抗酸染色91461演示课件.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验九 抗 酸 染 色,临床病原生物学教研室,1,一、实验目的：,掌握抗酸染色的原理和方法,掌握结核分枝杆菌痰涂片的结果报告,2,分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，一般水溶性染料不易进入，所以分枝杆菌一般不易着色且一旦染色后不易脱色，所以要经过加热和延长染色时间来促使其着色。,因分枝菌酸与染料结合后，很难被酸性脱色剂脱色，故分枝杆菌又称抗酸杆菌。,二、实验原理：,3,三、实验材料：,细菌：结核杆菌,染液：石炭酸复红液、,3%,盐酸酒精、碱性美兰溶液,其它：接种环、酒精灯、载玻片等,4,四、实验方法,1,、细菌涂片的制备,1,）涂片：,20mm*15mm,厚涂片，竹签挑取，涂,2-3,遍,2,）干燥：,自然干燥，或火焰,3,）固定：,火焰固定，必须,5,2,、染 色,1,）初染：,滴加石炭 酸复红适量，在火焰高处徐徐加热，,切勿沸腾，出现蒸汽暂时离开火焰；若染液蒸,发减少，应再加染液，以免干涸，加热,5min,（可延长），待标本冷却后用水冲洗。,2,）脱色：,3%,盐酸酒精脱色,30sec1min,至无红色液体,流下，再用水冲洗。,3,）复染：,用碱性美兰溶液复染,1min,，用水冲洗后 用吸,水纸吸干。,3,、,油镜观察,6,五、实验结果：,1.,结核杆菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。,2.,背景及非抗酸性细菌呈兰色。,7,8,9,六、注意事项：,1,、涂片要充分研磨，防止细菌成团,2,、涂片大小、厚度要适中,3,、固定温度合适,4,、初染加热的温度，勿沸腾,5,、染色时间,6,、冲洗,10,