输入性HIV抗体检测及流程.docx

附件1输入性HIV抗体检测及流程1范围本附件规定了输入性HIV抗体的检测方法，适用于人体输入HIV抗体阳性的 血浆或血液成分、免疫球蛋白或其他血液制品时，对接受者、提供者和制品的检 测。2检测的意义2.1判断是否输入了 HIV抗体2.2判断输入性HIV抗体在体内的动态2.3判断是否发生了 HIV感染3实验室要求同HIV抗体检测和HIV核酸检测4检测方法及程序4.1 HIV抗体或HIV抗体和抗原筛查检测4.1.1目的：检测有无HIV抗体输入及输入抗体的动态变化。4.1.2试剂：一般采用HIV抗体/抗原联合检测试剂，也可采用HIV抗体检测试剂， 包括酶联免疫吸附实验方法、化学发光实验方法。应经过国家食品药品监督管理局的 批准注册。4.1.3样本：1）接受者的血清或血浆，应在输入基线（输入后立即）、输入后4-6 周和输入后3个月采集样本；2）提供者的血清或血浆，应在最靠近提供血液的时间 点采集血液样本；3）输入物，包括血浆、红细胞等血液成分；免疫球蛋白等血液制 品。4.1.4定性检测：采用酶联免疫法或者化学发光法试剂盒，用夹心法原理检测HIV-1 M群、O群、HIV-2的抗体和HIV-1p24抗原。按照试剂盒说明书操作并判断结果，有 效实验的阳性和阴性对照应符合试剂盒说明书的规定。应对三类样本分别进行检测， 比较各类样本和不同时间点的结果，应始终使用同样的方法和同一个厂家的试剂。4.1.5半定量检测：将样本用HIV抗体阴性的人血浆或者其他与待检样本同质的HIV 抗体阴性的基质液进行连续稀释，一般采用对倍稀释法（稀释倍数为20、2-1、2-2、2-3、 2-4、2-5、2-6）。将稀释后的样本用以上方法进行检测，确定HIV抗体阳性样本的 最大稀释度，得到HIV抗体的滴度。4.2 HIV抗体确证检测：4.2.1目的：检测有无HIV抗体输入及输入抗体的动态变化。4.2.2试剂：可采用HIV抗体的免疫印迹（WB）试剂或者线性免疫印迹（LIA）试剂， 应经过国家食品药品监督管理局批准注册。4.2.3样本：1）接受者的血清或血浆，应在输入基线（输入后立即）、输入后4-6 周和输入后3个月采集样本；2）提供者的血清或血浆，应在最靠近提供血液的时间 点采集血液样本；3）输入物，包括血浆、红细胞等血液成分；免疫球蛋白等血液制 品。4.2.4定性检测：按照试剂盒说明书操作，根据说明书提供的标准记录检测的带型， 判断HIV抗体阳性、不确定或阴性。4.3 HIV核酸检测：4.3.1目的：判断输入物是否具有感染性以及接受者是否被HIV感染。4.3.2试剂：可采用HIV定性或定量检测试剂，应经过国家食品药品监督管理局批准 注册。4.3.3样本：1）接受者的血浆，应在输入基线（输入后立即）、输入后4-6周和输 入后3个月采集样本；2）提供者的血浆，应在最靠近提供血液时采集血液样本；3） 输入物包括血浆、红细胞等血液成分；免疫球蛋白等血液制品。4.3.4定性检测：采用各种核酸检测技术定性检测HIV-1RNA或HIV-1前病毒DNA， 按照说明书操作，结果判断为阳性或阴性。4.3.5定量检测：采用各种核酸检测技术定量检测HIV-1RNA，按照说明书操作。如 HIV-1RNA未检出即为LDL；如HIV-1RNA可检出应记录检测的数值。5结果解释和报告5.1有无HIV抗体输入：输入后基线的样本，HIV抗体检测试剂（或HIV抗体/抗原 检测）和HIV抗体免疫印迹（WB）试剂（或HIV抗体线性免疫印迹（LIA）试剂）检 测的结果满足HIV抗体阳性判断标准，为HIV抗体阳性，结合既往的检测结果判断 有无HIV抗体输入。5.2 HIV抗体发生衰减：检测输入基线(输入后立即)、输入后4-6周和输入后3个 月的样本，HIV抗体滴度下降和HIV抗体免疫印迹(或条带免疫印迹)试剂检测条带 减少，为HIV抗体发生衰减。5.3输入物有无感染性：输入物HIV核酸阳性为有感染性。HIV核酸定性检测符合 试剂盒说明书提供的阳性判断标准；或HIV核酸定量检测HIV-1RNA可检出。5.4接受者是否被HIV感染：接受者基线样本为HIV核酸阴性，输入后4-6周和输 入后3个月的样本转变为HIV核酸阳性。同时，HIV抗体持续阳性、滴度升高。6质量控制6.1调整pH值：人免疫球蛋白制品的pH值为4.0，需要调整到生理pH值。6.2调整蛋白浓度：血液制品的蛋白浓度往往高于血浆，需要适当稀释，达到血浆的 蛋白浓度。6.3全面设置对照：目前没有国家批准的用于检测血液制品的试剂盒，只能使用适用 于血浆的试剂盒。为了确保结果准确，应该设置全面的对照，包括相同批号的制品、 相邻批号和远离批号的制品、同一厂家和不同厂家的制品等。6.4其他质量控制措施：同“HIV抗体检测”和“HIV核酸检测”。参考文献1. Time Until Emergence of HIV Test Reactivity Following Inf ection With HIV-1: Implications for Interpreting Test Results and Retesting After Exposure.Clinical Infectious Diseases 2017:64 (1):53 9.2. Selecting an HIV Test: A Narrative Review for Clinicians and Researchers, Sex Transm Dis. December2017:44 (12): 739 746.3. Updated Guidelines for Antiretroviral Postexposure Prophylaxis After Sexual, Injection Drug Use, or Other Nonoccupational Exposure to HIV- United States,2016.4. 血液制品生产用人血浆病毒核酸检测技术要求中华人民共和国药典2015版, 四部，247-248。