DB62∕T 2692-2021 羊传染性胸膜肺炎防治技术规范(甘肃省).pdf

ICS 65.020. 30 CCS B 41 0062 甘肃省由巳ETA 万标准D862/T 2692-2021 代替DB62/T2692-2016 羊传染性胸膜肺炎防治技术规范Technical specifications for prevention and treatment of ovinecontagious pleuropneumonia 2021一 08 一04发布2021一09一04实施甘肃省市场监督管理局发布0862/T 2692-2021 目IJl I I 1 l 1 l 斗在走凶i西0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0.02 0. 02 0.02 0.02 图C.l羊传染性胸膜肺炎代谢仰制试验操作方法G. 3 步骤以pH值下降0.5单位以内的最高血清稀释倍数为抑制的判定依据。7 0862/T 2692-2021 o. 1 试剂o. 1. 1 磷酸缓冲液(PBS);附录D(规范性)直接免疫荧光抗体试验o. 1. 2 标准抗羊传染性胸膜肺炎的荧光抗体。0.2器材0.2. 1 荧光显微镜。o. 2. 2 载玻片。o. 2. 3 盖玻片。0.2.4恒温箱。0.3 步骤0.3. 1 样品制备取长好单个菌落的琼脂平皿培养物，加入约5mL的PBS，置室温0元，吸弃PBS，再用铲刀切取琼脂培养物，置于载玻片。O. 3. 2染色将稀释至工作浓度的荧光抗体，1商加在待检标本面上，室温恒湿染色列mln，取PBS轻洗琼脂表面数次，荧光显微镜观察。同法用荧光抗体滴加阳性及阴性标本面，染色观察。0.4判定标准被检标本的细菌结构完整清晰，并在阳性、阴性对照均成立时判定。在菌体中见到J特异黄绿色荧光者判为阳性;如果所有菌体中无特异性荧光者判为阴性。8 0862/T 2692-2021 E. 1 操作步骤附录E(规范性)PCR试验对所有样品同时用丝状支原体簇通用引物和绵芋肺炎支原体特异引物进行检测，每次检测均设相应的阳性对照和阴性对照。丝状支原体簇通用引物用来检测Mccp和Mrnc，退火品度为620C，目的条带为548bpoMmF 5 -CGAAAGCGGCTTACTGGCTTGT-3 MmR 5 -TTGAGATTAGCTCCCCTTCACAG-3 绵羊肺炎支原体特异引物月束检测Movi，退:.k温度为5 50C，目的条带为361bpoLmF 5-TGAACGGAATATGTTAGCTT-3 LmR 5-GACTTCATCCTGCACTCTGT-3电反应体系(25), Qxtaqmix 12.5， ddH208， 25出4的上下游引物各l1，DNA模板2.5L反应条件，950C变性4min;940C30s, 620C (或550C)30s, 720C 45s，共33个循环720C延伸lOmin，PCR产物40C保存。E. 2 结果判定PCR产物经1%的琼脂糖凝胶电泳，在对照成立的前提下，被检样品出现548bp(或361bp)大小的单一条带，判定为阳性。9 0862/T 2692-2021 F. 1 中药验方l附录F(规范性)中药验方黄苓150g、前胡150g、麦冬150g、白苟150g、黄柏150g、板蓝根200g、紫范150g、神曲250g、板子150g、柴胡150g、杏仁150g、山植250g、连翘150g、荆芥150g、化情红150g、麦芽250g、金银花150g、积壳150g、瓜萎150g、甘草50g，适量水煎2次，或其研细末兑水给汕头羊群灌服，1剂/d，分2次灌服，连用3d4do F.2 中药验方2荆芥250g、薄荷280g、连翘400g、银花550g、w植180g、神曲340g、黄苓280g、芦根360g、桔梗320g、甘草220g，适量水煎2次，或其研细末兑水给20头羊群灌服，1JTV/d，分2次灌服，连用2doF.3 中药验方3重楼100g、金银花200g、黄柏200g、黄连2g、瓜萎100g、野京豆2g、甘草100g，研成细末兑水给汕头羊群灌服，1JTV/d，分2次灌服，连用5d7do10