1、实验准备:
1、打开加热水浴锅100℃，2、用500ml烧杯盛约250ml蒸馏水煮沸
2、天平室称量所需样品：奶粉2份,记录数据（m1= ，m2= ）
天平操作考点：预热分析天平约半小时（一般实验前开门时需做）、戴上实验手套、毛刷清扫天平台、调节平衡气泡、分析天平校准轻按CAL键当显示器出现CAL-时，即松手，显示器就出现CAL-100其中“100”为闪烁码，表示校准砝码需用100g的标准砝码。此时就把准备好“100g”校准砝码放上称盘，显示器即出现"----"等待状态，
经较长时间后显示器出现100.000g，拿去校准砝码，显示器应出现0.000g，若出现不是为零，则再清零
2、再重复以上校准操作。
、准确称量、试验完成用具归位(毛刷、药勺…..)
3、加常温蒸馏水调配，约70℃。
称取2.5g（精确至0.01g）的奶粉 加入6.5mL饱和硼砂溶液
—————————————————Ⅰ 50mL烧杯中① 烧杯① 搅拌均匀
Ⅰ﹢70℃左右的水约150mL
（分三次洗入） ②沸水浴15min（并开始准备两个烧杯剩冷水备用） 取出置于冷水浴中冷却—————Ⅱ
250ml容量瓶②
Ⅱ﹢2.5mL亚铁氰化钾溶液 摇匀 ﹢2
3、5ml乙酸锌溶液﹢2.5ml亚硝酸钠标准溶液，加水至刻度，摇匀 放置30min ———Ⅲ
30min内完成
标准曲线的绘制：吸取
0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL亚硝酸钠标准使用液 各加入2.0ml 4g/L对氨基苯磺酸溶液
分别置于50mL比色管中 混匀。
各加入1.0ml 2g/L盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min待测。——————————————————————————Ⅳ
Ⅲ 除去上层脂肪，
4、上清液用滤纸过滤，弃去初滤液30mL，得滤液。
吸取上述样品处理滤液40.0mL于50mL比色管中+2.0ml 4g/L对氨基苯磺酸溶液混匀，静置3min-5min +1.0ml 2g/L盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，待测。——————————————————————————————————————————————————————Ⅴ
实验操作（分光光度计检测）分光光度计调零方法：
1.接通电源，打开仪器开关，掀开样品室暗箱盖，预热10分钟。
3.转动波长选择钮转至538nm。
4.将空白液（ps：浓度为0.00比色管）倒入比色杯3/4处，用擦镜纸擦清外
5、壁，放入样品室内，使空白管对准光路。
5.在暗箱盖开启状态下调节零（新机），旧的：插入黑管关闭暗箱调零。
6.盖上暗箱盖，调节“100”调节器，使空白管的t=100，指针稳定后逐步拉出样品滑竿，分别读出测定管的吸光度值，并记录。
7.比色完毕，关上电源，取出比色皿洗净，样品室用软布或软纸擦净。
Ⅳ 用比色皿以零管（0.00ml比色管）调零，于波长538nm处测定吸光度，绘制标准曲线。
NaNO2标准曲线的制作
NaNO2含量（µg）
0.0
1.0
2.0
3.0
4.0
5.0
7.5
10.0
12.5
吸光度
A
6、
Ⅴ 测定吸光度。样品的吸光度：A1 = A2 =
用Excel制作标准曲线流程
规范书写：
由标准曲线y=Bx+z PS:曲线由Excel表得出
代入样品吸光度（y）A1、A2样品吸光度
得:NaNO2（x）质量A1= ，A2=样品中亚硝酸钠的质量
由公式X1—试样中亚硝酸钠的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；A1——测定用样液中亚硝酸钠的质量，单位为微克（µg）；
m——试样质量，单位为克（g）；V1—测定用样液体积40ml，单位为毫升（mL）；V0—试样处理液总体积250ml，单位为毫升（mL）
计算结果保留两位有效数字。
得
X1=A1×1000m1×40250×1000= mg/kg，X2=A2×1000m2×40250×1000= mg/kg
精密度=|x1-x2|x1+x22= %
¬X=x1+x22= mg/kg
样品中亚硝酸盐的含量（以NaNO2计）= mg/kg
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