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高效液相色谱仿真实验.doc

1、高效液相色谱仿真实验 一、实验概述: 以液体做流动相的色谱称为液相色谱。人们把已经比较成熟的气相色谱理论应用于液相色谱,使液相色谱得到了迅速的发展。随着其他科学技术的发展,出现了新型的高压输液泵、高效的固定相和柱填充技术、高灵敏度的检测器,加上计算机的应用,使得液相色谱实现了高效率和高速度。这种分离效率高、分析速度快的液相色谱称为高效液相色谱(High performance liquid chromatography, HPLC)。 二、实验装置: Agilent(安捷伦)1100系列液相色谱系统简介: Agilent1100系列HPLC组件和系统,将Agilent长

2、期的化学分析经验与领先的计算机技术结合,把网络技术引入了实验室。从1996年以来,在全球已经安装了超过130,000台1100组件和55,000多套化学工作站数据处理系统,成为目前单一型号市场占有率最高的液相色谱系统。 本仿真软件是模拟用Agilent化学工作站的数据处理系统进行样品分析和数据采集(色谱图)的过程。 注:本软件只是模拟分析的过程和内容,并不涉及其原理,所以实验中的参数调节对结果并没有影响,而真实实验结果是随参数的变化而变化的,这一点需要特别注意! 实验主界面: 化学工作站界面: 三、实验操作: 第一步:选取实验 点击主菜单上的

3、实验选取”,会出现如下的对话框: 用鼠标左键点中你要做的实验,此文件名会出现在对话框的“文件名”一栏的文本框 中,在此实验文件上面双击左键或者点击“打开”按钮打开实验文件。 第二步:确认操作条件 点击主菜单上的“操作条件”,会出现如下的操作条件列表: 在实验调节过程中,请以此列表内的条件为准进行调节,否则不能正确输出色谱峰。 第三步:加入试剂 点击仪器上的自动进样器部分(当鼠标移到仪器的各部分时会出现相应的说明),出现如下画面: 点击下面的试剂小瓶,会自动放置到自动进样器的托盘中。 完成后,点击主界面上的电脑启动化学工作站。 第四步

4、编辑方法 击主界面上的电脑启动化学工作站开始编辑方法。 所谓方法就是一个参数集,它包括分析一个样品所需要的所有的参数:数据采集参数、数据分析参数和命令行或者宏指令。 点击菜单“方法→编辑方法”开始编辑方法(注意:此时不可以改变方法的参数,可改变的参数将在下面特别说明): 然后会出现下面的窗口让你选择编辑方法的内容: 用鼠标点击复选框选择要编辑的方法的内容,然后点击“确定”按钮开始方法编辑,点击“取消”按钮终止方法编辑。 开始方法编辑后,系统会根据你选择的内容分别依次显示每一部分的具体内容,点击“确定”按钮进入下一部分,点击“取消”按钮终止方法编辑。 完成方法

5、编辑后,系统会回到主操作界面,此时色谱柱已经开始升温,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示: 特别说明: 对于本实验要改变的参数,可以点击化学工作站软件界面中央的图示的进样器、溶剂系统、色谱柱、检测器等部分,会弹出各部分参数窗口,此时可以按照实验要求的参数进行调节(实验参数可以点击主界面上左边菜单中的“实验数据”按钮察看)。 进样器: 溶剂系统: 色谱柱: 检测器: 编辑方法完成后,在启动系统之前,请返回液相色谱仪,打开二元泵系统,调节Purge阀,观察使回路无汽泡。 第五步:调节Purge阀 点击仪器上的二元泵系统部分(当鼠标移

6、到仪器的各部分时会出现相应的说明),出现如下画面: 图中蓝色方框部分就是Purge阀,此时是关闭的,用鼠标点击蓝色方框部分,会出现Purge阀的放大画面,然后点击Purge阀会自动逆时针方向旋转打开Purge阀。 打开Purge阀后,右边的试剂瓶的导管当中会有气泡流出,待没有气泡再流出之后,再次点击Purge阀会自动逆时针方向旋转关闭Purge阀。然后进行下一步“启动系统”。 第六步:启动系统 完成方法编辑后,点击菜单“设备→系统开”或者图中红色圆圈指示的按钮“开启系统”: 启动系统后,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示:

7、 同时在色谱峰显示区域开始走基线,开始的时候系统不稳定,基线变化很厉害,等到基线走平稳表示系统稳定后,可以开始进样运行方法。 第七步:进样、运行方法 等到状态指示栏显示“Ready”后,表明系统已经准备完毕。点击菜单“运行控制→运行方法”开始进样和分析,或者点击图中红色圆圈所指示的“Start”按钮或者按“F5”键: 开始进样后,在图形界面中会有显示,如下图中红色圆圈标示区域所示: 待色谱图出完后,样品分析完毕。 第八步:完成实验报告 样品分析完成后,点击化学工作站界面上的红色方框部分,或者点击主界面左边菜单中的“实验数据”调出实验报告: 根据得出的保留时间、峰高、半峰宽等实验数据,可以计算分离度等相关参数。如果计算机安装了打印机,可以点击右上角“打印报表”按钮打印实验报告。 第九步:实验完毕(仿真实验不作要求) 完成方法编辑后,点击菜单“设备→系统关”,系统就会自动关闭,不须人工干预。

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