液相色谱柱的选择和方法开发PPT.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2,*,液相色谱柱的选择和方法开发,天津博纳艾杰尔科技,/Agela Technologies,（,US,）,1,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,内容概要,色谱基本概念回顾,色谱柱类型、选择和方法开发,制备液相,混合固定相,-,优化复杂样品分离的一个新策略,如何改善强水溶性化合物的保留和分离,2,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱基本概念回顾,3,2,色谱（,chromatography,）,色谱原理,色谱分类：气相,/,液相和高效液相（,HPLC,）；反相,/,正相,/,离子交换,/HILIC/,混合固定相,色谱功能：分析（种类,/,定量），纯化,液相色谱仪器结构及功能：泵，脱气机，混合器，进样器（阀），色谱柱，柱温箱，检测器（流通池）,4,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,分离度,Rs-Resolution,N Theoretical Plate Number,Selectivity,k Retention Factor,拖尾,5,2,1.Separation of Compounds A and B,6,2,灵敏度,：,Limit of Detection,：,Limit of Quantification,柱效,峰形（拖尾因子）,7,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,重现性,分离度（）,保留时间（，,）,选择性（,）,柱效（）,灵敏度,8,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱柱类型、选择和方法开发,9,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱柱与色谱条件对色谱性能的影响,分离度,-,选择性,键合类型，基质表面特性；,流动相、温度,-,柱效,保留体积，粒径，柱长，基质表面特性；,流动相，温度，上样量，流速,峰对称性,基质表面特性，键合类型，,流动相，温度,保留体积,柱长，孔隙率，比表面积，基质表面特性，键合类型；,流动相，温度,灵敏度,粒径，基质表面特性，键合类型；,流动相，温度,稳定性和重现性,基质表面特性，键合类型；,流动相，温度,流动相,pH,，缓冲盐种类，溶剂；,10,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,影响色谱柱性能的主要因素,1,、,色谱柱的构型,色谱柱内径,色谱柱长度,2,、,固定相柱填料,粒径,比表面积,孔径,孔隙率,基质表面特性：,-,表面活性：硅胶纯度、硅羟基的酸性、均匀性和数量,-,耐碱性,键合类型,-,官能团、是否封尾,-,键合相的保留行为、耐酸性,11,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱柱的构型对色谱柱性能的影响,12,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱柱的构型对色谱柱性能的影响：长度和直径,色谱柱尺寸 对色谱分离的影响：,短柱(15-100,mm)-,运行时间短,柱压低,长柱(150-250,mm)-,分辨率高,运行时间长,窄径柱(,2.1,mm),满足检测器和样品量限制,宽径柱(3-,7.8 mm,)-,载样量高，抗污染，寿命,制备柱,(,内径,10 mm),用于纯化制备,13,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对色谱柱性能的影响,14,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：粒径,硅胶粒径和类型对柱效的影响,d,硅胶粒径和类型对压力的影响,15,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：粒径,II,目前市场主要可供选择的填料粒径,1.7,m,，,1.8,m,，,2.2,m,快速液相色谱柱：匹配快速色谱仪,2.7,m,多孔壳层：在常规液相色谱仪上实现快速分离,(Halo),3.0,m,，,3.5,m,普通快速分析,5.0,m,常规分析,颗粒越小，柱效越高,但是耐污染性能下降，柱压升高.,16,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：比表面积,每克填料的表面积，与粒度，孔径有关,比表面积大，保留增加，载样量增加，平衡时间增加,(,梯度洗脱尤为注意,),根据需要选择合适的比表面积,17,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：孔径,I,多孔材料的,95%,以上表面在孔内部,样品分子直径小于平均孔径，才能进入微粒内部,孔径至少是样品流体学直径的,4,倍,300,孔径用于：超过,50,个氨基酸的肽或,25,个残基的低聚寡核苷酸,样品分子直径小于平均孔径，才能进入微粒内部,18,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：孔径,II,由于小孔径填料比表面积大，小分子的保留值在小孔径填料通常更大,条件：,C8,色谱柱，,4.6150mm,，,3.5um,，,A,溶剂，,0.1%TFA,水溶液；,B,溶剂，,0.1%TFA,于,80%,乙腈,水中；,20min,梯度，,1030%B,；,60C,，,1.5ml/min,19,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：硅胶纯度,I,2.3-,二羟基萘,2.7-,二羟基萘,TF=1.31,Brand W,AQ Column 5,m,4.6mm150mm,Brand Z,C18 Column 5,m,4.6mm150mm,Venusil MP C18 5,m,4.6mm150mm,Brand H,C18 Column 5,m,4.6mm150mm,Brand U,C18 Column 5,m,4.6mm150mm,！,TF=1.42,TF=1.39,TF=1.69,TF=,？,流动相：,甲醇：水,=65,：,35,流速：,1 mL/min,温度：,35,检测波长：,230 nm,进样量：,20 L,硅胶纯度金属含量,20,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,硅胶基质类型及发展史,Type A,：原料来源：水玻璃；高金属含量，高活性，极性化合物容易形成拖尾和死吸附,Type B,：原料来源：有机硅烷（四乙氧基硅烷）水解,/,烧结,/,酸洗,杂化及表面杂化,整体柱,壳层柱,21,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,柱填料对,C18,色谱柱性能的影响：硅胶纯度,II,硅胶纯度金属含量,d,22,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,固定相对色谱柱性能的影响：硅羟基的影响,残余硅羟基的影响,普通硅胶,当流动相的,pH,值大于,4.5-5.0,时，表面的硅羟基会带负电荷，碱性化合物拖尾。,解决方法,封尾,双层表面修饰,表面杂化,23,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,固定相对色谱柱性能的影响：残余硅羟基的影响,封尾,键合填料与小硅烷进行后续反应，如三甲基氯硅烷，反应掉部分残余硅羟基，以增加表面覆盖率,。,缺点：,不能完全反应（仍有,50%,的硅羟基未被反应）,在,pHC3C1,，长链之间差别不大,32,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,反相键合相的保留行为,不同厂家色谱柱的,保留值，选择性与峰型,色谱柱：,4.6*150mm,，流动相：乙腈,0.05M,磷酸钾缓冲液，,pH3.2(65:35);,流速：,1ml/min,，,拖尾峰,T,0,（尿嘧啶）,P:,吡啶,L:,苯酚,N:,N,N-,二甲基苯胺,B:,4-,丁基苯甲酸,J:,甲苯,33,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,固定相对色谱柱性能的影响：,基质表面特性,+,键合类型,键合相的稳定性,键合相的稳定性,低,pH,值，键合相流失,高,pH,值，硅胶溶解,影响色谱柱寿命，方法不重现,34,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,键合类型对键合相稳定性影响,低,pH,值，键合相流失,35,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,键合类型对键合相稳定性影响（,II,）,空间位阻保护，延缓键合相流失,空间位阻键合代表产品：,Venusil ASB C18,Zorbax SB C18,36,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,固定相对色谱柱性能的影响：键合硅胶的稳定性,高,pH,值，硅胶基质溶解,pH9,时，色谱柱的稳定性,37,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,固定相对色谱柱性能的影响：,键合硅胶的稳定性,碳杂化，延硅胶缓高,pH,值水解,表面碳杂化,Agela,Durashell RP,Phenomenex,Gemini,杂化颗粒：,Waters,Xterra,表面碳杂化示意图,38,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,pH=12,条件下的稳定性,4 amines,ACN/1%Ammonia aqueous=25%:75%,40,o,C,4.6 x 150 mm,5um,1h,200 h,39,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,总结：如何选择色谱柱和相应的色谱条件,了解目标化合物的性质：,结构（官能团）、,pKa,、分子量、浓度范围、溶解度、极性,了解色谱柱的性质,粒径，孔径，比表面积,保留强度和柱效；抗污染性,基质表面特性，键合类型,保留强度，选择性，柱效，对称性，灵敏度，稳定性和重现性,选择相应的色谱条件,40,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,色谱柱选择（）,替代：粒径，比表面，基质表面特性，键合类型相似,新方法开发：,粒径：,2um vs 3um vs 5um,（分析时间，灵敏度，仪器，价格，寿命）,内径柱长：内径,3mm vs 4.6 vs 7.8,（对分离影响不大，成本）；柱长与粒径相关,比表面：（低比表面耐污染，高比表面利于分离）,孔径：在满足比表面前提下大孔径较好,硅胶基质表面特性：）尽可能使用高纯硅胶；）尽可能使用低酸性硅胶；）当流动相,尽可能使用表面杂化；）使用多硅羟基残留，可加强对于极性化合物保留或削弱对于非极性化合物保留,键合类型：取决于选择性和流动相要求；具有一定极性的（）可以作为首选尝试；耐酸：选择；耐碱：,Durashell,封尾与不封尾：封尾削弱硅羟基影响；不封尾：提高硅羟基影响，增强极性物质保留，降低柱流失。,41,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,乙腈水,乙腈水,乙腈水,KH2PO4 pH=4.2,42,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,混合固定相,-,优化复杂样品分离的一个新策略,43,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,混合固定相的意义,系统化的改变选择性，便于优化分离度；使难以在同一固定相上分析的强极性和非极性化合物得以解决,降低离子交换柱的保留强度，降低缓冲盐浓度，从而使离子交换柱可以与质谱检测器相匹配,44,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,混合相比例与保留时间曲线,45,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,a,b,c,色谱条件,ACN:50 mM KH2PO4=30:70;1.5ml/min;240 nm;5 um,300 A;4.6,250;,2 ul;Room temp.;,样品：,Phenol and melamine,SCX,Fig.a,SCX:ASB C18=4,：,6,Fig.b,ASB C18,Fig.c,Rt(Phenol)/min,2.232,3.007,3.790,Efficiency,(Phenol)/Plate,5908,8903,11931,Rt(Melamine)/min,7.382,4.748,2.082,Efficiency(melamine)/Plate,13123,10017,6312,46,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,通过混合柱改善分离度,SCX,SCX:ASB C8=9:1(B0014),HPLC conditions,：,ACN:50 mM KH2PO4=30:70;1.5 ml/min;35;,20 uL;Melamine:2 ppm;column,:4.6 250 mm;,47,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,降低缓冲盐浓度（倍）以用于,Sample,Melamine(100ppm),LC Conditions 1,ACN:50 mM KH2PO4=30:70;1.5ml/min;240nm;5ul;5um,300A,4.6,250mm,LC Conditions 2,ACN:10 mM KH2PO4=80:20;1.5ml/min;240nm;5ul;5um,300A,4.6250mm,Fig.a was tested under conditions 1,Fig.b and c were tested under conditions 2,a,b,c,SCX,Fig.a,SCX,Fig.b,SCX:ASB C18,Fig.c,Rt,(Melamine),/min,7.065,26.998,7.577,48,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,SPE procedures,Fig.a,LC Condition,Column:,Venusil AS-T C18 (SCX/C18,）,2.1,150mm;5 um,300,Mobile Phase,：,ACN:Buffer=50:50;,Buffer:10mM NH4Ac,HAc adjust pH to 3.0,240nm,0.2ml/min,10 ul,Mass Condition,ESI,，,5KV;Capillary Temp 300,Capillary Voltage 15V;N2 Flow 35 arb;Positive ion detection,Scan mode:TIC(MS),TIC(MS/MS);,Range(m/z)50140,Condition,3 ml Methanol,Equilibration,3 ml Water,Loading,10 ml Sample,Washing,3 ml Water,Washing,3 ml Methanol,Elution,6 ml 5%NH4OH/Methanol,Concentration,Evaporate by N2.Dissolve with 1 ml mobile phase,LC-MS,a,49,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,标准曲线,Precision:RSD=2.83%,(n=5),Reproducibility,：,RSD=4.45%,(n=5),LOD:0.002ug/mL,LOQ:0.01ug/mL,Recovery:89.7%,RSD=7.3%,(n=9),50,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,空白样品,51,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,三聚氰胺标准品,52,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,三聚氰胺添加样品,53,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,如何改善强水溶性化合物的保留和分离,54,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,改进水溶性化合物的保留和分离,使用极性反相色谱柱，高水相流动相；调整,pH,值抑制分析物的离子化。,使用离子对试剂，选择低比表面、短链键合相,使用,HILIC,分离技术,使用离子交换,/,反相混合固定相,55,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,56,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,57,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,2,，,-0-,甲基,-,腺嘌呤核苷,HPLC,方法,RT,样品峰,=18.902min RT,主杂质峰,=21.024min,主峰与后杂峰,（,RT=20.634min,）的分离度,R=7.81,主峰后杂峰（,RT=20.634min,）与主要杂质的分离度,R=1.70,色谱柱：,MP C18 5um 100,4.6*250mm,;,波 长：,260nm,;,柱 温：,30,;,流 速：,1.0mL/min,流动相：流动相,A,：,0.63g,甲酸铵溶解于,900ml,水中，并用甲酸调,PH=3.00,，再加水使溶液为,1L,过滤即得；,流动相,B,：乙腈,样 品：流动相,A,溶解，待分离样品,1mg/mL,；进 样：,5ul,梯度表：,时间（,min,）,A(%),B(%),0,100,0,20,90,10,35,90,10,35,100,0,45,100,0,58,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,阿奇霉素有关物质检测,空白,药典方法,样品，,100%,水,59,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,次黄嘌呤有关物质分析,色谱柱：,MP C18 5um 100 4.6*250mm,流动相：,0.1%,磷酸氢二钠溶液（磷酸调节,pH,值至,7.50,）,流 速：,1.0ml/min,柱 温：室温,波 长：,254nm,样 品：样品,2.0mg/ml,（水溶解），对照品,0.2408mg/ml,（客户原液）,进 样：,5ul,60,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Venusil HILIC(,丙酰胺键合相）,61,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,键合相，原理和目的,丙酰胺键合硅胶,已腈水流动相中主要依靠氢键合和电子极化作用，对于多羟基，多氨基，酰胺类和有机酸有很好的保留和分离,在弱极性流动相中，对于极性化合物的保留与相似或略低，有利于极性化合物的洗脱,水溶液中稳定性明显优于氨基柱或纯硅胶柱,62,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,正相条件下与氨基柱比较,Test in Traditional Normal Phase Mode,Columns:,5um,4.6 x 150 mm,Mobile phase,:Chloroethane/methanol/water=91.8:8:0.2,Sample,:Toluene,Nitrobenzene,4-Bromoaniline acetate,3-nitroaniline,Unisol Amide,less polar,Venusil NH,2,63,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,分离模式,N-aceto uracil,uracil,Column,:,Venusil Silica,5um,4.6 x150 mm,Mobile Phase,:10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN=35/65,Temperature,:ambient,Detection,:UV 254 nm,64,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,分离模式,N-aceto uracil,uracil,Column,:,Venusil HILIC,5um,4.6 x150 mm,Mobile Phase,:10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN=35/65,Temperature,:ambient,Detection,:UV 254 nm,65,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Venusil HILIC(,丙酰胺固定相）,N-aceto uracil,Ganciclovir,Ganciclovir,Column,:,Venusil Hilic,5um,4.6 x150 mm,Mobile Phase,:10 mmol sodium phosphate(pH7.0)/ACN=35/65,Temperature,:ambient,Detection,:UV 254 nm,66,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,水溶性维生素分离,Time,Samples:VB1,VB6,VC,VB2,HPLC Conditions,Column:Venusil HILIC 4.6 x 150 mm,5um,Mobile Phase,：,0.1%TFA:ACN,=90:10,Det:280nm;Flow:1.0mL/min;Temp:30,；,Inj:,2 L,67,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Column,5m,4.6mm150mm,Part No.:,951505-0,Brand P,NH2 Column,5m,4.6150mm,Brand W Silica Column,5m,4.6150mm,Mobile Phase:,A:0.1%TFA in Water,；,B,:,0.1%TFA in Acetonitrile,A:B=90:10,Flow Rate:,1 mL/min,Temperature:,30,Detection:,UV280 nm,Sample:,VB1+VB6+VC+VB2,选择性比较,VB1+VB6+VC+VB2,VC+VB6+VB1+VB2,VB1+VB6+VB2+VC,68,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,稳定性比较,(aging:pH=7,20 mM phosphate buffer/MeOH=40/60;100h),100h,Venusil HILIC,silica,VB1,VB2,VB1,VC,VB2,VB1,VC,VB6,VB2,VB1,VB2,VB6,VB1,VB2,VB1,VB2,35 h,100h,NH2,69,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Decitabine and Impurity Analysis,Venusil HILIC 4.6150mm,，,5m,，,ACN,：,H2O,964,，,1ml/min,，,UV244nm,，,room temp.,70,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Analysis of Acarbose and Impurity,ACN:KH2PO4(4.4 mmol/L)-Na2HPO4(2.0 mmol/L)=70:30;1.5 ml/min;35;210 nm;,Venusil HILIC,，,5 um,，,100,，,4.6 150 mm,71,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Separation of Shikimic Acid,(3,4,5,trihydroxy-1-cyclohexene-1-carboxylic acid,Venusil HILIC 4.6 x 250 mm,5um;ACN/1%formic acid 90-60%in 20 min,ambient temperature,1mL/min,UV210 nm,72,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Comparison:Validamycin,Atlantis-C18(AQ),4.6 x 250 mm,TFA 1%,Venusil HILIC,4.6 x 250 mm,ACN/water 85-40%in 30 min,UV 210nm,73,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,博纳艾杰尔科技及其产品介绍,汪群杰,74,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Who is,A,merica,-,gel,-,A,sia,Technologies?,2004,成立于美国特拉华州，开发和生产液相色谱填料和色谱柱,2005,年成立北京艾杰尔科技有限公司，负责艾杰尔科技产品的中国和亚洲市场开发,2007,年在天津滨海新区成立博纳艾杰尔科技有限公司，投资近,2000,万，建立,中国最大色谱分离材料研发和生产基地；产品扩充到,5,大类，上千个规格,2008,销售额,3400,万；,2009,年目标,5000,万；,75,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,核心业务,分离材料,固相萃取,色谱纯化,GPC,HPLC,分析,生物分离,手性分离,解决方案,固相萃取和色谱,分离纯化设备,76,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,创新成就梦想,!,全球最大色谱柱研发团队之一：归国博士,4,名；硕士,12,名，本科,11,名,开发色谱相关设备和材料,5,大类（液相色谱柱、固相萃取柱、快速纯化柱、全自动制备色谱仪、固相萃取仪），近百个系列，上千个规格的商业化产品；申报专利,11,个（其中,2,个已获授权）,2006,年,10,月成功主标科技部十一五重大支撑项目,项目中的课题四,“,高性能色谱填料和色谱柱的研制,”,；,成功参标科技部十一五重大项目,科研试剂,项目中,“,固相萃取材料的研制与开发,”,入围天津市,2009,年,15,个自主创新重大专项,基质厂家,键合厂家,填装厂家,销售公司,我们在这儿！,77,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,不断完善的质量保证体系,充分的技术投入以打造坚实的技术基础,质量方针：质量第一、全员参与；满足客户，不断进取,全方位质量控制体系：研发、原材料供应、生产工艺、质量检验、跟踪,/,反馈,2007,年,10,月成功获得,ISO9001,质量认证,-2007,年分别通过美国第一大和 第二大集成供货商,THERMO Fisher,和,VWR,公司的现场考核,78,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,全球一体化的研发、生产、销售和服务,公司分布：,Newark,Delaware,USA,：研发和销售中心,天津,：,2600m,2,研发、生产和物流中心,国内办事处：,北京、上海、广州、杭州、南京、济南、郑州、沈阳,全球销售渠道和客户：,-,26,代理商遍布全球五大洲，包括美国、加拿大、日本、法国、德国、印度、韩国、泰国、巴西、南非等。,-VWR,（全球第二大实验室设备和耗材供应商）的,6,大色谱产品供应商之一,-,全球客户包括著名仪器厂家,Thermo,；著名制药企业 默克（默沙东）、莉莱、,Amgen,、,Sanofi,、,Shering-Plough,；著名制药技术服务公司 考文斯、,XenoBiotek,、,QPS,、,Frontage Labs,。,79,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,80,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,客户评价,Merck,“,the ASB,C18,column outperformed any other column I could get my hands on and I was able to handle the hundreds of COMT compounds I was presented with.,”,McClain,Ray T.,Ph.D,Merck&Co.,Inc,Friday,March 20,2009,81,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,客户评价,Covance,“,I tested for my compound and found a better Sensitivity for ASB C18 column than regular luna C18 2.150 mm,5um.,”,Xiaorong Liang,Ph.D,Staff Scientist,Covance Laboratories Inc.,Thu,Mar 19,2009,82,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,从样品前处理到分析、制备的全线产品,83,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,中压制备系统及制备柱,CHEETAH,FS-1,84,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,2010,年即将建成的研发生产基地,85,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,博纳艾杰尔色谱柱关键技术和系列产品介绍,86,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,关键技术,硅胶基质制备和表面改性技术,：,-UNISOL,硅羟基取活技术,-,表面杂化技术,键合技术和独特固定相,：,-,成熟可控的横向交联键合工艺，大位阻硅烷键合工艺，混合键合工艺，手性柱表面涂敷工艺,-MP-C18,；,ASB,系列；,Durashell,系列；丙酰胺（,Venusil HILIC,）；,XBP-C18,（,2,）；手性柱,色谱柱装填技术,：,-,各类固定相（反相、正相、离子交换）；尺寸（,2.1x30-50 x300mm,）,-,混合固定相装填技术,87,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,主要色谱柱产品,尺寸规格：,快速分析柱、分析柱、制备柱,固定相,-,反相,-,正相,-HILIC,系列,-,离子交换,-,混合固定相（,Optimix,）,-,体积排阻,-,高聚物,88,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,与多层结构相关的新型固定相,Unisol C18,:,Venusil ASB C18,Unisol Amide,:,Durashell RP,89,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Agela Unisol C18,具有高度适用性的反相色谱柱,极性化合物保持良好的对称峰形,LC-MS,极高的灵敏度,显著增强的对极性化合物的保留和分离能力,100%,水流动相兼容,对生物基质的耐受性,宽,pH,范围,(1.5-9.0),90,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,碱性化合物优良的对称峰形,1.Uracil,2.Pyridine,3.Butylparaben,4.Naphthalene,5.Acenaphthene,6.Amitriptyline,Column:Unisol C18,4.6 x 150 mm,5u,Mobile phase,：,MeOH,：,NaH2PO4/Na2H PO4,（,PH 7.0,）,=70,：,30,Temp.,：,30,Detection,：,254 nm,Injection,：,10 L,TF=1.09,Plate=12046,91,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,对极性化合物显著增强的保留和分离能力,92,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Fresh Column;Plates:,3224,After column washing and re-equilibrium in 100%water(0.1%formic acid);Plates:,3045,After 500 sample injections;Plates:,2810,Sample,:uridine of calf blood plasm(dilute 20 times with 0.1%formic acid),Injection,:1uL,Column,:Unisol C18 2.150mm,5m,Flow,:0.3mL/min,Mobile phase,:0.1%formic acid solution(100%aqueous phase),Injection frequency,：,500/8min,After 500 injection,wash with methanol/0.1%formic acid solution=50/50 for 30mins,，,column temperature 40,;rinse with 95%MeOH for 30mins,column temperature 45,良好的生物基质耐受性,93,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Venusil ASB-C18,极性,C18,pH,范围,0.8-7.0(pH=1,100,o,C,下仍稳定,),无封尾,C18,150 A,200 m2/g,(compared to Zorbax 80A,180m2/g),硅羟基,pH=5.2,(compared to Zorbax pH=3.5),100%,水流动相兼容,(compared to Zobax SB,non-compatible),LC-MS,高灵敏度,:,比多数,C18,固定相高,2-3,倍,(low bleed,inert surface and high efficiency),94,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,碱性化合物显著改善的峰形,Test conditions:,Column dimension:4.6 mm x 150mm,Sample:doxepin,nortriptyline,trimipramine amitriptyline,Mobile phase:Acetonitrile/0.01M sodium phosphate(pH=6)=70/30,Temperature:30 oC,Flow:1 mL/min,Detection:UV 254 nm,Brand A C18(non-endcapped,),C18(non-endcapped,twin-layer,95,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Agela Venusil ASB C18,2.150mm,5m,Aglent Zorbax XDB C18,2.150mm,5m,Phenomenex Luna C18,2.050mm,5m,LC-MS,灵敏度比较,0.01 ng/mL,伪麻黄碱,Best S/N:,X2-3 sensitivity comparing to other columns,96,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Unisol Amide-,一种新型 亲水正相色谱柱,硅胶基质的新型酰胺键合色谱柱：,1-,对水溶性化合物更强的保留和分离能力,2-,比硅胶柱和氨基柱具有更好的稳定性,97,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,Durashell RP,独特的键合结构,pH,范围,1-12,良好的表面惰性,超高载样量,98,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,pH=10,Durashell RP 5um,4.6 x 150 mm,Methanol:aqueous ammonia,（,pH=10,）,=65:35;,1.0 ml/min;254 nm;30;5 uL,1-Uracil,2-Pyridine,3-Paraben,4-Propanolol,5-Naphthalene,6-Acenaphthene,7-Amitriptyline,99,幻灯片制作：WSY18,2025/7/13 周日,