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液基制片技术.ppt

1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,LCT,在非,妇科,制片领域的应用,LCT,非妇科液基细胞学制片简介,LCT,非妇科液基细胞学是在,LCT,成功运用于妇科制片的基础上,于近年来推出的一种新的细胞学制片技术。,非妇科标本先通过红色固定液和消化液进行前期处理,祛除杂质成份,再上,PrepStain,制片机完成制片染色,制成镜下观察清晰的薄片,使阅片者更容易观察,其诊断准确性,敏感性比传统涂片明显提高,.,外观比较,传统制片,液基制片,镜下比较,LCT,在非妇科制片领域的应用范围,呼吸道:鼻、咽喉、气管、支气管、肺(痰、刷细胞、冲洗液),消化

2、道:食道、胃、胆道、肠道(刷细胞、胆汁、胰液、冲洗液),泌尿道:肾、输尿管、膀胱(尿及冲洗液),浆膜腔积液:胸腔、腹腔、心包、脑(积液),细针吸取细胞学:包括浅表肿物(乳腺、淋巴结、无名肿物)、深部脏器在影像学(,X,线、,B,超、,CT,)引导下进行,非妇科标本常见来源,痰,,气管镜刷片,,灌洗液,胸水,心包积液,穿刺物,尿,非妇科标本的收集,标本种类,取材注意事项,痰,痰标本的容器,应采用国际通用痰瓶或采用直径,4,厘米、高,2,厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号(门诊序号或病人登记号)及日期。咳取痰标本时要求病人深咳出,住院病人早晨用清水涑口后咳取,咳前不要进食,喝

3、牛奶,否则会影响标本质量。痰标本以脓性粘液样,带有血丝样的为合格,痰量,35,毫升为宜。,胸水,腹水,心包积液,尿液,引流液,这些标本,在量多的时候要求送检体积不小于,50,毫升,可用带橡皮塞的玻璃瓶盛取。如果标本量体积小于,10,毫升,标本质量不满意。,肺泡灌洗液,脑脊液,这些标本,一般取材量较少,将所有标本都收集在小玻璃瓶或带塞的试管中,全部送检。,刷片(支气管镜,胃镜,肠镜),穿刺标本,取,50,毫升离心管加入红色固定液,10,毫升,备用。将内窥镜刷头上的细胞或穿刺针管里的细胞转入离心管中:尽量将刷头反复在红色固定液中涮洗;穿刺针管需来回,5,次吸取红色固定液冲洗。,收集好的标本如果不马

4、上制片,需密闭好,防入冰箱,4,冷藏保存,LCT,非妇科制片操作流程,收集标本,红色固定液,消化液,FLUCK,第一次离心,第二次离心,纱布过滤,具有代表性的随机样本,PAP Smear,PrepStain,转移的细胞不具代表性,细胞堆积并有重叠,阻碍视线的成分,转移的细胞具有代表性,细胞分布均匀,无阻碍视线的成分,痰标本,1,。在申请单上贴好条形码,核对痰标本盒上的病人资料(姓名,年龄,住院号或门诊号等),找准对应的痰标本,向痰盒中加入,5,毫升,CyteRich Red,(红色固定液),用竹签将所有痰标本及红色固定液全部转入,50,毫升离心管。,收集,固定标本,消化,2,。往,50,毫升离

5、心管中加入红色固定液,配齐至,10,毫升。根据标本所含粘液的多少,加,5,到,10,滴消化液,FLUCK,)。摇匀,振荡,静置,30,分钟。静置期间注意观察粘液被消化的情况,肉眼可见粘液块或粘液丝的时候,酌情加入数滴消化液,手工振荡至消化完全。,两次离心,纱布过滤,3,。标本消化完全后,用离心机的,3,号程序离心,10,分钟(离心力为,600g,),离心完成后,倒掉上清液,向,50,毫升离心管中加入,10,毫升缓冲液,振荡。经纱布过滤,将标本转移至,12,毫升离心管。,用离心机的,4,号程序离心,5,分,15,秒(离心力为,600g,)。,振荡,准备上机,4,。离心完成后,倒掉上清液,将聚集在

6、管底的细胞团充分振荡,散开。,上机,将标记好的试剂导入管插入相应的试剂容器中,检查试剂是否充足。,机器制片染色,5,。打开,Prep Stain,系统,于,C:,提示符下输入,NONGYN,以进入主菜单。,从主菜单中选择,1:Transfer and Stain,并且按照提示操作。,从,Prep Stain,系统中移出染色架,倒掉残余液体,移去染色室,将玻片取出,放入酒精异丙醇混合液中,再转入二甲苯中透明,浸泡,5,分钟后封湿片。,LCT,非妇科制片的优势所在,传统涂片,TCT,制片,LCT,制片,前期处理,无,只对含杂质成份多的标本进行简单处理,所有标本都用红色固定液,消化液处理,充分祛除杂质,制片效果,制片厚,杂质成份多,细胞分布分布不均匀,杂质成份较多,细胞有分布不均的现象,背景干净,细胞均匀平铺,阅片质量,易漏诊,误诊,阅片强度大,阅片强度较大,肿瘤细胞特有的三维立体结构丢失,阅片强度最低,保留肿瘤细胞特有的三维立体结构,拓展项目,无,需经过反复处理才能进行免疫组化等项目,可制多张白片,进行免疫组化,特殊染色等项目,LCT,非妇科制片的应用前景,在医学检验多个领域的应用,新的学术研究推动,痰标本筛查,问题及解决办法,1,。标本收集,2,。标本运输,3,。其他,

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