液基制片技术.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,LCT,在非,妇科,制片领域的应用,LCT,非妇科液基细胞学制片简介,LCT,非妇科液基细胞学是在,LCT,成功运用于妇科制片的基础上，于近年来推出的一种新的细胞学制片技术。,非妇科标本先通过红色固定液和消化液进行前期处理，祛除杂质成份，再上,PrepStain,制片机完成制片染色，制成镜下观察清晰的薄片，使阅片者更容易观察，其诊断准确性，敏感性比传统涂片明显提高,.,外观比较,传统制片,液基制片,镜下比较,LCT,在非妇科制片领域的应用范围,呼吸道：鼻、咽喉、气管、支气管、肺（痰、刷细胞、冲洗液）,消化道：食道、胃、胆道、肠道（刷细胞、胆汁、胰液、冲洗液）,泌尿道：肾、输尿管、膀胱（尿及冲洗液）,浆膜腔积液：胸腔、腹腔、心包、脑（积液）,细针吸取细胞学：包括浅表肿物（乳腺、淋巴结、无名肿物）、深部脏器在影像学（,X,线、,B,超、,CT,）引导下进行,非妇科标本常见来源,痰，,气管镜刷片，,灌洗液,胸水,心包积液,穿刺物,尿,非妇科标本的收集,标本种类,取材注意事项,痰,痰标本的容器，应采用国际通用痰瓶或采用直径,4,厘米、高,2,厘米的塑料或涂蜡纸密闭盒。留痰容器上应注明病人姓名、编号（门诊序号或病人登记号）及日期。咳取痰标本时要求病人深咳出，住院病人早晨用清水涑口后咳取，咳前不要进食，喝牛奶，否则会影响标本质量。痰标本以脓性粘液样，带有血丝样的为合格，痰量,35,毫升为宜。,胸水，腹水，心包积液，尿液，引流液,这些标本，在量多的时候要求送检体积不小于,50,毫升，可用带橡皮塞的玻璃瓶盛取。如果标本量体积小于,10,毫升，标本质量不满意。,肺泡灌洗液，脑脊液,这些标本，一般取材量较少，将所有标本都收集在小玻璃瓶或带塞的试管中，全部送检。,刷片（支气管镜，胃镜，肠镜），穿刺标本,取,50,毫升离心管加入红色固定液,10,毫升，备用。将内窥镜刷头上的细胞或穿刺针管里的细胞转入离心管中：尽量将刷头反复在红色固定液中涮洗；穿刺针管需来回,5,次吸取红色固定液冲洗。,收集好的标本如果不马上制片，需密闭好，防入冰箱,4,冷藏保存,LCT,非妇科制片操作流程,收集标本,红色固定液,消化液,FLUCK,第一次离心,第二次离心,纱布过滤,具有代表性的随机样本,PAP Smear,PrepStain,转移的细胞不具代表性,细胞堆积并有重叠,阻碍视线的成分,转移的细胞具有代表性,细胞分布均匀,无阻碍视线的成分,痰标本,1,。在申请单上贴好条形码，核对痰标本盒上的病人资料（姓名，年龄，住院号或门诊号等），找准对应的痰标本，向痰盒中加入,5,毫升,CyteRich Red,（红色固定液），用竹签将所有痰标本及红色固定液全部转入,50,毫升离心管。,收集，固定标本,消化,2,。往,50,毫升离心管中加入红色固定液，配齐至,10,毫升。根据标本所含粘液的多少，加,5,到,10,滴消化液,FLUCK,）。摇匀，振荡，静置,30,分钟。静置期间注意观察粘液被消化的情况，肉眼可见粘液块或粘液丝的时候，酌情加入数滴消化液，手工振荡至消化完全。,两次离心，纱布过滤,3,。标本消化完全后，用离心机的,3,号程序离心,10,分钟（离心力为,600g,）,离心完成后，倒掉上清液，向,50,毫升离心管中加入,10,毫升缓冲液，振荡。经纱布过滤，将标本转移至,12,毫升离心管。,用离心机的,4,号程序离心,5,分,15,秒（离心力为,600g,）。,振荡，准备上机,4,。离心完成后，倒掉上清液，将聚集在管底的细胞团充分振荡，散开。,上机，将标记好的试剂导入管插入相应的试剂容器中，检查试剂是否充足。,机器制片染色,5,。打开,Prep Stain,系统，于,C:,提示符下输入,NONGYN,以进入主菜单。,从主菜单中选择,1:Transfer and Stain,并且按照提示操作。,从,Prep Stain,系统中移出染色架，倒掉残余液体，移去染色室，将玻片取出，放入酒精异丙醇混合液中，再转入二甲苯中透明，浸泡,5,分钟后封湿片。,LCT,非妇科制片的优势所在,传统涂片,TCT,制片,LCT,制片,前期处理,无,只对含杂质成份多的标本进行简单处理,所有标本都用红色固定液，消化液处理，充分祛除杂质,制片效果,制片厚，杂质成份多，细胞分布分布不均匀,杂质成份较多，细胞有分布不均的现象,背景干净，细胞均匀平铺,阅片质量,易漏诊，误诊，阅片强度大,阅片强度较大，肿瘤细胞特有的三维立体结构丢失,阅片强度最低，保留肿瘤细胞特有的三维立体结构,拓展项目,无,需经过反复处理才能进行免疫组化等项目,可制多张白片，进行免疫组化，特殊染色等项目,LCT,非妇科制片的应用前景,在医学检验多个领域的应用,新的学术研究推动,痰标本筛查,问题及解决办法,1,。标本收集,2,。标本运输,3,。其他,