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高考生物复习第十二单元生物技术实践第二讲微生物的培养与应用全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖P.pptx

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,第二讲微生物培养与应用,第1页,营养物质,生长繁殖,无机盐,碳,氮,液体培养基,判别,称量,灭菌,倒平板,第2页,消毒和灭菌,酒精,灼烧,高压蒸汽,无菌,50,第3页,连续划线,菌落,抑制或阻止,第4页,菌落数,尿素,酚红,刚果红,透明圈,第5页,纤维素,纤维二糖和葡萄糖,富含纤维素,增加纤维素菌浓度,以确保能够从样品中分离到所,需要微生物,产生透明圈,第6页,方法,先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,在倒平板时就加入刚果红,过程,培养基长出菌落覆盖CR溶液(质量浓度为1 mg/mL),倒去CR

2、溶液加入NaCl溶液(物质量浓度为,1 mol/L)倒掉NaCl溶液产生透明圈,配制CR溶液(质量浓度为10 mg/mL)灭菌按照1 mL CR溶液/200 mL培养基百分比混匀倒平板培养透明圈,优点,显示出颜色反应基本上是纤维素分解菌作用,操作简便,不存在菌落混杂问题,第7页,考点一,微生物培养基及其应用,考点一,考点二,考点三,营养要素,起源,功效,碳源,无机,碳源,有机,碳源,CO,2,、,NaHCO,3,、,CaCO,3,等含碳无机物,糖类、脂质、蛋白质、有,机酸、石油、花生粉饼等,组成细胞中物质和一些代谢产物,有些既是碳源又是能源,第8页,考点一,考点一,考点二,考点三,营养要素,起

3、源,功效,氮源,无机,氮源,有机,氮源,NH,3,、铵盐、硝酸盐、,N,2,等,将无机氮合成含氮,代谢产物,生长因子,牛肉膏、蛋白胨、核酸、,尿素、氨基酸,合成蛋白质、核酸及含,氮代谢产物,维生素、氨基酸、碱基,酶和核酸组成成份,参加代谢过程中酶促反应,第9页,考点一,考点一,考点二,考点三,划分,标准,培养基种类,特点,应用,物理,性质,液体培养基,不加凝固剂,工业生产,半固体培养基,固体培养基,加凝固剂,(,如琼脂,),观察微生物运动、,分类判定,微生物分离、判定、,活菌计数、菌种保藏,第10页,考点一,考点一,考点二,考点三,划分,标准,培养基,种类,特点,应用,用途,选择培,养基,判别

4、培,养基,培养基中加入某种,化学物质,以抑制,不需要微生物,生长,促进所需,微生物生长,培养、分离出特定微生物,(,如,培养酵母菌和霉菌,可在培,养基中加入青霉素;以尿素,为唯一氮源培养基用于分,离分解尿素细菌,),依据微生物代谢,特点,在培养基中,加入某种指示剂或,化学药品,判别不一样种类微生物,(,如,可用伊红,美蓝培养基判别,饮用水或乳制品中是否有大,肠杆菌,),第11页,考点一,考点一,考点二,考点三,划分标准,化学成份,培养基种类,特点,应用,天然培养基,合成培养基,含化学成份不明确天,然物质,培养基成份明确,(,用化,学成份已知化学物,质配成,),工业生产,分类、判别,第12页,考

5、点一,考点一,考点二,考点三,第13页,考点一,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第14页,考点一,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第15页,考点一,考点一,考点二,考点三,牛肉膏,蛋白胨,NaCl,琼脂,蒸馏水,5.0 g,10.0 g,5.0 g,20.0 g,定容至,1 000 mL,解析,试题,答案,第16页,考点一,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第17页,考点二,微生物培养,考点一,考点二,考点三,第18页,考点二,考点一,考点二,考点三,方法,平板划线法,稀释涂布平板法,操作,过程,平板划线法中细胞分,离和稀释过程发生在接,种环在固体平板表面上,划线和

6、移动过程中。,在线开始部分,微生,物往往连在一起生长,,伴随线延伸,菌体数,逐步降低,最终可能形,成纯种单个菌落,将分别盛有,9 mL,水,6,支试管灭菌,并按,10,1,10,6,次序编号;,用移液管吸收,1 mL,培养菌液,注入,10,1,倍稀释试管中。用手指轻压移液管上橡皮头,吹吸,3,次,使菌液与水充分混匀;,从,10,1,倍稀释试管中吸收,1 mL,稀释液,注入,10,2,倍稀释试管中,重复步混匀操作。依次类推,直到完成最终,1,支试管稀释,第19页,考点二,考点一,考点二,考点三,方法,注意,事项,接种环灼烧,a.,第一次划线前:杀死接种环上微生物,防止污染培养物;,b.,每次划线

7、前:杀死残留菌种,确保每次划线菌种来自上一次划线末端;,c.,划线结束后:杀死残留菌种,防止污染环境和感染操作者,灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种;,划线时最终一区域不要与第一区域相连;,划线用力要大小适当,预防用力过大将培养基划破,稀释操作时:每支试管及其中,9 mL,水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰,1,2 cm,处,涂布平板时:,a.,涂布器用体积分数为,70%,酒精消毒,取出时,让多出酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少许酒精涂布器在酒精灯火焰上引燃;,b.,不要将过热涂布器放在盛放酒精烧杯中,以免引燃其中酒精;,c.,酒精灯与培养皿距离要适当,

8、移液管管头不要接触任何物体,平板划线法,稀释涂布平板法,第20页,考点二,考点一,考点二,考点三,方法,目标,平板划线法,稀释涂布平板法,培养,在培养基上形成由单个菌种繁殖而来子细胞群体,菌落,平板冷凝后倒置培养,使培养基表面水分更加好地挥,发,预防皿盖上水珠落入培养基造成污染,第21页,考点二,考点一,考点二,考点三,条件,结果,惯用方法,应用范围,消毒,灭菌,较为温,和物,理或化,学方法,强烈理,化原因,仅杀死物体表面,或内部部分微,生物,(,不包含芽孢,和孢子,),杀死物体内外所,有微生物,(,包含,芽孢和孢子,),煮沸消毒法,巴氏消毒法,化学药剂消毒法,日惯用具,不耐高温液体,用酒精擦

9、拭双手,用,氯气消毒水源,接种工具,灼烧灭菌法,干热灭菌法,玻璃器皿、金属工具,培养基及相关容器,高压蒸汽灭菌法,第22页,考点二,考点一,考点二,考点三,第23页,考点二,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第24页,考点二,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第25页,考点三,微生物纯化培养技术与筛选计数,考点一,考点二,土壤,采样,选择,培养,土壤中尿素分解菌,分离试验,土壤中纤维素分解菌分离试验,采集土壤应该选择,含有尿素土壤,采集土样应选择富含纤维素环境,选择土样,将土样放,在含有尿素作为唯一,氮源培养基上进行,选择培养,取土样,在无菌条件下装入锥形,瓶,在一定条件下振荡

10、培养,1,2 d,,直到培养液混浊。选择培养目标是增加纤维素分解菌纯度,确保分离得到所需微生物,考点三,第26页,考点三,考点一,考点二,土壤中尿素分解,菌分离试验,土壤中纤维素分,解菌分离试验,梯度稀释,选取一定稀释范围样品,液进行培养以确保菌落数,在,30,300,依次将培养液稀释,10,1,到,10,7,倍,判定方法,在以尿素为唯一氮源培养,基中加入酚红指示剂,培养,某种细菌,若指示剂变红,,则,pH,升高,说明该种菌能,分解尿素,刚果红染色法,即在含有纤维,素培养基中,加入刚果红时,,刚果红与培养基中纤维素形,成红色复合物。当纤维素被分,解后,该复合物不能形成,培,养基中出现以纤维素分

11、解菌为,中心透明圈,考点三,第27页,考点三,考点一,考点二,考点三,第28页,考点三,考点一,考点二,考点三,第29页,考点三,考点一,考点二,考点三,第30页,考点三,考点一,考点二,考点三,对照组,作用,现象,结论,未接种培养基,有没有杂菌污染,判断,未接种培养皿中,无菌落生长,未被杂菌污染,接种牛肉膏,蛋白胨培养基,选择培养基筛,选作用确实认,牛肉膏培养基上,菌落数大于选择培,养基上数目,选择培养基具,有筛选作用,第31页,考点三,考点一,考点二,考点三,第32页,考点三,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第33页,考点三,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第34页,考

12、点三,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第35页,考点三,考点一,考点二,考点三,解析,试题,答案,第36页,考向一,微生物试验室培养,考向一,考向二,解析,试题,答案,第37页,考向一,考向一,考向二,解析,试题,答案,第38页,考向一,考向一,考向二,解析,试题,答案,第39页,考向一,考向一,考向二,解析,试题,答案,第40页,考向一,考向一,考向二,解析,试题,答案,第41页,考向一,考向一,考向二,解析,试题,答案,第42页,考向二,微生物分离与纯化,考向一,考向二,解析,试题,答案,第43页,考向二,考向一,考向二,解析,试题,答案,第44页,考向二,考向一,考向二,解析,

13、试题,答案,第45页,解析,试题,答案,第46页,解析,试题,答案,第47页,解析,试题,答案,第48页,解析,试题,答案,第49页,解析,试题,答案,第50页,酵母膏,无机盐,淀粉,纤维素粉,琼脂,CR,溶液,水,培养基甲,培养基乙,解析,试题,答案,第51页,解析,试题,答案,第52页,解析,试题,答案,第53页,解析,试题,答案,第54页,解析,试题,答案,第55页,解析,试题,答案,第56页,解析,试题,答案,第57页,解析,试题,答案,第58页,解析,试题,答案,第59页,解析,试题,答案,第60页,解析,试题,答案,第61页,解析,试题,答案,第62页,解析,试题,答案,第63页,解析,试题,答案,第64页,解析,试题,答案,第65页,

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