液相维修之单向阀故障-改.doc

高效液相色谱维护心得
—单向阀故障
摘要：
近年来，高效液相色谱仪在农产品质量安全检验检测领域应用广泛，尤其是为农产品农药残留检测分析提供了很大的便利。但很多高端先进的高效液相色谱仪用久了，也难免出现这样那样的问题和故障。作为使用者掌握仪器日常维护技能必不可少，针对问题和故障，通过分析查找原因，进一步解决问题，不仅能减少高额的维修成本，还能提高技术能力，一举多得。接下来，就高效液相色谱仪单向阀故障和大家共同分享。
一、故障描述
仪器：Waters 2996二极管阵列检测器；泵：Waters 515二元高压梯度泵；工作站版本：EMPOWER TWO；流动相：乙腈、水。仪器已连续开机运行大约一个月后发现，头一天晚上12：00进的标样与之前的标样相比，多菌灵出峰时间推迟了4min，吡虫啉出峰时间推迟了8min，样品中带有的杂质特征峰原来在14min出峰，现在到了20min。但所有的标样组分均能出峰并有效分离，且响应值和正常情况下的响应值吻合。也就是说，所有物质的出峰时间整体往后推迟。
二、问题分析
检测中我们所使用的流动相是乙腈和水，梯度洗脱。出现这种情况一般合理的解释就是在梯度洗脱的过程中，有机溶剂不足而造成出峰推后。从我们的操作过程来看，此批样品在同等条件下已经连续进样150个，仪器条件没有调整和改变，流动相在出问题之前的3小时进行的更换，更换后标样出峰正常。由此可以排除流动相配制过程中因配制错误而导致出峰不正常的可能性。
根据经验，我们初步认为，造成问题的最大可能在于仪器本身。也就是泵上的单向阀可能出现了故障。
三、排查原因
接下来，我们要做的就是确证是否是单向阀发生了故障。由于是有机相部分发生了问题，因此我们开始检查连接有机试剂泵上的单向阀，具体步骤如下：
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1、先将泵流路的出口端的管路卸下。设置5mL/min流量，在出口端用量筒接住流出液观察其流液情况。发现出液停顿几秒，流出几秒，不顺畅，1分钟内只有两毫升左右的液体流出。据此可以判断，泵头两边柱塞杆里的单向阀有一边出了问题。
2、将右边的单向阀至混合前的出口管路也松开，启动泵，松开的管路处有液体流出。由此证明，右边的单向阀正常。
3、为了进一步验证，将左边单向阀上部至混合前的出口拧开。设定5mL/min的流量，启动泵，发现液体不走管路中出来，而是从连接右边单向阀管路的底座流出。基本确定此单向阀故障。
四、解决办法
1、更换出问题的单向阀。此时要注意单向阀的方向。不能放置反。
2、更换好后，重新设定5mL/min的流量，启动泵，在泵头出口处用量筒接住流出液以检测流量。流量恢复正常。
3、将流动相设置为检测时的初始比例，以平衡色谱柱。
4、色谱柱平衡好后，进两针标样进行检测。标样出峰恢复正常。
五、小结
单向阀是高效液相色谱仪泵系统中的一个重要组件，也是确保流路畅通的关键部件，在日常使用过程中要做好相关的维护工作。一是要选择高纯度的色谱级试剂作为流动相；二是流动相用前要过膜，在没有在线脱气的情况下进行脱气处理；三是要定期检查，经常清洗单向阀；四是仪器操作人员要做好使用记录和工作笔记，以备查找原因。