中药生产工艺论文.doc

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药学生产工艺技术论文
——大枣中多糖的提取与分离工艺研究进展
姓名：崔晓凤
学院：化学化工学院
专业：制药工程
学号：09233039
大枣, 又名华枣、红枣, 系鼠李科(枣属植物)枣的干燥成熟果实[1]。大枣早在5神农本
草6 和5本草纲目6 中就有记载, 其味甘、性温, 有补脾胃、益气生精、调和诸药的功能。现代临床医学研究证实大枣具有抗变态反应、中枢神经抑制作用, 保肝、增强肌力及抑制癌细胞的增殖等作用, 对治疗肝炎、降血压、医治毒疮、补血、健脑、抗癌和健脾强身具有特殊的效果[ 2]。大枣起源于中国，在中国已有四千多年的种植历史，自古以来就被列为“五果”（桃、李、梅、杏、枣）之一。红枣富含蛋白质、脂肪、糖类、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、维生素P以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。其中维生素C的含量在果品中名列前茅，有维生素王之美称。
大枣多糖是大枣中重要的生物活性物质,可作为免疫促进剂, 能控制细胞的分裂和分化,调节细胞的生长和衰老。经检测, 大枣多糖具有明显的抗补体活性和促进淋巴细胞增殖作用, 对提高肌体免疫力具有重要的作用。可广泛应用于医药、保健品及功能食品, 作为绿色生物医药产品具有广阔的市场前景。文中对陕北清涧滩枣的多糖提取工艺进行了研究, 初步探讨出一条较为简便的生产工艺, 为其工业化生产提供参考[3]。
多糖的提取方法有: 酸溶液提取法、碱溶液提取法、热水浸提法。但是酸碱提取有可能会破坏多糖的结构, 本研究选择热水浸提法提取大枣多糖, 首次将提取、分离大枣粗多糖的完整工艺为研究对象, 为新疆次级大枣的多糖的加工生产提供了可参数据。
大枣多糖的提取工艺流程：样品处理--水浸提--抽滤除渣--减压浓缩--乙醇沉淀多糖--冷冻干燥--大枣粗多糖--脱脂--挥干有机溶剂--复溶--脱蛋白--离心分离--脱色--乙醇沉淀多糖--冷冻干燥--精制多糖。
ａ分析方法
多糖含量的测定采用硫酸- 苯酚法[4] 。
多糖提取率(%) = 提取液中多糖的含量P大枣干物质质量@ 100%
　多糖的提取工艺：
①水提法　　用水作溶剂来提取多糖是最常用的方法之一,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提。
②酸提法　　有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。
③碱提法　　与酸提类似,有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
④超声提取法　超声波作为一种先进的提取方法,具有提取时间短、能耗低、效率高等特点,在生产中得到了广泛的应用。其主要原理就是超声波产生“空化作用”,这种空化作用能够产生局部的高温高压,并形成强大的冲击波或高速射流,这种强大的高速射流能够有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率
⑤微波提取　　对微波技术的应用,近年来得到很大发展．微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部,由于溶剂及细胞液吸收微波能,细胞内部温度升高,压力增大,当压力超过细胞壁的承受能力时,细胞壁破裂,位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来,传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。
⑥超滤法　　膜分离技术被公认为现代分离技术领域中最先进的技术之一,已广泛应用于化工、电子、环保、医药等领域
ｂ标准曲线的制作
精密称取105e 干燥至恒重的葡萄糖标准品1. 25g , 配置成浓度为100LgPml 的葡萄糖标准溶液分别量取标准溶液1、2、3、4、5、6、7ml 标准溶液, 置于10ml 容量瓶中, 用蒸馏水定容至刻度, 配制成浓度为0. 01mgPml、0. 02mgPml、0. 03mgPml、0. 04mgPml、0. 05mgPml、0. 06mgPml、0. 07mgPml 的系列标准溶液。分别精密移取1ml 系列标准溶液于比色管中, 依次加入1ml 苯酚,5ml 硫酸, 封管, 40e 水浴25min, 490nm 比色测定。以光吸收值为纵坐标, 葡萄糖浓度为横坐标, 绘制标准曲线。
ｃ大枣多糖的理化性质分析[5- 7] 观察大枣粗多糖的颜色、气味和在水、乙醇、甲醇、丙酮等溶剂中的溶解特性。用适量的双蒸水制成多糖样液后, 运用Molish 反应、硫酸) 苯酚颜色反应、蒽酮) 硫酸试剂反应等检测多糖的化学性质。
ｄ大枣多糖提取工艺的优化[ 8- 11] 首先确定提取次数, 再选取不同的液固比、提取时间和浸提温度作为影响大枣多糖提取率的研究对象, 首先对每个影响因素进行单因素实验, 在单因素试验的基础上进行正交实验, 确定大枣多糖提取的最佳工艺参数。
ｅ大枣多糖分离条件的选择[ 12] 将由确定的工艺参数所提取的大枣多糖提取液, 以不同的浓缩倍数和乙醇体积以及醇沉时间设计单因素试验, 测定多糖含量, 确定大枣多糖的最佳的分离工艺。
多糖的分离和纯化 ：
　①分级沉淀法　分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质,从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀. 盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。常用的盐析剂有氯化钠、氯化钾、硫酸铵等,以硫酸铵最佳。金属络合物法是利用多糖能与铜、钡、钙、铅离子形成络合物而沉淀。常用的络合剂有斐林试剂、氯化铜、氢氧化钡和醋酸铅等。季胺氢氧化物是一类乳化剂,与酸性多糖形成不溶性化合物,常用于分离酸性多糖。一般地说,酸性强或相对分子质量大的多糖首先沉淀出来,所以控制季胺盐的浓度能分离各种不同的酸性多糖。安络小皮伞粗多糖的纯化方法,在多糖溶液中加入不同浓度乙醇溶液,得到多个多糖;天门冬冷水浸提物采用丙酮分级沉淀法得到3种多糖。 
　②柱层析法　凝胶柱层析法常用的凝胶有葡聚糖凝胶和琼脂糖凝胶( Sepharose) ,以不浓度的盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂,从而使不同大小的多糖分子得到分离纯化,但不适宜粘多糖的分离。一般生药提取物得以分离多用Sepharose、DEAE—Toyopearl、Sephacryl、Sepha2dex精致得到各种多糖。
③其他方法　　透析、超滤及超速离心选用不同规格的超滤膜和透析袋进行超滤和透析以及一定条件下的超速离心操作,可按分子大小将多糖样品分级,超滤和透析更常用于除去小分子物质。区带电泳主要按多糖的电荷性质不同分级,常用的有聚丙烯酰胺凝胶电泳,乙酸纤维素薄膜电泳。
经过一系列的反应可以得出红枣多糖的理化性质：粗多糖干品呈现淡黄色, 无味, 易溶于热水, 但不溶于无水乙醇、苯、甲醇、丙酮、乙醚、乙酸乙酯等有机溶剂。红枣多糖, Molish 反应、苯酚- 硫酸反应、蒽酮- 硫酸反应呈阳性, 说明样品具有糖类化合物的特征。Fehling 试剂反应水解前阴性, 加酸水解后阳性, 说明粗多糖中有还原糖的存在。碘- 碘化钾反应呈阴性, 说明不含有淀粉多糖。水提醇沉物溶解液, 双缩脲反应, 有紫玫瑰色的絮状沉淀物出现, 说明水提醇沉物中含有蛋白质, 需除去蛋白质。
分离过程中影响大枣多糖得率的3个主要因素: 浓缩倍数、乙醇体积以及醇的沉淀时间进行了单因素试验, 确立了大枣多糖的最佳分离工艺条件: 浓缩8倍, 加入4倍无水乙醇, 于4 e 醇沉12h。
多糖广泛地存在于动物细胞膜、植物和微生物细胞壁中,植物中更是广泛的含有多糖,而中药大部分都是植物药,有不少中药中的多糖成分的药理作用都是其重要的主要功效之一。很早以前,人们就采用一些含多糖丰富的植物治疗各种疾病. 近二十多年来,随着分子生物学的发展,人们逐渐认识到糖及复合物分子具有极其重要的生物功能。因此,多糖的提取和分离技术的研究和发展就显得尤为重要

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