血管内皮生长因子(VEGF)对皮肤癌发生与发展的调控ppt课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,基 因 的 研 究 进 展,2,3,1,赵鑫 文益阳 刘庆茹,何秋瑜 陈丽丽 韩燕燕,11,级研究,生一班,专业：病理学与病理,生理学,血管内皮生长因子,(VEGF),对皮肤癌发生与发展的调控,在人类皮肤癌中，鳞状细胞癌的发病率居第二位，世界上每年有500,000人发病。,DMBA/TPA（二羟甲基丁酸/对苯二甲酸）化学诱导小鼠皮肤癌，小鼠的鳞状细胞癌和人类极其相似。,肿瘤的生长过程中，VEGF能够促进血管内皮细胞增殖从而增加肿瘤的血管密度，促进肿瘤生长。,由于血管生成在皮肤鳞状细胞癌的发生发展有重要影响，由此推断，VEGF对皮肤癌的生长也有重要的促进作用。,VEGF,血管生成 皮肤癌,很多肿瘤生长过程中，血管微环境能够影响肿瘤干细胞（,CSC,）的功能。但是,VEGF,是否能够直接影响CSC的增殖，尚未有明确结论。,VEGF,血管生成,CSC,一.皮肤癌血管微环境中是,否存在,CSCs,？,在脑肿瘤中，血管微环境中存在,CSC,并能影响其功能，但皮肤癌血管微环境中是否存在,CSC,尚不明确。,皮肤癌中的肿瘤上皮细胞（,TEC,）具有克隆性增殖潜能，并且,TEC,移植到免疫缺陷的小鼠后可形成肿瘤，因此可以推断,TEC,即为CSCs,。,为确定皮肤癌血管微环境是否存在CSCs，进一步通过免疫组织化学染色研究：,三种,CSC markers:CD34,+,、,Hmga,免疫,TEC markers:K5,、,K14,染色,EC markers:endoglin,、,CD31,CSC:肿瘤干细胞 TEC:肿瘤上皮细胞 EC：血管内皮细胞,皮肤癌的,TEC,可以显示,CSC,的,markers,CD34,+,但内皮细胞没有显示CSC的,markers,CD34,+,因此可以排除内皮细胞的影响，证明,TEC即为皮肤癌里的CSC,血管微环境中存在CSC。,二.VEGF对CSC的影响,以上实验已证明小鼠皮肤癌血管微环境,中存在CSC，并且现已知VEGF对血管,微环境的形成有重要影响，但VEGF对,CSC是否有直接影响尚未证实。,（一）,DC101,封闭性阻断,VEGFR2,（二）皮肤癌小鼠模型里敲除,Vegfa,基因,（三）皮肤癌小鼠模型里过表达,VEGF,（一）,DC101,封闭性阻断,VEGFR2,通过,qRT-PCR,、免疫荧光可以证明：,VEGFR2,存在于血管内皮细胞。,welcome to use these PowerPoint templates,New Content design,10 years experience,DC101是VEGFR2的封闭性抗体，强烈抑制肿瘤血管再生，DC101作用于皮肤癌小鼠模型，可见内皮细胞增殖显著减少、肿瘤血管密度明显降低，CSCs的比例降低。,VEGF,阻断 血管生成 减少,CSC,比 例降低,阻断VEGF能通过减少血管生成使,CSCs,比例降低，但是,VEGF,是否能直接影响,CSCs,的某些基因的表达来直接调控其增殖尚需进一步证实。,VEGF,CSC,？,qRT-PCR,表明,VEGFa,在,CD34,+,CSCs,中的表达高于正常上皮细胞和,CD34,-,CSCs,。,（二）皮肤癌小鼠模型里敲除,Vegfa,基因,为了探究,CSCs,分泌的,VEGF,是否调控皮肤,CSCs,的自我更新和分化，维持肿瘤的生长，该实验在已经建立皮肤癌的小鼠模型中敲除,Vegfa,基因，用抗癌药三苯氧胺处理一周后，大多数肿瘤已经萎缩到原来的,60%,两周后大多数肿瘤完全消失。,在癌症的治疗的过程中，单纯的血管增生抑制剂并不能使已经建立的肿瘤完全消失，而上述实验中肿瘤完全消失，表明：,Vegfa,可以通过除促进血管增生以外的因素影响肿瘤生长。,Vegfa,基因的缺失导致,TECs（即CSCs）显著减少，,可以推断：,VEGF对皮肤癌的,CSCs存在一定影响。,从,CSCs,对称性细胞分裂与非对称性分裂来分析这种假设是否成立，对称性细胞分裂代表细胞正在进行自我更新，非对称性分裂表明肿瘤细胞的分化。,在肿瘤生长的过程中，大约,40%,的,TEC,处于对称性分裂（自我更新的状态）。但是在敲除,VEGFa,的小鼠皮肤癌模型里，处于增殖的,TEC,比例大幅度降低。因此,VEGF,对皮肤,CSCs,的增殖和自我更新有重要影响。,（三）皮肤癌小鼠模型里过表达,Vegfa,在已经建立皮肤癌的小鼠模型里，特异性使,TEC,内,Vegfa,基因过表达，来研究,VEGF,的增加是否增加,CSCs,的自我更新能力。,Vegfa,基因过表达后，可见,CSCs,大量增殖，对称性细胞分裂的,CSC,比例增加。,结果表明：,VEGF,可以通过增加CSC的自我更新，促进血管内皮细胞的增殖和血管密度的增加促进肿瘤的生长。,VEGF,改变,CSCs,的自我更新和分化能力以及其分子机制，我们从基因水平研究获得：,1,、,regulate stemness:Sox,、,Hmga,2,、,proliferation:Ccnd1,、,Ccng1,3,、通过血管微环境调控肿瘤细胞之,Genes,间的相互作用：,Col1,、,Col3a1,4,、鳞状细胞癌中表达的基因：,Krt13,、,Ano1,在,Vegfa,基因过表达的皮肤癌小鼠模型中，很多基因表达增加，通过,qRT-PCR,、流式细胞仪分析、免疫荧光染色三种方法分析，大约,50%,的基因表达上调是由于,Vegfa,基因的过表达。因此，,VEGF,在转录水平影响相关基因以调控,CSCs,的自我更新和分化能力。,结论,1.VEGF可以通过促进内皮细胞增殖和血管再生促进肿瘤生长。,2.VEGF可以通过直接调控CSCs的,某些基因的转录促进肿瘤生长。,Thank you!,资料可以编辑修改使用,学习愉快！,课件仅供参考哦，,实际情况要实际分析哈！,感谢您的观看,