第四章 产芽孢的细菌.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第四章 革兰氏阳性产芽孢杆菌,夏 春 教授,中国农业大学动物医学院,预防兽医学教研室,第一节,芽孢杆菌属,（,Bacillus,）,炭疽杆菌,B.,anthracis,一、形态及染色特性,G,+,大杆菌，在人工培养基中呈,竹节状长链,。在感染组织的涂片中，单个或呈短链。无鞭毛。在人和动物体内或含血清和碳酸氢钠的培养基中,可形成荚膜,。,在氧气充足、温度适宜,(25-30),的外界环境中或人工培养基上,易形成芽胞。,芽胞呈椭圆形，位于菌体中央，小于菌体的宽度。,需氧。营养要求不高，普通琼脂平板上培养,24,小时，产生直径,2-3mm,的,粗糙型菌落，灰白色、干燥、无光泽、不透明、,边缘不整齐，呈卷发状。,血液平板上早期无溶血环，培养,24,小时后有轻微溶血。,在肉汤中生长后,呈絮状卷绕成团,的沉淀生长，表,面稍混，无菌膜，,中层透明。,明胶穿刺培养,炭疽芽胞杆菌菌落表面的细胞呈曲线排列（）金属镀膜，,1500,炭疽芽孢杆菌的芽胞：芽胞细胞质（,SMp,），芽胞类核（,SN,），芽胞细胞膜（,SM,），芽胞细胞壁（,SW,），芽胞皮层（,SCt,），外芽胞膜（,OSM,），和芽胞壳（,SC,）超薄切片，,81,，,000,芽胞胞质体（,SCp,），芽胞细胞膜,(SM),，芽胞细胞壁（,SW,）外芽胞壁（,OSW,），外芽胞膜（,OSM,），芽胞母细胞质（,SMp,），芽胞母细胞膜（,SMM,）和芽胞母细胞壁（,SMW,）超薄切片，,63000,炭疽芽孢杆菌的芽孢：,，发芽中的芽孢，芽胞壳（）已崩解；,发芽的芽胞，芽胞壳和胞子囊（）均已崩解；,，芽孢已释放，仅存芽胞囊碎片（）超薄切片，,28 000,“菌 影”,荚膜具有较强的抗腐败能力，,当菌体因腐败而消失后，仍有残留荚膜，,称为“菌影”。,二、培养特性,需氧。在含青霉素,0.5IU/ml,的,培养基中，细胞壁肽聚糖合成抑制，形成原生质体串，称为,“串珠反应”。,若青霉素加至,10IU/ml,，,则完全不能生长或轻微生长。,三、抵抗力及常用消毒剂,本菌,繁殖体,的抵抗力不强，常用消毒剂均能将其杀死，对青霉素等多种抗生素高度敏感，,芽孢的抵抗力特别强，干燥保存,40,年以上的炭疽芽孢仍有活力。,炭疽芽孢对碘特别敏感，过氧乙酸、环氧乙烷、次氯酸钠等效果较好，可用于皮毛等消毒。,土壤：,黑麦、三叶草等,四、抗原结构,荚膜多肽抗原,具有抗吞噬作用，与毒力有关。,菌体多糖抗原,能与特异性抗体发生反应形成环状沉淀，称为,Ascoli,试验。此抗原的特异性不高，能与其它芽胞杆菌，甚至,14,型肺炎球菌多糖抗原发生交叉反应。,炭疽毒素,由,保护性抗原（,PA,）、致死因子（,LF,）和水肿因子（,EF,）,三种蛋白质形成的复合物。,实验动物,五、致病性,本菌可引致各种家畜、野兽和人类的炭疽，,牛、绵羊、鹿等易感性最强，,马、驼、猪、山羊等次之，犬、猫、食肉兽等则有相当大的抵抗力，禽类一般不感染。,人类对炭疽杆菌的易感性介于食草动物与猪之间,.,1,，致病物质：荚膜、炭疽毒素,2,，所致疾病：,败血症，肠炭疽，肺炭疽，咽喉感染，,皮肤炭疽。,传播途径：,接触皮肤炭疽，,食用,肠炭疽，,吸入,肺炭疽,皮肤,炭疽,六、微生物学检查,1,，标本,炭疽病畜尸体严禁剖检,.,防止芽胞形成。,2,，直接涂片检查,取渗出液、血液直接涂片或取新鲜组织作印片，干燥固定后革兰氏染色，若见,有荚膜的典型的竹节状革兰氏阳性大杆菌，,结合临床症状可以作出初步诊断。,3,，涂片,-,特异性荧光抗体染色法,4,，分离培养与鉴定,接种于血琼脂平板和碳酸氢钠平板，培养后观察菌落形态，并作青霉素串珠试验、动物试验等鉴定。,5,，血清学检查,七、防 治,病畜处理：焚烧,免疫预防,抗炭疽血清,治疗以青霉素为首选，四环素、氯霉素等有效。,第二节 梭菌属（,Clostridium,）,大多数为严格厌氧。,G+,，能形成芽胞，芽胞直径比菌体粗大。,除产气荚膜梭菌外，均无荚膜。,能产生多种外毒素和侵袭性酶，致病性强。,本节以,魏氏梭菌,为主进行介绍。,产气荚膜杆菌,本菌旧名魏氏梭菌。,在自然界分节极广，可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中，在一定条件下，也可,引起多种严重疾病。,一、生物学特性,形态与染色,菌体直杆状，两端钝圆，,0.6-2.4um,l.3-19.0um,，单在，革兰氏阳性。,芽孢大圆,，位于菌体中央或近端，使菌体膨胀，但在一般条件下罕见形成芽孢。多数菌株可形成,荚膜。,二、培养特性,生长迅速，代谢活跃，,45,生长最好,血琼脂平板：,双层溶血环,内环完全溶血,-,毒素,外环不完全溶血,-,毒素,蛋黄琼脂平板：,Nagler,反应,牛奶培养基：,“汹涌发酵”,（,stormy fermentation,）,三、致病性,致病物质,（,10,种外毒素。,A-E,型）,毒素,以,A,型产生量最大,引起血管通透性增加伴大量溶血、组织坏死、肝脏、心功能受损,在气性坏疽的形成中起主要作用,、,、,毒素,引起坏死损伤和血管通透性增加,肠毒素,魏氏梭菌主要和次要毒素及其分型,所致疾病,气性坏疽,主要由,A,型产气荚膜梭菌,引起,致病条件与破伤风梭菌相同,潜伏期短，发展迅速，病情险恶，死亡率高，,以组织坏死，气肿和全身中毒为特征,组织坏死、血管内皮损伤，通透性上升,出血、水肿、局部坏死,分解糖产气，压迫软组织、血管,加重组织坏死（捻发音）,分解组织，病变迅速扩散，,引起全身中毒症状,气性坏疽,食物中毒,食入被大量细菌污染的食物（多为肉类）,临床表现：腹痛、腹胀、水样腹泻；可自愈,四、微生物学检查,直接涂片镜检,深部创口取材涂片,革兰阳性大杆菌,白细胞少且不典型,伴有其它杂菌,早期诊断能避免病人最终截肢或死亡,五、分离培养及动物实验,接种血平板或庖肉培养基，镜检及生化反应鉴定,动物实验,如怀疑食物中毒，在发病后一日内，检出大于,10,5,病菌,/,克食品或,10,6,病菌,/,克粪便可确立诊断,六、防治原则,预防,及时处理伤口，破坏和消除厌氧微环境,预防性的使用抗生素,治疗,局部感染的处理,抗生素,抗毒素,高压氧舱法,二、破伤风梭菌,破伤风 系破伤风梭菌经创伤感染，在感染部位发育繁殖，产生毒素而引起疾病（毒血症）。,此病症状极其特征，通常不需微生物学诊断。,毒素,产生两种毒素。一种为,破伤风痉挛毒素,，毒力非常强，为蛋白外毒素，可引起,神经兴奋性的异常增高和骨骼肌痉挛,。另一种为,破伤风溶血素,，不耐热，对氧敏感，与致病性无关。破伤风梭菌毒素具有良好抗原性，用它制成类毒素。,三、肉毒梭菌,本菌广泛分布于土壤，动物肠道，饲料以及食品中。不能在活的机体内生长繁殖。,当有适宜营养和厌氧环境时，,即可生长繁殖并,产生肉毒毒素,。人畜食人含此毒素的食品、饲料或其他物品，即可中毒而发生肉毒中毒症。,免疫防治,在常发地区，可用明矾沉淀类毒素预防注射，有效免,0.5-1,年。人畜一旦出现肉毒中毒症，可立即用,多价抗毒素,（或同型抗毒素）血清进行治疗。,本章重点,炭疽杆菌的形态、染色特点、培养特性、微生物学诊断方法与注意事项，对人畜的致病性等。,梭菌属的培养方法、致病特点、诊断方法等，其中以魏氏梭菌为主。,