Payre,et,al.,2014,),抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值,抗PLA2R抗体 -风险评估,-,肾移植术后的风险评估,-,原,发性膜性肾小球肾炎的诊断与鉴别诊断,评估疾病活动度和严重程度,辅助临床选择治疗方案,监测疾病,的,治疗效果,预测疾病预后：痊愈/复发（免疫学反应先于临床症状）,肾脏移植患者复发风险评估,抗PLA2R抗体检测的临床意义与应用价值,-抗PLA2R抗体定量检测的优势,主要内容,1、原发性膜性肾病的疾病概况,2、抗PLA2R抗体的临床意义与应用价值,3、抗PLA2R抗体的指标检测性能,标准化ELISA:,-试剂通用性,-温育时间短-30/30/15 min,-半定量检测（ratio or index）或,-定量检测（5 个标准品,2 1500,HEK,PLA,2,R,-transfected,HEK,control-transfected,RU/ml）,transmembrane domain,intracellular tail,Anti-PLA2R,ELISA,（EA 1254-9601 G）,extracellular tail,抗PLA2R抗体检测产品,Anti-PLA2R,RC-IIFT,（FA 1254-xxxx-50）,n,Anti-PLA,2,R,positive,IgG,RC-IFT,Anti-PLA,2,R,positive,IgG,ELISA,PrimaryMN,before treatment,within 8weeks after biopsy,anti-PLA2RRC-IFTpositive,198,198（100%）,190（95.9%）,Other glomerulonephritides,230,0,0,Other autoimmune diseases,315,0,0,Healthy blood donors,291,0,1,Specificity,836,100%,99.9%,抗PLA2R抗体的灵敏度和特异性,抗体滴度会随着疾病活动性而发生波动，甚至可能因取样时发生以下事件,而检测不出：,自发性缓解,成功的,免疫抑制治疗,原,发性膜性肾病并非单一,病因导致,的疾病，,可能,存在多种靶抗原,一些患者可能被误判为,特,发性膜性肾病（实际为继发性）,为什么并非所有的IMN患者均能检出抗PLA2R抗体?,文献,肾内科可以开展的项目,项目名称,标本要求,送检时效,检测方法,临床意义,报告时间,价格,备注,2,微球蛋白（,2m,）,2,微球蛋白（,2m,）,血清,2ml,或尿,2ml2ml,低温送检,7,天,化学发光,用于肾功能的评价和辅助诊断,周一至周日，,2,个工作日,50,尿微量白蛋白（,MAU,）,晨尿,2ml,不加防腐剂不加防腐剂,低温送检,7,天,散射比浊法,糖尿病、高血压、心血管疾病、肾病的病变程度及预后的临床参考,周一至周日，,2,个工作日,25,异常免疫球蛋白电泳,血清,1.5ml,及尿液,1ml,及尿液,1ml,低温送检,7,天,蛋白电泳,辅助诊断多发性骨髓瘤及肾脏损伤程度及类型,周一至周五，,3,个工作日,810/,960,血清游离轻链,、,血清,3ml,或尿,100ml,（不加防腐剂）或尿,100ml,（不加防腐剂）,低温送检,7,天,散射比浊法,辅助诊断多发性骨髓瘤及自身免疫性疾病、感染、肿瘤等,周一至周五，,2,个工作日,490,免疫球蛋白,+,补体,6,项,血清,2ml,低温送检,7,天,免疫比浊法电化学发光法,提示,SLE,、自身免疫性疾病、继发性免疫缺陷等、自身免疫性疾病、继发性免疫缺陷等,周一至周日，,2,个工作日,200,免疫,10,项,血清,2ml,低温送检,7,天,免疫比浊法免疫荧光法,增高提示,SLE,250,抗中性粒细胞包浆抗体（,ANCA,）,血清或血浆,200ll,低温送检,14,天,免疫荧光法,CANCA,见于韦格氏肉芽肿血管炎，,PANCA,见于,C-S,综合征及溃疡性结肠炎见于,C-S,综合征及溃疡性结肠炎,周一至周五，周日，,2,各工作日,60,抗核抗体谱（,11,项）,血清,2ml,低温送检,14,天,主要见于,SLE,，活动期阳性率达,80%-90%,，活动期阳性率达,80%-90%,周一至周五，周日，,2,个工作日,410,抗肾小球基底膜抗体（,GBM,）,血清或血浆,200ll,低温送检,14,天,免疫荧光法,是抗,GBM,抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括,Good-Pasture,综合征，急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎，还见于药物诱导的间质性肾炎抗体型肾小球肾炎特异性抗体，包括,Good-Pasture,综合征，急进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小球肾炎，还见于药物诱导的间质性肾炎,周一至周五，周日，,2,个工作日,50,抗内皮细胞抗体（,AECA,）,血清,2ml,低温送检,5,天,免疫荧光法,主要见于原发性自身免疫性疾病等,周三，,9,个工作日,40,SLE,自身抗体普自身抗体普,血清,2ml,低温送检,14,天,系统性红斑狼疮的辅助诊断,周三，,9,个工作日,450,Thank,you!,