红细胞计数检验PPT参考课件.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,第二章,/,第一节红细胞检查,1,2,3,4,正常情况下，红细胞生成与破坏保持动态平衡，血液中红细胞,数量,保持在相对恒定的范围。,血液中红细胞数量可 通过红细胞计数获得,5,红细胞计数,（,red blood cell count,RBC,）,测定单位体积血液中红细胞的数量,诊断贫血及红细胞增多的指标之一,红细胞计数的方法,显微镜计数法,血液分析仪法,6,显微镜计数法（重点）,用等渗液稀释血液后，滴入血细胞计数板，计数一定范围内的红细胞，经换算得每升血液中的红细胞数。,检测原理,RBC,未排除,白细胞数量影响,7,10ul,末梢血或,EDTA,抗凝静脉血,加入,2ml,等渗液中，混匀,混悬液充入,改良牛鲍计数板,高倍镜下计数中央大方格的四角及中央五个中方格内的红细胞总数,A,。,换算？,操作,RBC/L=,（,A/5)251010,6,200,=(A/100)10,12,8,Neubauer,计数盘,9,血液分析仪法,采用电阻抗法或激光检测法,10,方法学评价,方法,优点,缺点,适用范围,显微镜计数法,传统方法，设备简单，廉价,费时费力，精密度低,参考方法；分析仪异常结果复核,血液分析仪法,操作便捷，,易于标准化，精密度高,价贵；环境要求较高,健康人群普查；大批量标本筛检,11,质量保证（显微镜法）,技术误差,仪器误差,分布误差,显微镜法红细胞计数误差来源有三个,12,稀释倍数不当,2,血液凝固,4,采血部位不当,3,1,充液不当,3,3,技术误差,13,参考值,成年男性,：（,4.09,5.74,）,10,12,/L,成年女性：（,3.68,5.13,）,10,12,/L,新生儿：（,5.2,6.4,）,10,12,/L,婴儿：（,4.0,4.3,）,10,12,/L,儿童：（,4.0,4.5,）,10,12,/L,RBC,存在年龄,与性别的差异,14,临床意义,RBC,参考值上限，,RBC,增多,RBC,参考值下限，即贫血,生理性变化,病理性变化,15,生理性增多,生理性缺氧引起,16,6,个月,-2,岁婴儿,17,相对性增多,：见于呕吐、高热等引起暂时性血液浓缩。,通过补液，血容量恢复正常，红细胞增多即消失。,绝对性增多,：,继发性增多，由,EPO,代偿性,或,非代偿性增高,引起。,原发性增多，红细胞系统异常增殖性疾病。,病理性增多,18,19,20,病理性减少（贫血）,3,1,3,2,3,3,生成减少,破坏过多,血管丢失,贫血：红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考值下限。,病因学分类,21,红细胞生成减少,骨髓造血功能减退或衰竭：再生障碍性贫血。,造血物质缺乏或利用障碍：肾性贫血、缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血。,22,细胞内在缺陷（遗传性缺陷）,膜缺陷、酶缺陷、血红蛋白异常致红细胞寿命缩短。,细胞外在异常（获得性因素）,免疫性因素：输血血型不合、新生儿溶血病等。,非免疫性因素：机械损伤、化学物理因素、寄生虫及脾亢等,。,红细胞破坏过多,23,血液丢失：,急、慢性失血性贫血,24,外伤引发的出血,25,血红蛋白（,hemoglobin,，,Hb,）,在有核红及网织红内合成,是红细胞胞浆内的呼吸载体蛋白,Hb,在成熟红细胞内分布特点（近胞膜处多，中心部少）决定了红细胞的双凹圆盘形状,合成速度受促红细胞生成素（,EPO,）与雄激素调节,26,Hb,（四聚体）,珠蛋白,血红素,2,条,链,2,条非,链,原,卟啉,铁原子,血红蛋白组成,27,28,29,血液中血红蛋白的存在形式,存在形式 所占比例,还原血红蛋白（,Fe2+,）,正常成人,99%,氧合血红蛋白,碳氧血红蛋白,硫化血红蛋白,高铁血红蛋白（,Fe3+,）,1%,Hb,测定即测定血液中,各种血红蛋白,的总浓度。,30,血液的物理特性：比重法，折射仪法,Hb,的分子组成：全血铁法,Hb,与,O,2,可逆性结合：血气分析法,Hb,衍生物光谱特点：,HiCN,，,SDS-Hb,等,检测原理,31,HiCN,法检测原理,红细胞被溶血剂破坏后，高铁氰化钾可将各种血红蛋白（,SHb,除外）氧化为高铁血红蛋白（,Hi,），后者与试剂中的,CN,-,结合生成棕红色的氰化高铁血红蛋白（,HiCN,）。在,540nm,处测定,HiCN,的吸光度，直接换算,Hb,浓度或在标准曲线上查得,Hb,浓度。,32,20ul,血液加入,5ml,转化液中，充分溶血转化后，以转化液调零，测定标本（,HiCN,）在,540nm,的吸光度,A,。,计算,操作,直接计算（符合,WHO,标准的分光光度计）,Hb,A6445844000251,A367.7,以,HiCN,参考液绘制标准曲线，利用吸光度,A,在标准曲线上查出,Hb,浓度,33,方法学评价,缺点：,试剂有毒、,高,WBC,造成试剂混浊、,HbCO,转化慢、不能测,SHb,。,HiCN,测定法,（参考方法）,优点：操作简单，反应速度快，产物稳定，便于质控。,34,方法学评价,优点：,操作简单，,试剂无毒,，结果准确，重复性好。,缺点：,SDS,质量差异大；消光系数未定，不能直接计算,Hb,浓度,；不能测定,SHb,；,SDS,破坏白细胞,。,SDS-Hb,测定法,（,HiCN,替代方法）,35,方法学评价,优点：,试剂简易无毒、呈色稳定、准确性与精密性较高。,缺点：,575nm,波长比色，,血液分析仪上应用受限，不能转化,Hb,F,。,AHD575,测定法,36,方法学评价,优点：,准确度、精密度较高。,缺点：,试剂有毒、,HbCO,转化慢。,HiN3,测定法,37,方法学评价,优点：,溶血强，不破坏白细胞，适用于血液分析仪。,缺点：,精密度、准确度低。,CATB,测定法,38,质量保证（比色法）,标本：引起血清浊度增加的因素致,Hb,假性增高。,器材及试剂：定期校准仪器，选用合格的微量采血管和刻度吸管，保证试剂质量。,技术操作：控制技术误差。,废弃物：妥善处理废液。,39,参考值,成年男性：,131,172 g/L,成年女性：,113,151 g/L,新生儿：,180,190 g/L,婴儿：,110,120 g/L,儿童：,120,140 g/L,老年（,70,岁）：男性,94,122 g/L,女性,87,112 g/L,Hb,存在年龄,与性别的差异,40,临床意义（同红细胞计数）,判断贫血程度优于红细胞计数,临床应用注意事项,Hb,和,RBC,不一定正确反应全身红细胞总容量的变化。,某些贫血，,Hb,和,RBC,减少程度可不一致，同时测定,Hb,和,RBC,，对诊断更有意义。,41,贫血程度的判定,分度,Hb,含量 症状,轻度：,91g/L,正常值下限 症状轻微,中度：,61g/L90g/L,活动后心悸、气促,重度：,31g/L60g/L,休息时也有心悸、气促,极重度：,30g/L,常合并贫血性心脏病,42,小结,Hb,测定方法学评价,RBC,显微镜计数法原理,RBC,计数的临床意义,HiCN,测定法,原理,43,谢 谢,44,