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,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,微生物学ch专题知识讲座,微生物学ch专题知识讲座,第1页,第一节 消毒灭菌常见术语,消毒,(disinfection),利用理化原因杀死物体或环境中病原微生物办法。并,不一定能杀死含芽胞细菌或非病原微生物,灭菌,(sterilization),利用理化原因杀死物体上,全部微生物,过程,包含芽胞。,微生物学ch专题知识讲座,第2页,防腐,(antisepsis),:,体外预防或抑制细菌生长繁殖方法,清洁(,cleaning,),:,是指经过除去尘埃和一切污,秽以降低微生物数量过程。,无菌,(asepsis),不存在任何活菌,无菌操作(,aseptic technique,),:预防细菌进入人体或其它物品操作技术,微生物学ch专题知识讲座,第3页,第一节 消毒灭菌方法,一、物理消毒灭菌法,常见有,:,热力、紫外线、辐射、,超声波、,滤过,干燥,低温,最主要是热力,二、化学消毒灭菌法,微生物学ch专题知识讲座,第4页,热力灭菌法,(一)干热灭菌,焚烧、烧灼、红外线,干烤(,160170/2h,),(二)湿热灭菌,巴氏消毒法,pasteurization,煮沸法 30分钟,流动蒸气灭菌法,间歇蒸气灭菌法,高压蒸气灭菌法,121,15,个大气压,20,分钟,同一温度下,湿热比干热效果好,用较低温度杀灭液体中病原菌或特定微生物,而仍保持物品中所需不耐热成份不被破坏消毒方法。,6230min,或,72 30,sec,微生物学ch专题知识讲座,第5页,2.,影响湿热灭菌原因,(,了解,),(1),微生物原因,:,(2),温度与作用时间,:,(3)pH,值影响,:,(4),介质性质,:,微生物学ch专题知识讲座,第6页,辐射杀菌法,1,、电离辐射,X,、,、,射线,原理,:,经过产生,OH-,、,O2,等活性游离基进行杀菌;经过破坏,DNA,结构造成菌体死亡,2,、非电离辐射,(,1,),紫外线,200300nm,杀菌原理:造成,DNA,分子构型改变,造成,DNA,复制出现差错,用途与缺点 只用于空气和物品表面消毒,用时注意防护,(,2,)日光 能杀死大个别微生物,(,3,)微波 常见于对非金属器械消毒,微生物学ch专题知识讲座,第7页,滤过除菌法,1,、贝克菲滤器,2,、蔡氏滤器,3,、玻璃滤器,4,、,膜滤器,孔径,0.22um-0.45um,除菌,25-100nm,可去除病毒,空气过滤器,:,无菌棉花、活性炭及细玻璃纤维等,可对空气进行过滤除菌,微生物学ch专题知识讲座,第8页,-5-26,9,微生物学ch专题知识讲座,第9页,超声波消毒法,原理:空穴效应,微生物学ch专题知识讲座,第10页,干燥与低温抑菌法,抑菌和灭菌,常见冷冻法贮藏菌种,要注意,:,快速冷冻,加入冷冻保护剂,普通,-20-70,度,冷冻真空干燥保留菌种,微生物学ch专题知识讲座,第11页,滤器和层流室,微生物学ch专题知识讲座,第12页,化学消毒灭菌法,(,外用,),常见消毒剂杀菌机制,使菌体蛋白变性或凝固,干扰微生物酶系统和影响其代谢,损伤细胞壁、细胞膜,微生物学ch专题知识讲座,第13页,二、化学消毒灭菌法,(一),高效消毒剂,(,high-level disinfectants,),1,.,含氯消毒剂,;,2,.,过氧化物消毒剂,;,3,.,醛类消毒剂,;,4,.,环氧乙烷,(二),中效消毒剂,(,intermediate-level disinfectants,),1,.,含碘消毒剂,;,2,.,醇类消毒剂,(三),低效消毒剂,(,low-level disinfectants,),1,.,季铵盐类,;,2,.,氯已定,;,3,.,高锰酸钾,微生物学ch专题知识讲座,第14页,固体二氧化氯消毒剂,微生物学ch专题知识讲座,第15页,消毒剂主要类型及应用,重金属盐类,1%硝酸银,氧化剂,0.1%高锰酸钾、,3%,过氧化氢,酚 石炭酸,醇类,70-75%乙醇,醛类,37%-40%,福尔马林,卤素类,0.2ppm-0.5ppm,氯,2.0%-2.5%,碘酒,酸碱类,15%-25%,生石灰,、,50%,醋酸蒸发,表面活性剂,0.1%,新洁尔灭,染料菌,2%-4%,龙胆紫,烷化剂,50mg/L,环氧乙烷,微生物学ch专题知识讲座,第16页,医学上常见消毒剂类型作用机制及种类,类别,作用机制,常见种类,酚类,蛋白变性,细胞膜损伤,石炭酸,醇类,蛋白变性,乙醇,氧化剂,氧化、蛋白沉淀,高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒,重金属盐,氧化、蛋白酶变性,红汞、硫柳汞,表面活性剂,蛋白变性,细胞膜损伤,新洁而灭,染料,干扰氧化、抑制繁殖,龙胆紫,酸碱类,破坏膜、壁,蛋白凝固,醋酸、生石灰,烷化剂,醛类,蛋白质、核酸烷基化,与氨基结合,蛋白变性,环氧乙烷,甲醛、戊二醛,p40,微生物学ch专题知识讲座,第17页,第三节 消毒灭菌利用,(一),高危器械物品,用时需进入无菌组织,物品。全部这些物品都应该灭菌。,(二),中危器械物品,用时不进入无菌组织,但接触黏膜器械。采取消毒即可。,(三),低危器械物品,只接触未损伤皮肤,但,不进入无菌组织和不接触黏膜物品。,普通用后清洗、消毒即可。,(四),快速周转医疗器械,一,、,医疗器械物品消毒灭菌,微生物学ch专题知识讲座,第18页,(二)室内空气消毒灭菌,1,.,物理消毒法,紫外线照射(,1.5,W,/m,3,,1h,)最常见,;,滤过除菌,:,空气经过孔径小于,0.2,m,高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃,2化学消毒法,包含化学消毒剂喷雾和熏蒸,:,过氧乙酸喷雾、熏蒸,;,过氧化氢喷雾,;,二氧化氯溶液,喷洒;,中草药点燃烟熏,(三)手和皮肤消毒,用肥皂和流动水经常并正确洗手,病原微生物污染时应用消毒剂消毒。,微生物学ch专题知识讲座,第19页,(四),黏膜,消毒,(五)病人排泄物与分泌物消毒灭菌,(六)病人污染物品消毒,(七)饮水消毒,(八)环境消毒,微生物学ch专题知识讲座,第20页,影响消毒灭菌效果原因,消毒剂性质、浓度与作用时间,微生物种类与数量,温度,酸碱度,有机物,微生物学ch专题知识讲座,第21页,第四节 影响消毒灭菌效果原因,一,、,微生物种类,二,、,微生物物理状态,三,、,微生物数量,四,、,消毒剂性质、浓度与作用时间,五,、,温度,六,、,酸碱度,七,、,有机物,微生物学ch专题知识讲座,第22页,第四节 病原微生物试验室生物安全,生物安全(,biosafety,)是生物技术安全,(,safety of biotechnology,),简称,狭义,地,指当代生物技术研究、开发、应用及转基因生物可能对生物多样性、生态环境和人类健康产生潜在危害。,广义,地,指与生物相关各种原因对社会、经济、人类健康及生态环境所产生危害或潜在风险。,微生物学ch专题知识讲座,第23页,病原微生物所致安全问题,如病原微生物试验室安全隐患、生物武器、生物恐怖、重大传染病暴发流行等,也是人类社会所面临最现实生物安全问题,病原微生物试验室生物安全关键是,防扩散,和,防感染,关于,病原微生物试验室生物安全,,,我国法令包含对病原微生物分类管理,对试验室分级管理,,,试验室感染控制以及监督和法律责任等,微生物学ch专题知识讲座,第24页,一、病原微生物分类,依据传染性、感染后对个体或者群体危害程度,病原微生物分为四类:,第一类是指能够引发人类或者动物非常严重疾病微生物,以及我国还未发觉或者已经宣告毁灭微生物。,第二类是指能够引发人类或者动物严重疾病,比较轻易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传输微生物。,微生物学ch专题知识讲座,第25页,第三类是指能够引发人或动物疾病,但普通情况下对人、动物或环境不组成严重危害,传输风险有限,试验室感染后极少引发严重疾病,而且具备有效治疗和预防办法微生物。,第四类是指在通常情况下不会引发人或动物疾病微生物。如小鼠白血病病毒等。,第一类、第二类统称为高致病性病原微生物。,微生物学ch专题知识讲座,第26页,二、病原微生物试验室分级,等级,处理对象,一级,对人体、动植物或环境危害较低,不含有对健康成人、动植物致病致病因子。,二级,对人体、动植物或环境含有中等危害或含有潜在危险致病因子,对健康成人、动植物和环境不会造成严重危害,含有有效预防和治疗方法。,三级,对人体、动植物或环境含有高度危险性,主要经过气溶胶使人类传染上严重甚至是致命疾病,或对动植物和环境含有高度危害致病因子。通常有预防治疗方法。,四级,对人体、动植物或环境含有高度危险性,经过气溶胶路径传输或传输路径不明或未知危险致病因子。没有预防治疗方法。,微生物学ch专题知识讲座,第27页,一、二级试验室不得从事高致病性病原微生物试验活动。三级、四级试验室从事高致病性病原微生物试验活动。,从事高致病性病原微生物相关试验活动应该有名以上工作人员共同进行。在同一个试验室同一个独立安全区域内,只能同时从事一个高致病性病原微生物相关试验活动。应有健全安全保卫制度。,微生物学ch专题知识讲座,第28页,试验室工作人员应掌握试验室技术规范、操作规程、生物安全防护知识和实际操作技能。应有符合要求防护用具,应建立健康档案;进行预防接种。,试验室应有科学、严格管理制度,定时对试验室设施设备、材料等进行检验、维护和更新,应对废水、废气以及其它废物进行合理处置,预防环境污染,。,微生物学ch专题知识讲座,第29页,生物安全,微生物学ch专题知识讲座,第30页,三、试验室感染控制以及监督和法律责任,试验室感染控制工作包含定时检验试验室生物安全防护、病原微生物菌(毒)种和样本保留与使用、安全操作、试验室排放废水和废气以及其它废物处置等实施情况。,试验室发生高致病性病原微生物泄漏时,预防、控制办法,包含,:封闭被病原微生物污染试验室或可能造成病原微生物扩散场所;开展流行病学调查;对病人进行隔离治疗,对相关人员进行医学检验;对亲密接触者进行医学观察;进行现场消毒;对染疫或者疑似染疫动物采取隔离、扑杀等办法。,微生物学ch专题知识讲座,第31页,监督主要内容是监督病原微生物试验室执行国家相关法律、行政法规、国家标准和要求统计、档案及汇报情况,法律责任关键是负担造成传染病传输、流行或者其它严重后果法律责任,微生物学ch专题知识讲座,第32页,习题,1.杀灭芽胞最常见和最有效方法是:_。,a.,紫外线照射,b.,煮沸5,min,c.,巴氏消毒法,d.,流通蒸气灭菌法,e.,高压蒸气灭菌法,2.灭菌方法错误是_。,a.,手术室空气-紫外线,c.,饮水-氯气,b.,排泄物-漂白粉,d.,含血清培养基-高压蒸气灭菌,e.,温度计-75%酒精,3.下述不可能杀灭细菌芽胞方法是:_。,a.,煮沸法,b.,巴氏消毒法,c.,间歇灭菌法,d.,干热灭菌法,e.,高压蒸气灭菌法,微生物学ch专题知识讲座,第33页,4.关于紫外线,说法错误是_。,a.,其杀菌作用与波长相关,c.265-266nm,杀菌作用最强,b.,可损坏细菌,DNA,构型,d.,其穿透力弱,故对人体无损害,e.,紫外线适用空气和物体表面消毒,5.常见于空气或物体表面消毒_。,a.,高压蒸气灭菌法,b.,紫外线照射法,c.,滤过除菌法,d.,巴氏消毒法,e.,干烤法,6.常见于基础培养基灭菌_。,a.,高压蒸气灭菌法,b.,紫外线照射法,c.,滤过除菌法,d.,巴氏消毒法,e.,干烤法,微生物学ch专题知识讲座,第34页,
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