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第四章 产芽孢的细菌.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第四章 革兰氏阳性产芽孢杆菌,夏 春 教授,中国农业大学动物医学院,预防兽医学教研室,第一节,芽孢杆菌属,(,Bacillus,),炭疽杆菌,B.,anthracis,一、形态及染色特性,G,+,大杆菌,在人工培养基中呈,竹节状长链,。在感染组织的涂片中,单个或呈短链。无鞭毛。在人和动物体内或含血清和碳酸氢钠的培养基中,可形成荚膜,。,在氧气充足、温度适宜,(25-30),的外界环境中或人工培养基上,易形成芽胞。,芽胞呈椭圆形,位于菌体中央,小于菌体的宽度。,需氧。营养要求不高,普通琼脂平板上培养,24,

2、小时,产生直径,2-3mm,的,粗糙型菌落,灰白色、干燥、无光泽、不透明、,边缘不整齐,呈卷发状。,血液平板上早期无溶血环,培养,24,小时后有轻微溶血。,在肉汤中生长后,呈絮状卷绕成团,的沉淀生长,表,面稍混,无菌膜,,中层透明。,明胶穿刺培养,炭疽芽胞杆菌菌落表面的细胞呈曲线排列()金属镀膜,,1500,炭疽芽孢杆菌的芽胞:芽胞细胞质(,SMp,),芽胞类核(,SN,),芽胞细胞膜(,SM,),芽胞细胞壁(,SW,),芽胞皮层(,SCt,),外芽胞膜(,OSM,),和芽胞壳(,SC,)超薄切片,,81,,,000,芽胞胞质体(,SCp,),芽胞细胞膜,(SM),,芽胞细胞壁(,SW,)外芽

3、胞壁(,OSW,),外芽胞膜(,OSM,),芽胞母细胞质(,SMp,),芽胞母细胞膜(,SMM,)和芽胞母细胞壁(,SMW,)超薄切片,,63000,炭疽芽孢杆菌的芽孢:,,发芽中的芽孢,芽胞壳()已崩解;,发芽的芽胞,芽胞壳和胞子囊()均已崩解;,,芽孢已释放,仅存芽胞囊碎片()超薄切片,,28 000,“菌 影”,荚膜具有较强的抗腐败能力,,当菌体因腐败而消失后,仍有残留荚膜,,称为“菌影”。,二、培养特性,需氧。在含青霉素,0.5IU/ml,的,培养基中,细胞壁肽聚糖合成抑制,形成原生质体串,称为,“串珠反应”。,若青霉素加至,10IU/ml,,,则完全不能生长或轻微生长。,三、抵抗力及

4、常用消毒剂,本菌,繁殖体,的抵抗力不强,常用消毒剂均能将其杀死,对青霉素等多种抗生素高度敏感,,芽孢的抵抗力特别强,干燥保存,40,年以上的炭疽芽孢仍有活力。,炭疽芽孢对碘特别敏感,过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等效果较好,可用于皮毛等消毒。,土壤:,黑麦、三叶草等,四、抗原结构,荚膜多肽抗原,具有抗吞噬作用,与毒力有关。,菌体多糖抗原,能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀,称为,Ascoli,试验。此抗原的特异性不高,能与其它芽胞杆菌,甚至,14,型肺炎球菌多糖抗原发生交叉反应。,炭疽毒素,由,保护性抗原(,PA,)、致死因子(,LF,)和水肿因子(,EF,),三种蛋白质形成的复合物。,实验动物

5、五、致病性,本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽,,牛、绵羊、鹿等易感性最强,,马、驼、猪、山羊等次之,犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力,禽类一般不感染。,人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间,.,1,,致病物质:荚膜、炭疽毒素,2,,所致疾病:,败血症,肠炭疽,肺炭疽,咽喉感染,,皮肤炭疽。,传播途径:,接触皮肤炭疽,,食用,肠炭疽,,吸入,肺炭疽,皮肤,炭疽,六、微生物学检查,1,,标本,炭疽病畜尸体严禁剖检,.,防止芽胞形成。,2,,直接涂片检查,取渗出液、血液直接涂片或取新鲜组织作印片,干燥固定后革兰氏染色,若见,有荚膜的典型的竹节状革兰氏阳性大杆菌,,结合临床症状可以作出初

6、步诊断。,3,,涂片,-,特异性荧光抗体染色法,4,,分离培养与鉴定,接种于血琼脂平板和碳酸氢钠平板,培养后观察菌落形态,并作青霉素串珠试验、动物试验等鉴定。,5,,血清学检查,七、防 治,病畜处理:焚烧,免疫预防,抗炭疽血清,治疗以青霉素为首选,四环素、氯霉素等有效。,第二节 梭菌属(,Clostridium,),大多数为严格厌氧。,G+,,能形成芽胞,芽胞直径比菌体粗大。,除产气荚膜梭菌外,均无荚膜。,能产生多种外毒素和侵袭性酶,致病性强。,本节以,魏氏梭菌,为主进行介绍。,产气荚膜杆菌,本菌旧名魏氏梭菌。,在自然界分节极广,可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中,在一定条件下

7、也可,引起多种严重疾病。,一、生物学特性,形态与染色,菌体直杆状,两端钝圆,,0.6-2.4um,l.3-19.0um,,单在,革兰氏阳性。,芽孢大圆,,位于菌体中央或近端,使菌体膨胀,但在一般条件下罕见形成芽孢。多数菌株可形成,荚膜。,二、培养特性,生长迅速,代谢活跃,,45,生长最好,血琼脂平板:,双层溶血环,内环完全溶血,-,毒素,外环不完全溶血,-,毒素,蛋黄琼脂平板:,Nagler,反应,牛奶培养基:,“汹涌发酵”,(,stormy fermentation,),三、致病性,致病物质,(,10,种外毒素。,A-E,型),毒素,以,A,型产生量最大,引起血管通透性增加伴大量溶血、组织

8、坏死、肝脏、心功能受损,在气性坏疽的形成中起主要作用,、,、,毒素,引起坏死损伤和血管通透性增加,肠毒素,魏氏梭菌主要和次要毒素及其分型,所致疾病,气性坏疽,主要由,A,型产气荚膜梭菌,引起,致病条件与破伤风梭菌相同,潜伏期短,发展迅速,病情险恶,死亡率高,,以组织坏死,气肿和全身中毒为特征,组织坏死、血管内皮损伤,通透性上升,出血、水肿、局部坏死,分解糖产气,压迫软组织、血管,加重组织坏死(捻发音),分解组织,病变迅速扩散,,引起全身中毒症状,气性坏疽,食物中毒,食入被大量细菌污染的食物(多为肉类),临床表现:腹痛、腹胀、水样腹泻;可自愈,四、微生物学检查,直接涂片镜检,深部创口取材涂片,革

9、兰阳性大杆菌,白细胞少且不典型,伴有其它杂菌,早期诊断能避免病人最终截肢或死亡,五、分离培养及动物实验,接种血平板或庖肉培养基,镜检及生化反应鉴定,动物实验,如怀疑食物中毒,在发病后一日内,检出大于,10,5,病菌,/,克食品或,10,6,病菌,/,克粪便可确立诊断,六、防治原则,预防,及时处理伤口,破坏和消除厌氧微环境,预防性的使用抗生素,治疗,局部感染的处理,抗生素,抗毒素,高压氧舱法,二、破伤风梭菌,破伤风 系破伤风梭菌经创伤感染,在感染部位发育繁殖,产生毒素而引起疾病(毒血症)。,此病症状极其特征,通常不需微生物学诊断。,毒素,产生两种毒素。一种为,破伤风痉挛毒素,,毒力非常强,为蛋白

10、外毒素,可引起,神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛,。另一种为,破伤风溶血素,,不耐热,对氧敏感,与致病性无关。破伤风梭菌毒素具有良好抗原性,用它制成类毒素。,三、肉毒梭菌,本菌广泛分布于土壤,动物肠道,饲料以及食品中。不能在活的机体内生长繁殖。,当有适宜营养和厌氧环境时,,即可生长繁殖并,产生肉毒毒素,。人畜食人含此毒素的食品、饲料或其他物品,即可中毒而发生肉毒中毒症。,免疫防治,在常发地区,可用明矾沉淀类毒素预防注射,有效免,0.5-1,年。人畜一旦出现肉毒中毒症,可立即用,多价抗毒素,(或同型抗毒素)血清进行治疗。,本章重点,炭疽杆菌的形态、染色特点、培养特性、微生物学诊断方法与注意事项,对人畜的致病性等。,梭菌属的培养方法、致病特点、诊断方法等,其中以魏氏梭菌为主。,

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