1、
高效液相色谱维护心得
—单向阀故障
摘要：
近年来，高效液相色谱仪在农产品质量安全检验检测领域应用广泛，尤其是为农产品农药残留检测分析提供了很大的便利。但很多高端先进的高效液相色谱仪用久了，也难免出现这样那样的问题和故障。作为使用者掌握仪器日常维护技能必不可少，针对问题和故障，通过分析查找原因，进一步解决问题，不仅能减少高额的维修成本，还能提高技术能力，一举多得。接下来，就高效液相色谱仪单向阀故障和大家共同分享。
一、故障描述
仪器：Waters 2996二极管阵列检测器；泵：Waters 515二元高压梯度泵；工作站版本：EMPOWER TWO；流动相：乙腈、水。仪器已连续开机
2、运行大约一个月后发现，头一天晚上12：00进的标样与之前的标样相比，多菌灵出峰时间推迟了4min，吡虫啉出峰时间推迟了8min，样品中带有的杂质特征峰原来在14min出峰，现在到了20min。但所有的标样组分均能出峰并有效分离，且响应值和正常情况下的响应值吻合。也就是说，所有物质的出峰时间整体往后推迟。
二、问题分析
检测中我们所使用的流动相是乙腈和水，梯度洗脱。出现这种情况一般合理的解释就是在梯度洗脱的过程中，有机溶剂不足而造成出峰推后。从我们的操作过程来看，此批样品在同等条件下已经连续进样150个，仪器条件没有调整和改变，流动相在出问题之前的3小时进行的更换，更换后标样出峰正常。由此可
3、以排除流动相配制过程中因配制错误而导致出峰不正常的可能性。
根据经验，我们初步认为，造成问题的最大可能在于仪器本身。也就是泵上的单向阀可能出现了故障。
三、排查原因
接下来，我们要做的就是确证是否是单向阀发生了故障。由于是有机相部分发生了问题，因此我们开始检查连接有机试剂泵上的单向阀，具体步骤如下：
:
1、先将泵流路的出口端的管路卸下。设置5mL/min流量，在出口端用量筒接住流出液观察其流液情况。发现出液停顿几秒，流出几秒，不顺畅，1分钟内只有两毫升左右的液体流出。据此可以判断，泵头两边柱塞杆里的单向阀有一边出了问题。
2、将右边的单向阀至混合前的出口管路也松开，启动泵，松开的
4、管路处有液体流出。由此证明，右边的单向阀正常。
3、为了进一步验证，将左边单向阀上部至混合前的出口拧开。设定5mL/min的流量，启动泵，发现液体不走管路中出来，而是从连接右边单向阀管路的底座流出。基本确定此单向阀故障。
四、解决办法
1、更换出问题的单向阀。此时要注意单向阀的方向。不能放置反。
2、更换好后，重新设定5mL/min的流量，启动泵，在泵头出口处用量筒接住流出液以检测流量。流量恢复正常。
3、将流动相设置为检测时的初始比例，以平衡色谱柱。
4、色谱柱平衡好后，进两针标样进行检测。标样出峰恢复正常。
五、小结
单向阀是高效液相色谱仪泵系统中的一个重要组件，也是确保流路畅通的关键部件，在日常使用过程中要做好相关的维护工作。一是要选择高纯度的色谱级试剂作为流动相；二是流动相用前要过膜，在没有在线脱气的情况下进行脱气处理；三是要定期检查，经常清洗单向阀；四是仪器操作人员要做好使用记录和工作笔记，以备查找原因。
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