GBZ∕T 318.2-2018 血中三甲基氯化锡的测定 第2部分：气相色谱-质谱法.pdf

ICS 13.100 C 52 中华人民共和国国家职业卫生标准 GBZ/T 318.22018 血中三甲基氯化锡的测定 第 2 部分：气相色谱-质谱法 Determination of trimethyltin chloride (TMT) in blood Part 2:Gas chromatographicmass method 2018 - 08 - 16 发布 2019 - 01 - 01 实施 中华人民共和国国家卫生健康委员会 发布 GBZ/T 318.22018 I 前 言 根据中华人民共和国职业病防治法制定本标准。 GBZ/T 318血中三甲基氯化锡的测定分为两个部分： 第1部分：气相色谱法； 第2部分：气相色谱-质谱法。 本部分为GBZ/T 318的第2部分。 本部分按照GB/T 1.12009给出的规则起草。 本标准起草单位：广东省职业病防治院、深圳市职业病防治院、深圳市罗湖区疾病预防控制中心、深圳市龙岗区疾病预防控制中心。 本标准主要起草人：吴邦华、戎伟丰、易娟、赖少阳、刘丽、何嘉恒、吴川、蔡金敏、谢玉璇、刘奋、何俊涛、赖璟琦、张英、蔡志斌、刘渠、张文、林怡然、贠建培、张英。 GBZ/T 318.22018 1 血中三甲基氯化锡的测定 第 2 部分：气相色谱-质谱法 1 范围 GBZ/T 318的本部分规定了测定血中三甲基氯化锡气相色谱-质谱法。 本标准适用于职业接触人员血中三甲基氯化锡的测定。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GBZ/T 295 职业卫生生物监测方法 总则 3 原理 血中三甲基氯化锡用四乙基硼酸钠衍生成为三甲基乙基锡，经正己烷萃取，气相色谱-质谱检测，以保留时间和特征离子的丰度比值进行定性，用特征离子 165m/z 的离子丰度值（峰面积）定量。 4 仪器 4.1 肝素钠抗凝采血管，5mL。 4.2 离心机，0 r/min 3000r/min。 4.3 微量注射器，1L、10L、50L、100L。 4.4 具塞玻璃管：15mL，配有聚四氟乙烯密封盖。 4.5 旋涡振荡器。 4.6 气相色谱-质谱仪。 仪器操作参考条件： a) 色谱条件： 色谱柱： 60 m 0.32 mm 1.0m二苯基-95%二甲基硅氧烷共聚物（HP-5MS） ； 柱温：初温50 ，以20 /min升到200 ，保持1.0min； 汽化室温度：250 ； 柱流量：2.0 mL/min； 分流比：5 : 1。 b) 质谱条件： 离子源：电子轰击离子源（EI） ； 离子化能量：70eV； 离子源温度：230 ； GBZ/T 318.22018 2 接口温度：260； 扫描模式：选择离子扫描模式，选择165 m/z为定量离子，151m/z、165m/z、179m/z和194 m/z为鉴定离子； 溶剂延迟时间：4.0min。 5 试剂 5.1 实验用水为去离子水。 5.2 三甲基氯化锡，优级纯（99.8%）。 5.3 四乙基硼酸钠，优级纯。 5.4 四氢呋喃，分析纯。 5.5 乙酸钠，分析纯。 5.6 冰醋酸，分析纯。 5.7 正己烷，色谱纯。 5.8 乙腈，色谱纯。 5.9 衍生剂：称取 0.1 g 四乙基硼酸钠，加入 10mL 四氢呋喃溶解，配成 1四乙基硼酸钠-四氢呋喃溶液，该溶液置于 4冰箱中避光保存，可稳定 1 个月。 5.10 缓冲液（pH 4.00.2）：在 120mL 水中加入 0.6g 乙酸钠，再加 1.4 mL 的冰醋酸。 5.11 标准溶液：于 10mL 容量瓶中，加入少量水，准确称量后，加入一定量的三甲基氯化锡，再准确称量， 加水至刻度； 由 2 次称量之差计算此溶液的浓度， 为标准贮备液 （浓度约为 5mg/mL） ， 此液在 4冰箱内可储存 6 个月。临用前，用水稀释成 50.0g/mL 三甲基氯化锡标准溶液。或购买经国家认证并授予标准物质证书的标准溶液物质。 6 样品采集、运输和保存 用肝素钠抗凝采血管采集接触三甲基氯化锡工人的血样5mL，于室温或冷藏运输，尽快置于4冰箱中存放，样品可保存15d。 7 分析步骤 7.1 样品处理：将血样从冰箱中取出，放置恢复到室温后，充分摇匀。准确吸取 1.0mL 血样于 15mL具塞玻璃管中，加入 2.0mL 缓冲液，摇匀后加入 7.0mL 乙腈，密封后振荡 1min 以充分沉淀蛋白，再以3000r/min 离心 1min，将上层清液全部转移至另一 15mL 具塞玻璃管中，加入少量乙腈洗涤沉淀，合并洗涤液于 15mL 具塞玻璃管中，加入 0.2mL 衍生剂，混合后，准确加入 1.0mL 正己烷，密封后振荡 5min，静置或离心分层后取上层有机相 1.0L 分析。若样品中三甲基氯化锡浓度超过测定范围，可用正己烷稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。 7.2 试剂空白处理：用 1.0mL 水代替血样，按样品同样处理，做试剂空白。 GBZ/T 318.22018 3 7.3 标准系列溶液的配制与测定：在 15mL 具塞玻璃管中加入 1.0mL 水，再加入标准溶液，配制成含量为 0.0g2.5g 的三甲基氯化锡标准系列溶液，每个标准系列溶液中再加入 2.0mL 缓冲液，摇匀后加入 7.0mL 乙腈和 0.2mL 衍生剂，混合后准确加入 1.0mL 正己烷，密封后振荡 5min，静置或离心分层后取上层有机相1.0L分析。 参照仪器操作条件， 将气相色谱-质谱仪调节至最佳测定状态， 分别进样1.0L的正己烷萃取液，测定各标准系列溶液。以测得的 165m/z 特征离子的离子丰度值（峰面积）对相应的三甲基氯化锡含量(g)绘制标准曲线或计算回归方程。 7.4 样品测定：用测定标准系列溶液的操作条件测定样品和试剂空白的 165m/z 的离子丰度值（峰面积），由标准曲线或回归方程得三甲基氯化锡的含量(g)。 8 计算 按式（1）计算血中三甲基氯化锡的浓度： DVmC1000 (1) 式中： C血中三甲基氯化锡的浓度，单位为微克每升（g/L）； m血中三甲基氯化锡的含量（减去试剂空白），单位为微克（g）； V取血样的体积，单位为毫升（mL）； D血中三甲基氯化锡的回收率，%。 9 说明 9.1 本法的检出限为 0.003g，定量下限为 0.015g，最低检出浓度为 3.0g/L(以取血样 1.0mL 计)，最低定量浓度为15.0g/L(以取血样1.0mL计)。 测定范围为0.003g2.500g， 相对标准偏差为1.1%4.9%。 9.2 本法平均回收率为 76.6%。 9.3 本法可采用性能类似的其他毛细管色谱柱。 9.4 血中与三甲基氯化锡共存的二甲基二氯化锡、甲基三氯化锡对测定不干扰。 9.5 血样的采集没有时间限制， 由于三甲基氯化锡主要分布在红细胞中， 因此不能采用血浆进行检测，应采用全血样品检测。 9.6 检测的质量保证遵守 GBZ/T 295。 9.7 色谱图、质谱图见图 1图 3。 GBZ/T 318.22018 4 注： 1三甲基乙基锡（4.98 min） ； 2二甲基二乙基锡（5.98 min） ； 3三乙基甲基锡（6.98 min） 。 图 1 三甲基氯化锡衍生物、二甲基二氯化锡衍生物和甲基三氯化锡衍生物的分离图 图 2 三甲基氯化锡的质谱图 图3 三甲基氯化锡衍生物三甲基乙基锡的质谱图 _ 1 2 3