ImageVerifierCode 换一换
格式:PPT , 页数:29 ,大小:1.33MB ,
资源ID:2302544      下载积分:10 金币
验证码下载
登录下载
邮箱/手机:
验证码: 获取验证码
温馨提示:
支付成功后,系统会自动生成账号(用户名为邮箱或者手机号,密码是验证码),方便下次登录下载和查询订单;
特别说明:
请自助下载,系统不会自动发送文件的哦; 如果您已付费,想二次下载,请登录后访问:我的下载记录
支付方式: 支付宝    微信支付   
验证码:   换一换

开通VIP
 

温馨提示:由于个人手机设置不同,如果发现不能下载,请复制以下地址【https://www.zixin.com.cn/docdown/2302544.html】到电脑端继续下载(重复下载【60天内】不扣币)。

已注册用户请登录:
账号:
密码:
验证码:   换一换
  忘记密码?
三方登录: 微信登录   QQ登录  
声明  |  会员权益     获赠5币     写作写作

1、填表:    下载求助     留言反馈    退款申请
2、咨信平台为文档C2C交易模式,即用户上传的文档直接被用户下载,收益归上传人(含作者)所有;本站仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。所展示的作品文档包括内容和图片全部来源于网络用户和作者上传投稿,我们不确定上传用户享有完全著作权,根据《信息网络传播权保护条例》,如果侵犯了您的版权、权益或隐私,请联系我们,核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
3、文档的总页数、文档格式和文档大小以系统显示为准(内容中显示的页数不一定正确),网站客服只以系统显示的页数、文件格式、文档大小作为仲裁依据,个别因单元格分列造成显示页码不一将协商解决,平台无法对文档的真实性、完整性、权威性、准确性、专业性及其观点立场做任何保证或承诺,下载前须认真查看,确认无误后再购买,务必慎重购买;若有违法违纪将进行移交司法处理,若涉侵权平台将进行基本处罚并下架。
4、本站所有内容均由用户上传,付费前请自行鉴别,如您付费,意味着您已接受本站规则且自行承担风险,本站不进行额外附加服务,虚拟产品一经售出概不退款(未进行购买下载可退充值款),文档一经付费(服务费)、不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
5、如你看到网页展示的文档有www.zixin.com.cn水印,是因预览和防盗链等技术需要对页面进行转换压缩成图而已,我们并不对上传的文档进行任何编辑或修改,文档下载后都不会有水印标识(原文档上传前个别存留的除外),下载后原文更清晰;试题试卷类文档,如果标题没有明确说明有答案则都视为没有答案,请知晓;PPT和DOC文档可被视为“模板”,允许上传人保留章节、目录结构的情况下删减部份的内容;PDF文档不管是原文档转换或图片扫描而得,本站不作要求视为允许,下载前自行私信或留言给上传者【快乐****生活】。
6、本文档所展示的图片、画像、字体、音乐的版权可能需版权方额外授权,请谨慎使用;网站提供的党政主题相关内容(国旗、国徽、党徽--等)目的在于配合国家政策宣传,仅限个人学习分享使用,禁止用于任何广告和商用目的。
7、本文档遇到问题,请及时私信或留言给本站上传会员【快乐****生活】,需本站解决可联系【 微信客服】、【 QQ客服】,若有其他问题请点击或扫码反馈【 服务填表】;文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“【 版权申诉】”(推荐),意见反馈和侵权处理邮箱:1219186828@qq.com;也可以拔打客服电话:4008-655-100;投诉/维权电话:4009-655-100。

注意事项

本文(生物化学实验期末蚕豆病设计性实验报告.ppt)为本站上传会员【快乐****生活】主动上传,咨信网仅是提供信息存储空间和展示预览,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容不做任何修改或编辑。 若此文所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知咨信网(发送邮件至1219186828@qq.com、拔打电话4008-655-100或【 微信客服】、【 QQ客服】),核实后会尽快下架及时删除,并可随时和客服了解处理情况,尊重保护知识产权我们共同努力。
温馨提示:如果因为网速或其他原因下载失败请重新下载,重复下载【60天内】不扣币。 服务填表

生物化学实验期末蚕豆病设计性实验报告.ppt

1、生物化学生物化学实验实验期末蚕豆病期末蚕豆病设计设计性性实验报实验报告告案例分析案例分析 案例分析案例分析v案例:案例:v 患儿,男性,患儿,男性,3岁,因岁,因面色苍白伴血尿面色苍白伴血尿1天入院。天入院。1天前天前食用新鲜蚕豆食用新鲜蚕豆后,今日出现后,今日出现恶心、呕吐、排尿呈酱油样恶心、呕吐、排尿呈酱油样(发生溶血性贫血)色(发生溶血性贫血)色,面色苍白。据家长反映,患者的,面色苍白。据家长反映,患者的姐姐也曾发生过类似情况。姐姐也曾发生过类似情况。v 体格检查:体格检查:体温体温38,脉搏脉搏150次次/分分,呼吸呼吸40次次/分分,血压血压80/60mmHg,呼吸急促,神清,萎靡,

2、面色苍白,呼吸急促,神清,萎靡,面色苍白,皮肤及巩皮肤及巩c膜黄染膜黄染,体型较同龄人瘦小。心、肺未及异常,体型较同龄人瘦小。心、肺未及异常,肝、脾未触及,双肾区无叩击痛,神经系统检查未及异常。肝、脾未触及,双肾区无叩击痛,神经系统检查未及异常。实验室检查:实验室检查:红细胞红细胞 1.981012/L,血红蛋白血红蛋白53g/L,血清,血清总胆红素总胆红素85.5mol/L,结合胆红素,结合胆红素13.7mol/L,未结合,未结合胆红素胆红素71.8mol/L,尿蛋白(,尿蛋白(+),潜血),潜血(+),尿胆红素,尿胆红素(),尿胆素原,尿胆素原(+),尿液镜下未见红细胞。,尿液镜下未见红细

3、胞。红细胞红细胞 1.981012/L (6.0-7.0)1012/L 血红蛋白血红蛋白 53g/L (170-200)g/L 血清总胆红素血清总胆红素 85.5mol/L (3.4-17.1)mol/L 结合胆红素结合胆红素 13.7mol/L 03.42mol/L 未结合胆红素未结合胆红素 71.8mol/L 013.68mol/L 尿蛋白(尿蛋白(+)潜血潜血(+)尿胆红素尿胆红素()尿胆素原尿胆素原(+)实验室检查项目实验室检查项目正常值正常值患儿检查值患儿检查值案例分析案例分析 皮肤及巩膜黄染皮肤及巩膜黄染 黄疸黄疸发病前曾食用发病前曾食用蚕豆蚕豆其姐亦类似病史其姐亦类似病史Bp:8

4、0/60mmHgP:150bpm 排尿呈酱油样排尿呈酱油样溶血性贫血溶血性贫血T:38 体温升高体温升高B:40bpm呼吸急促呼吸急促蚕豆病蚕豆病红细胞葡萄糖红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症磷酸脱氢酶缺乏症1案例分析案例分析设计实验设计实验 G6PD基因分析基因分析G6PD确诊试验确诊试验红细胞红细胞G6PD活性测定活性测定G6PD荧光斑点试验荧光斑点试验G6PD筛选试验筛选试验高铁血红蛋白还原试验高铁血红蛋白还原试验特异性不高特异性不高国际血液学标准化委员会国际血液学标准化委员会(ICSH)推荐推荐 实验设计实验设计G6PDG6PD荧光斑点试验荧光斑点试验22 G6PD 实验原理:实验原理

5、:葡萄糖葡萄糖-6-磷酸(磷酸(G6P)在)在G6PD作用下形成作用下形成6-磷酸葡萄糖(磷酸葡萄糖(6PGA),同时使同时使NADP转变为转变为NADPH,后者后者在在340nm波长紫外线照射下产生荧光波长紫外线照射下产生荧光。所以将含有。所以将含有G6P和和NADP等的混合试剂与血混匀,通过观察滤纸上有等的混合试剂与血混匀,通过观察滤纸上有荧光出现荧光出现时间可判断时间可判断G6PD活性活性。NADP NADPH G6P 6PGA实验原理实验原理340nm紫外线荧光荧光试剂:试剂:10mmol/L G6P钠盐、钠盐、7.5mmol/L NADP、1g/dL皂素、皂素、250mmol/L磷酸

6、盐缓冲液(磷酸盐缓冲液(pH7.4),),蒸馏水蒸馏水仪器:仪器:长波紫外灯、滤纸、水浴箱长波紫外灯、滤纸、水浴箱G6PDG6PD荧光斑点试验荧光斑点试验 实验流程实验流程G6PDG6PD荧光斑点试验荧光斑点试验 1反应液的配制:反应液的配制:10mmol/l G6P钠盐钠盐0.1ml、7.5mmol/l NADP0.1ml、1g/dl皂素皂素0.2ml、250mmol/l磷酸盐缓冲磷酸盐缓冲液(液(pH7.4)0.3ml,蒸馏水,蒸馏水0.3ml混匀。混匀。其中除皂素外,均可于其中除皂素外,均可于4下保存半月,皂素必须新鲜下保存半月,皂素必须新鲜配制。反应混合液在室温和冰箱中均不易保存。因此

7、最配制。反应混合液在室温和冰箱中均不易保存。因此最好在临用前根据用量临时混合。好在临用前根据用量临时混合。3.取试管,加取试管,加10l全血全血+100l反应液,混匀,取一滴反应液,混匀,取一滴于滤纸上于滤纸上(第一斑点(第一斑点)作为对照;作为对照;2.2.将上液置于将上液置于3737水浴水浴10min 10min,再取一小滴滴于滤纸,再取一小滴滴于滤纸上上(第二斑点)(第二斑点)实验组实验组 ;4.晾干后,于长波紫外灯下(晾干后,于长波紫外灯下(365nm)观察结果并计时)观察结果并计时。实验流程实验流程G6PDG6PD荧光斑点试验荧光斑点试验 正常人:正常人:0min0min斑点无荧光,

8、斑点无荧光,5-10min5-10min出现,出现,10min10min荧光最强荧光最强 临床诊断:临床诊断:轻度缺陷者:轻度缺陷者:0-10min0-10min荧光很弱或不出现荧光很弱或不出现 中度缺陷者:中度缺陷者:10-30min10-30min出现荧光出现荧光 严重缺陷者:严重缺陷者:30min30min内不出现荧光内不出现荧光结果分析结果分析G6PDG6PD荧光斑点试验荧光斑点试验 红细胞红细胞G6PDG6PD活性测定活性测定实验原理:实验原理:基本原理同基本原理同G6PD荧光斑点实验。不同的是荧光斑点实验。不同的是利用利用紫外光分光光度法紫外光分光光度法定量测定酶活性,即每隔一分钟

9、定量测定酶活性,即每隔一分钟在在340nm波长测定孵育液中波长测定孵育液中NADPH吸光度(测吸光度(测6次),次),求求每分钟吸光度增加的平均值每分钟吸光度增加的平均值,根据单位时间内根据单位时间内NADPH生成由于所用试剂及体系的不同。生成由于所用试剂及体系的不同。方法:方法:WHOWHO推荐的推荐的ZinkhamZinkham;NBT;NBT定量法等定量法等实验原理实验原理 G-6-PD活性测定的操作表(Zinkham法)试管 对照管 测定管 NADP液(ml)0.1 0.1Tris液(ml)0.1 0.1氯化镁液(ml)0.1 0.1蒸馏水(ml)0.68 0.58G6P液(ml)0.

10、1 37预热溶血液(l)20 20立即340nm处测吸光度,以对照管调零,37恒温,每分钟观察1次,记录吸光度的变化实验流程实验流程红细胞红细胞G6PDG6PD活性测定活性测定计算公式:G-6-PD活性(U/gHb)=A/min1000/6.221020/20 Hb(gL-1)A/min:每min吸光度的平均变化值1000/6.22:为微摩尔消光系数1020/20:总容量与溶血液的量之比;实验流程实验流程红细胞红细胞G6PDG6PD活性测定活性测定G6PD缺陷者:G6PD活性较正常平均值低40%以上即可作出诊断 方法方法 正常值范围正常值范围WHOWHO推荐的推荐的Zinkham (12.01

11、2.09)IU/gHb(37)Zinkham (12.012.09)IU/gHb(37)ICSH推荐的Glock与McLoan法 (8.341.59)IU/gHb(37)NBT定量法 (13.130.0)NBT单位Chapman和Dern法 (2.87.31)IU/gHb(25)结果分析结果分析红细胞红细胞G6PDG6PD活性测定活性测定从生化代谢解释患儿的从生化代谢解释患儿的临床表现和实验室检查结果临床表现和实验室检查结果3GSH的主要作用:的主要作用:保护红细胞内的含硫氢基保护红细胞内的含硫氢基 (-SH)血红蛋白、酶蛋白和膜)血红蛋白、酶蛋白和膜 蛋白的完整性,免遭氧化蛋白的完整性,免遭

12、氧化 与谷胱甘肽过氧化酶共同使与谷胱甘肽过氧化酶共同使 H2O2还原成还原成H2O红细胞红细胞 膜破裂膜破裂溶血性贫血溶血性贫血 (面色苍白)(面色苍白)游离游离Hb肾肾 吸收阈值吸收阈值血红蛋白尿血红蛋白尿/含铁血黄素尿含铁血黄素尿G6PDNADPH+H+GSH红细胞的抗氧化能力红细胞的抗氧化能力血尿、酱油样尿液血尿、酱油样尿液皮肤及巩膜黄染皮肤及巩膜黄染 红细胞红细胞 1.981012/L (6.0-7.0)1012/L 血红蛋白血红蛋白 53g/L (170-200)g/L 血清总胆红素血清总胆红素 85.5mol/L (3.4-17.1)mol/L 结合胆红素结合胆红素 13.7mol

13、/L 03.42mol/L 未结合胆红素未结合胆红素 71.8mol/L 013.68mol/L 尿蛋白(尿蛋白(+)潜血潜血(+)尿胆红素尿胆红素()尿胆素原尿胆素原(+)实验室检查项目实验室检查项目正常值正常值患儿检查值患儿检查值案例分析案例分析体温升高体温升高红细胞破裂红细胞破裂血红蛋白暴露血红蛋白暴露免疫系统攻击免疫系统攻击导致患儿体温升高导致患儿体温升高溶血性贫血溶血性贫血机体缺氧机体缺氧 具有载氧能力的具有载氧能力的Hb含量下降含量下降呼吸急促呼吸急促讨该病发生的分子基础,讨该病发生的分子基础,可以用哪些技术检测什么目的基因可以用哪些技术检测什么目的基因?4检测检测G6PD基因基因

14、 此外还可以用通过扩增葡此外还可以用通过扩增葡G6PD基因第基因第10,11,12,13外显子外显子639bpDNA片段结合寡核苷片段结合寡核苷酸探针斑点杂交技术、酸探针斑点杂交技术、PCR/SSCP分析法、分析法、DNA序列分析、探针技术等方法检测上述基因序列分析、探针技术等方法检测上述基因的点突变。的点突变。体型瘦小与该病症的相关性体型瘦小与该病症的相关性溶血性贫血溶血性贫血体型瘦小体型瘦小缺乏营养缺乏营养营营养养物物质质运运输输不不足足相关相关参考文献参考文献1红细胞葡萄糖红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症磷酸脱氢酶缺乏症OL http:/ 倪福椿倪福椿 邹俊伦邹俊伦 童若春童若春.简易简易G6PD荧光斑点试验荧光斑点试验J.临床检验杂志临床检验杂志,1983(03)3查锡良等查锡良等.肝的生物化学肝的生物化学Z.生物化学,第七版:生物化学,第七版:4194324蚕豆病的基因检测方法蚕豆病的基因检测方法 OL http:/ you!

移动网页_全站_页脚广告1

关于我们      便捷服务       自信AI       AI导航        获赠5币

©2010-2024 宁波自信网络信息技术有限公司  版权所有

客服电话:4008-655-100  投诉/维权电话:4009-655-100

gongan.png浙公网安备33021202000488号   

icp.png浙ICP备2021020529号-1  |  浙B2-20240490  

关注我们 :gzh.png    weibo.png    LOFTER.png 

客服