洁净室浮游菌检测标准操作规程.doc

GMP质量管理（9） 文件编号：ZL/SOP/ZK/02300洁净室浮游菌检测标准操作规程文件名：洁净室浮游菌检测标准操作规程文件编号：ZL/SOP/ZK/02300制定人：日期： 年 月 日文件类型：工作标准审核人：日期： 年 月 日版 次：第一版批准人：日期： 年 月 日印 数：共5份生效日期： 年 月 日颁发部门：综合办公室分发至： 质量副总经理、质量管理部、QC检验室、综合办公室变更记载修订号修订人批准日期生效日期原 因 及 目 的 目的：建立浮游菌检测的标准操作程序，用以规范员工的检测操作。 范围：适用于公司内部生产洁净区内的浮游菌检测工作 责任：生产部、生产车间、质量管理部、QC检验室主任、检验员对本规程的执行负责。 检测依据：GB/T162931996（医药工业洁净室浮游菌的测试方法）。 内容：5.1 器具与材料5.1.1 浮游菌采样器5.1.2 真空抽气泵5.1.3 培养皿5.1.4 普通肉汤培养基5.1.5 恒温培养箱5.2 测试步骤5.2.1 测试前，仪器、培养皿表面必须严格消毒。5.2.1.1 采样品在进入被测前先用消毒房间的消毒剂灭菌，用于100级洁净室的采样器宜一直放在被 测房间内。5.2.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。5.2.1.3 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面，采样结束，于用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。5.2.1.4 采样口及采样管，使用前必须高温灭菌。如用消毒剂对采样管的及外壁及内壁进行消毒时，应将管中的残留液倒掉并晾干。5.2.1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。5.2.2 采样程序5.2.2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器中的残余消毒剂蒸发，时间不少于5分钟，并调好流量、转盘转速。5.2.2.2 关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样器缝隙高度。5.2.2.3 置采样口于采样点后，依次开启采样器、真空泵、转动定时器，根据采样量设定采样时间。5.2.3 培养全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。在3035培养箱中培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，检验培养基本身是否污染。可每批选定 3只培养皿作对照培养。5.2.4 菌落计数5.2.4.1 用肉眼直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用510倍放大镜检查，看是否有遗漏。5.2.4.2 若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。5.3 注意事项5.3.1 采样器的采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。5.3.2 采样管严禁渗漏，内壁应光滑。5.3.3 采样管的长度应根据测点的高度定，尽量减少弯曲。5.3.4 使用前应仔细检查每个培养皿的质量，培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。5.3.5 操作时应防止采样管的污染和其他人为对样本的污染。5.3.6 对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。5.3.7 由于细菌各类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或下面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落或培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。5.4 测试规则5.4.1 测试状态5.4.1.1 浮游菌测试前，被测试洁净室 （区）温、湿度须达到规定的要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。5.4.1.2 浮游菌测试前，被 测试洁净室（区）已经过消毒。5.4.1.3 测试状态有静态和动态 两种，测试状态的选择必须符合生产的要求，并在报告中注明测试状态。5.4.2 测试人员5.4.2.1 测试人员必须穿戴符合环境级别的工作服。5.4.2.2 静态测试时，室内测试人员不得多于2 人。5.4.3 测试时间5.4.3.1 对单向流，如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟后开始。5.4.3.2 对非单向流，如10000级，及其以上的净化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。5.4.4 浮游菌浓度计算5.4.4.1 采样点数量及其布置5.4.4.1.1 最少采样点数目：浮游菌测试的最少采样点数目分为日常监测及环境验证两种情况，具体情况见下表。 最少采样点数目面积洁净级别10010000100000验证监测验证监测验证监测102312121020422122040832124010016441210020040103200400802064001604013注：（1）表中的面积，对于100级的单向流洁净室（包括层流工作台），指的是送风口表面积；对于10000级、100000非单向流洁净室，指的是房间面积。 （2）日常监测的采样点数目由生产工艺的关键操作点来确定。5.4.4.1.2 采样点的位置5.4.4.1.2.1 对每个100级洁净操作区域（如层流罩、层流工作台），可在离药物敞开口处30cm处设测点。5.4.4.1.2.2 对每个10000级洁净工作区域（如药物开口工作区）可在工作面处设测点。5.4.4.1.2.3 送风口测点位置离开送风面30cm左右。5.4.4.1.2.4 可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。5.4.4.2 最小采样量采样量根据日常检测及环境验证定，每次最小采样量见下表。最小采样量洁净度级别采样量，L次日常监测环境验证100级600100010000级400500100000级501005.4.4.3 采样次数：每个采样点一般采样一次。5.4.5 采样注意事项5.4.5.1 对于单向流功送风口，采样器采样管口朝向应正对气流方向；对于非单向流，采样管口向上。5.4.5.2 布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。5.4.5.3 采样时，测试人员应站在采样口的下风侧。5.5 记录：对测试情况进行记录（房间温度、相对湿度、压差及测试状态等）。5.6 结果计算用计数方法得出各个培养皿的菌落数。每个测点的浮游菌平均浓度的计算见下式。 菌落数平均浓度（个m3）= 采样量第 5 页 共 5 页