合-1-双股DNA病毒.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,双股DNA病毒,痘病毒科：,鸡痘病毒 绵羊痘病毒 山羊痘病毒 粘液瘤病毒,非洲猪瘟病毒科：,非洲猪瘟病毒,疱疹病毒科：,伪狂犬病毒、禽传染性喉气管炎病毒、马立克病毒、鸭瘟病毒,腺病毒科：,犬传染性肝炎病毒、产蛋下降综合症病毒,双股DNA病毒是指：基因组核酸为双股DNA的病毒。主要包括以下病毒：,非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科,疱疹病毒科,腺病毒科,多瘤病毒科与乳头瘤病毒科,嗜肝DNA病毒科,杆状病毒科：为昆虫及甲壳动物的病毒,其中,痘病毒科、非洲猪瘟病毒科、疱疹病毒科、腺病毒科,包含了兽医学上重要的病毒病原,2、主要特性：,（1）基因组单分子的线状双股DNA，约200kb；,（2）,细胞浆内复制,；,（3）主要以胞浆膜出芽方式释放并获得囊膜；,（4）能在上皮细胞浆中形成,胞浆包涵体,。,特殊：,1.鸡痘病毒：某些毒株具有,血凝素,：鸡、其它禽类、绵羊等的红细胞。,2.绵羊痘,？,、山羊痘,没有,血凝性,二、抵抗力：,共同,（1）怕热：55，20min或37，24h丧失感染力；,（2）怕,日光和紫外线,:可迅速灭活；,（3）抗冷，抗干燥；（4）病灶干痘痂，毒力可保存几个月。,三、抗原性,1.山羊痘病毒、,绵羊痘病毒,？,、粘液瘤病毒、鸡痘病毒：,1,个血清型,2.山羊痘病毒、绵羊痘病毒,之间存在共同抗原,。,四、致病性,1、鸡痘病毒,可分为三种病型，即皮肤型、白喉型和混合型。,皮肤型：在鸡冠、肉髯和眼皮等处，产生一种,特殊的痘子,。,白喉型：主要在口腔和咽喉部分，先在粘膜上生成一种,黄白色小结节,，后逐渐融合形成一层黄,白色干酪样的假膜,。,2、绵羊痘病毒,（1）致病性：自然条件下,只感染绵羊,，致全身性疱疹，肺常出现特征性干酪性结节，各种绵羊对绵羊痘病毒的易感性不同，死亡率550%不等。人由于直接接触病羊污染的物质也可感染。,3、山羊痘病毒,在自然条件下仅感染山羊，表现为发热、有粘液性、脓性鼻漏及,全身性皮肤丘疹,。,4、粘液瘤病毒,致病性：,野兔、家兔,都非常易感。兔感染48h后出现临床症状，首先眼结膜炎，接着头部广泛肿胀，呈特征性的,“狮子头”，,严重者体温升高到42，多在48h死亡。澳大利亚曾引入此病毒，以图消灭过剩的野生家兔。,五、培养：,共同,（1）,1012日龄鸡胚绒尿膜接种,；多数在膜上可形成,痘斑,，痘病毒的种类不同，痘斑的形态、颜色、大小以及形成时间也不同。,（2）,鸡胚成纤维细胞,培养，产生,CPE,，并形成,空斑,。,特殊,1、绵羊痘病毒：可在鸡胚绒毛尿囊膜上、绵羊、山羊、犊牛,睾丸细胞培养,中生长，并产生明显的CPE。,2、粘液瘤病毒：鸡胚绒毛尿囊膜，3d后产生直径0.51.0mm的,圆形痘疱,。,3、鸡痘病毒：易在鸡胚绒毛尿囊膜上生长,并可于3天内产生,白色隆起的大型痘斑,。,六、诊断,共同,（1）病毒分离：采取无菌的清朗庖液或取,痘斑研磨,后，加,双抗,处理后，鸡胚绒毛尿囊膜接种，在37 孵育,57d,，可见绒尿膜上形成增生性、坏死性痘疱。,（2）病理切片：将绒尿膜固定制作切片，用苏木素和伊红染色，在上皮细胞的,胞浆内,可以见到,嗜酸性包涵体,。,七、预防,1、鸡痘：目前主要采用鸡痘疫苗进行预防。,鸡痘活疫苗：用于35日龄以上的幼鸡，对雏鸡有一定的毒力。,鸽痘活疫苗：毒力比鸡痘疫苗弱，用于1日龄雏鸡和产蛋母鸡，一般采用毛囊接种法。,鸡痘鹌鹑化活疫苗：毒力很低，雏鸡使用安全，效果良好。,2、绵羊痘病毒：定期接种疫苗，常用羊痘氢氧化铝苗或鸡胚化羊痘弱毒疫苗。,非洲猪瘟病毒科与虹彩病毒科,虹彩病毒科：分为4个属，其中2个属与鱼类和两栖类疾病相关。,非洲猪瘟病毒科：仅有一个成员，即,非洲猪瘟病毒,（African swine fever virus，ASFV）。,这两科的病毒均为：线状,双股DNA，20面体对称，有囊膜。,非洲猪瘟病毒,1、致病性：为非洲猪瘟的病原体：仅家猪易感；以,急性高热为特征，全身出血,，病程短，死亡率高；,由呼吸道入侵扁桃体和鼻粘膜附近淋巴结增殖血流（病毒血症，红细胞及白细胞中含毒）。,2、病毒的生物学特点,（1）球形，175215nm；,（2）双股DNA，20面体对称，有囊膜。,（3）是唯一已知的,核酸为DNA的虫媒病毒,。,（4）血细胞吸附现象：,白细胞感染ASFV后，表面有一种病毒特异抗原，能吸附正常猪的红细胞，这种可被抗本病毒的免疫血清所抑制；,血细胞吸附试验具有毒株特异性。,3、血清型：1个,4、培养：,（1）初始分离的ASFV仅在,猪单核细胞和巨噬细胞,中复制；,（2）适应后可在,猪肾细胞(PK15)、Vero细胞,等生长。,5、IE推荐的诊断方法,（1）病毒分离和鉴定；,（2）血细胞吸附实验：可区别非洲猪瘟与猪瘟；,（3）直接荧光抗体试验检测抗原；,（4）病毒基因的PCR检测。,6、免疫,本病毒各个毒株之间免疫原性很低，对同株的免疫力也是短暂的，目前尚,无有效疫苗可用,。,注意：我国目前没有非洲猪瘟，必须严加防范！,疱疹病毒科,一组具有,包膜的DNA,病毒。,该科病毒均为：线状双股DNA，20面体对称，有,囊膜,。,一、主要生物学特征,共同,1、基因组为单分子线状双股DNA，约125235kb。,2、直径150nm，162个壳粒组成的,20面体对称,，有,囊膜,，囊膜上有糖蛋白的,纤突,。,3、病毒衣壳在,细胞核内,复制和装配，可形成巨大的,包涵体,，后经核膜以芽生方式获得囊膜；目前尚不明确如何通过细胞质。,特殊,马立克病病毒MDV,（1）分类地位：疱疹病毒甲亚科成员，又名禽疱疹病毒2型。,（2）病毒生物学特性：基因组为线状双股DNA，大小166184kb，为,传染性核酸,；,病毒核衣壳20面体对称,。,裸露的MDV：直径85100nm，常见于,感染细胞的核内,，胞浆中偶尔也可看到。有囊膜的MDV：直径150160nm，主要见于核膜和核泡，有时见于胞浆。羽囊上皮内的病毒子：直径达273400nm，呈不规则的无定形结构。,伪狂犬病毒能够凝集,小白鼠红细胞,禽传染性喉气管炎,无,血凝性,鸭瘟病毒,无,血凝特性,马立克氏病毒,无,血凝特性？,二、致病性,1、伪狂犬病毒,猪为原始宿主,，也可感染马、牛、绵羊、山羊及多种野生动物。,主要症状,成年猪多为隐性感染，少数出现轻微发热和神经症状；幼猪感染后呈发热、麻痹、昏迷等症状，死亡率很高；,怀孕母猪,流产、死胎或木乃伊胎,；其它动物感染后死亡率很高，特征症状为,体躯某部奇痒,。,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,伪狂犬病毒,（3）病毒分布与动物排毒情况,病毒分布：最初位于,扁桃体,，感染24hr内可从头部,神经节、脊髓及桥脑中分离到病毒,排毒：康复猪可通过,鼻腔分泌物及唾液,持续排毒，但粪、尿不带毒。,2、禽传染性喉气管炎病毒,自然感染对象为鸡；各种年龄鸡均可被感染，仅以,成年鸡的症状最典型,。康复鸡可部分成为带毒鸡，成为传染的来源。,主要症状：病鸡呈现呼吸困难和,咳出血性渗出物,；产蛋下降，蛋壳褪色，产软壳蛋。,主要病变：主要发生在喉头和气管部分，气管黏膜肿胀、出血、坏死和形成糜烂，,气管内的血样或黄白色渗出物,。,3.马立克病毒,MDV为细胞结合性病毒，靶细胞,T淋巴细胞,。,主要感染,鸡和火鸡,，鹌鹑、稚鸡、鹧鸪也能感染。以,淋巴细胞增生和肿瘤形成为特征,，潜伏期较长。一般以23月龄的鸡发病最为严重。,根据病变发生的主要部位和临诊症状，可分为4种致病类型：,神经型（古典型）内脏型（急性）眼型 皮肤型,马立克病病毒,神经型（古典型）,马立克病病毒,内脏型（急性）,眼型,马立克病病毒,皮肤型,马立克病病毒,传染性,感染鸡群的垫料和羽毛具有传染性,：含有从羽囊上皮细胞来的病毒，传染性在室温可保持48个月，在4至少保持10年，但常用化学消毒剂作用10min就能使之灭活。,不能垂直传播。,4、鸭瘟病毒,以消化道感染为主。主要引起1月龄以上成年鸭的鸭瘟；也可感染鹅和其他雁形目禽类。,病鸭肝、脾、脑、食道和泄殖腔等组织含毒量最高。主要症状：高热，两脚麻痹，腹泻，排出绿色稀粪，流泪和头颈部肿大，俗称,“大头瘟”；,病鸭表现为肠炎、脉管炎、广泛的局灶性坏死，产蛋率下降2540%，发病率5100%，死亡率很高（病鸭多数死亡）。,抵抗力,2、禽传染性喉气管炎病毒,对热敏感，-20-60或冻干条件下可长期保存，至少10年；,对一般消毒药抵抗力不强。在,3%来苏儿或1%苛性钠,溶液中，不到1min即死亡。,（3）抵抗力,2、禽传染性喉气管炎病毒,对热敏感，-20-60或冻干条件下可长期保存，至少10年；,对一般消毒药抵抗力不强。在,3%来苏儿或1%苛性钠,溶液中，不到1min即死亡。,三、抗原性,1、伪狂犬病毒：PRV只有,1个血清型,，但毒株间存在差异。,2、禽传染性喉气管炎病毒：仅,1个血清型,3、鸭瘟病毒,：1个血清型,3.马立克病毒：毒株分类：分为,血清1、2、3型,血清1型：包括,所有致瘤,强弱不同的致瘤毒株,致弱株荷兰CVI988/Rispens株、英国HRPS-16/att株、美国Md11/75C株、我国的“814”株等。低毒力株Cu-2株、K株等；中等毒力株B14株等；高毒力株JM株、GA株、HPRS-16株、北京-1株等；超强毒株Md/5株、RB1/B株等；特超强毒株如584A株等。,血清2型：包括所有的,不致瘤毒株,，SB1，301 B/1，Z4（江苏农学院）。,血清3型：包括所有的,火鸡疱疹病毒,，如：FC-126，LS等。,四、病毒培养,1、伪狂犬病毒,易在,鸡胚绒毛尿囊膜,上生长，接种后3-4d能形成大小不一的隆起的,白色痘斑,可在细胞培养中生长：兔、猪和仓鼠的,肾细胞,（可产生CPE和空斑，形成,包涵体,）；兔和豚鼠睾丸细胞；鸡胚成纤维细胞。,2、禽传染性喉气管炎病毒,仅能在,鸡胚复制,：绒尿膜接种，在绒毛尿囊膜上形成大小不等的,灰白色痘斑,能在,鸡胚肝、肾和肺细胞,上繁殖，并引起CPE,3、马立克病毒,鸡胚培养：,卵黄囊接种4日龄鸡胚,，18日龄左右可看到绒尿膜上形成,白色痘疱,，从针尖大到直径12 mm不等。,细胞培养：,雏鸡肾细胞(CK)和鸭胚成纤维细胞(DEF,)适于MDV1型的初次分离，,适应后可在鸡胚成纤维细胞(CEF),上生长，并产生CPE；2型和3型MDV在CEF上生长良好。,4、鸭瘟病毒：鸭胚尿囊腔、鸡胚成纤维细胞,五、微生物学诊断,1、伪狂犬病毒,动物试验：12mL适当稀释的病脑组织悬液皮下接种兔；25d后于接种部位出现,奇痒症状,，最后,麻痹致死,。,病毒分离：常用,猪肾细胞系,(PK-15)，病毒接种后2472h，出现CPE（细胞层折光性，最后脱落，形成,合胞体,）。,病毒鉴定：,可用特异性抗血清做中和试验、免疫荧光试验鉴定病毒；,ELISA,（国际贸易指定试验）：能迅速检测大量样品；,PCR技术,：鉴定伪狂犬病毒，多用于隐性感染。,2、禽传染性喉气管炎病毒,病毒分离,病料采集：发病早期的气管渗出物、气管粘膜及肺组织。鸡胚接种：绒尿膜接种，第3d开始形成痘斑,56d死亡。雏鸡接种：易感雏鸡接种后34d出现明显的症状和病变。,病毒鉴定：常用的方法有中和试验、荧光抗体检查、空斑减少试验。,鉴别诊断：传支、传鼻、鸡败血支原体病相区别：取病鸡气管渗出物或其他含毒组织病料，,涂擦易感鸡泄殖腔粘膜，,45d后观察涂擦部位是否出现红肿等炎症反应。,3、马立克病毒,采集病料与病毒分离：用病鸡的肿瘤组织或抗凝血作为接种材料；分离1型病毒用,DEF或CK,细胞单层，分离2型、3型用,CEF单层,。,血清学试验：,常用琼扩试验,；流行期，常用,高免血清检测病鸡羽囊上皮中的病毒，,流行后期，可用已知病毒抗原检查病鸡血清中的抗体。,荧光抗体试验,4、鸭瘟病毒,禽胚接种：,绒尿膜接种914日龄鸭胚,，4d后死亡，胚体表面轻度充血和小点出血，绒尿膜水肿增厚并有灰白色坏死灶，肝脏表面有,特征性灰白色或灰黄色针头大坏死灶,。,鸡胚内不能生长。,能在,DEF中生长，,自第6代起可引起明显的细胞病变，形成,核内包涵体和空斑,。,动物接种：无菌病料接种易感小鸭和免疫对照鸭；前者死亡而后者不感染，即可确诊。,六、预防,1、伪狂犬病毒,灭活苗弱毒苗基因缺失苗，在计划根除伪狂犬病的国家，可选用此类疫苗。,2、禽传染性喉气管炎病毒,疫苗接种（,从未发生过本病的地区，不宜进行疫苗接种,）,中等毒力疫苗：泄殖腔黏膜涂擦,弱毒疫苗：滴鼻或滴眼,油乳剂灭活苗，80-100日龄接种1次即可,3、马立克病毒：,1日龄雏鸡免疫接种,4、鸭瘟病毒,免疫接种：鸭瘟鸭胚化,弱毒疫苗,、鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗。,防止带毒野生水禽进入鸭群。,腺病毒科,一、分类,哺乳动物腺病毒属（Mastadenovirus）和禽类腺病毒属（Aviadenovirus）动物腺病毒及其所致疾病,二、一般特性,共同,各种动物的腺病毒形态基本相同，衣壳结构清晰，易在电子显微镜下仔细观察，在感染细胞核内的病毒粒子经常排列成结晶状。而且腺病毒的核酸和蛋白质又易分离提取，故是目前动物病毒中在形态和化学结构上研究得最为详细的病毒之一。,1、腺病毒,没有囊膜,，球形,2、核衣壳的直径为7080nm，呈,二十面体立体,对称。,3、内为线状的双股DNA。,4、向外伸出的,纤突,。,血凝素,也在球部,可凝集大白鼠、恒河猴或禽类红细胞，为型特异性抗原所在部位。,5、在,细胞核内,转录、复制、核内装配；通过细胞裂解释放。,特殊,1、减蛋综合征病毒（EDS76）血凝性：能凝集,鸡及其他禽类,的红细胞,2、犬传染性肝炎病毒,血凝性：犬传染性肝炎病毒能凝集,人O型、豚鼠和鸡的红细胞,不凝集大鼠、小鼠、猪、犬、羊、马、牛、兔的红细胞.利用这种特性可进行血凝抑制试验.,二、抵抗力,共同,1、腺病毒对,酸的抵抗力较强,，腺病毒对酸稳定，适宜pH为69，能耐pH35，pH在2以下和10以上不稳定。能通过胃肠道而继续保持活性。,2、由于没有脂质囊膜，对,乙醚、氯仿,有抵抗力，但在丙酮中不稳定。,3、腺病毒对温度的耐受范围较宽，在冷冻状态下保存非常稳定，于4存活70天，222314天，367天；但,50经1020分钟或56 2.55分钟,三、致病性,共同,1、传播以粪口为主途径，也可通过呼吸道或污染物品传播。,2、病毒在,咽、结膜尤其是小肠上皮细胞内,增殖，偶尔波及其他脏器，隐性感染常见。,3、疾病一般为自限性，感染后可获得,长期,持续的,型特异性免疫力,，中和抗体损伤作用重要。,1、减蛋综合征病毒（EDS76）：最早分离于1976年，除鸡外，家鸭、野鸭及鹅也发病。,（1）产蛋母鸡的,产蛋量下降和蛋的质量降低,危害种、蛋鸡 的重要传染病之一。,产蛋下降一般持续,410w,逐渐恢复 蛋色变淡、蛋壳粗糙不平，软壳蛋、薄壳蛋、破蛋。,（2）人工感染1日龄雏鸡，到7日龄前后出现精神萎顿和腹泻，并有少数幼雏鸡发生死亡。,2、犬传染性肝炎病毒：种急性、高度接触性败血性传染病,俗称为,犬蓝眼病,.临床上以体温升高、黄疸、贫血和角膜混浊为特征;病理上以肝小叶中心坏死、肝实质细胞和皮质细胞内出现,包涵体,和出血时间延长为特征.,四、抗原性:,共同,哺乳动物腺病毒有,共同的可溶性补体结合性抗原。,某些腺病毒具有T抗原，可利用免疫沉淀试验在由腺病毒引起肿瘤的动物血清中检测到，意味着某些腺病毒与肿瘤原性相关。,1、减蛋综合征病毒（EDS76）,具有三种基因型,（1）第一种引起经典的EDS，许多国家均有发生；（2）第二种仅发生于英国的鸭；（3）第三种发生于澳大利亚的,鸡。,血清型：,1种血清型,。,2、犬传染性肝炎病毒,：,1和2型,五、培养,1、减蛋综合征病毒（EDS76）,（1）在,鸭胚和鹅胚,上复制的滴度高于鸡胚。,（2）能在,鸭及鹅胚的肾细胞,、肝细胞、成纤维细胞上复制,并产生CPE（细胞肿胀、变圆、聚集成,葡萄串状,）。,2、犬传染性肝炎病毒,CAV可在原代犬、猪、雪貂、豚鼠、浣熊的,肾和睾丸细胞,以及MDCK（犬肾细胞,）,细胞上增殖.细胞病变为增大、变圆、变亮、聚集成葡萄串状.,六、微生物学检查,共同,1、病毒分离：采取标本，迅速接种敏感细胞，根据特征性细胞病变及抗原性鉴定病毒。,大多数腺病毒具有比较严格的宿主动物范围。,一种动物的腺病毒一般不感染异种动物。,而且在组织培养细胞中，也以该宿主动物来源的细胞最为敏感，上皮样细胞似乎比纤维样细胞更为敏感。故在腺病毒的分离培养中，通常应用宿主动物来源的原代、继代或传代细胞(主要是,肾细胞,)。但在连续传代后，常可适应其它动物来源的细胞培养物,2、血清学检查：取急性期和恢复期血清进行补体结合试验，,抗体升高4倍或以上,，可判断为近期感染。,3、中和试验和血凝抑制试验可定型别。,1、减蛋综合征病毒,（EDS76）,（1）病毒分离：病料采集和处理；,鸭胚,接种。,（2）病毒鉴定：,血凝和血凝抑制试验,。,2、犬传染性肝炎病毒,1）病毒分离：活犬可采取病犬血液,用棉棒采取尿液、扁桃体等;死后采取全身各脏器及腹腔液,但以肝或脾最适宜将病料处理后接种犬肾原代细胞或传代细胞活幼犬眼前房中(角膜混浊,产生包涵体),可出现腺病毒所具有的特征性的细胞病变,并可检出核内包涵体.,2）血凝和血凝抑制试验,