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培养基质量控制.docx

1、培养基质控标准操作规程 1 检验目的对商品化的培养基进行质量检测，保证培养基的质量。 2 检验原理培养基应该是无菌的,选择培养基会根据相应的细菌选择性生长，可以保证细菌所需要生长条件，菌落生长良好。 3 步骤 3。1 频率每批次或货次的培养基都要进行质量检测，包括外观质量验收和性能质量验收。 3。2外观验收培养基外观质量验收包括平板有无裂纹、培养皿有无裂纹、充碟是否均匀、溶血情况、污染情况、有无冷冻、过多气泡和斑点、色泽是否均匀.通过肉眼观察后记录。 3.3 性能质量控制 3.3。1培养基质控菌株的选择。参照 WST232—2002商业微生物培养基质量检测规程和厂

2、家说明书. 3。3.2 质控菌株的准备参见《标准菌株使用标准操作规程》。 3.3。3培养基性能检测项目包括：无菌试验、生长试验（营养能力）、菌落生长形态、抑菌试验、 3。3。3。1无菌试验不接种任何菌体选择适宜的培养条件进行培养。 3.3.3。2生长试验（营养能力）用工作质控菌株配置菌悬液,通过比浊仪配到0.5麦氏单位作为基础菌悬液.基础菌悬液用生理盐水100倍稀释，接种0.01ml在待测平板上，使其浓度达到1—2×104CFU/碟。如果不能保证在特定培养基上形成单个菌落，则应10倍稀释接种物. 3。3.3。3抑制试验基础菌悬液用生理盐水10倍稀释，接种0。01ml在待测

3、平板上,使其浓度达到1-2×105CFU/碟。 3。3.3。4根据培养基的种类，选用适宜的温度和二氧化碳,培养18—24小时，同时用空白培养基做阴性对照. 3。3.4次日观察菌落生长情况是典型。 3。3.5每个批号或货次的培养基至少要抽查一块进行室内质控。 3。3。6结果判断 3。3。6。1无菌试验应该无任何微生物生长 3.3.6。2营养能力质控菌在待测培养基上生长并形成典型的菌落形态,则认为培养基效果满意.某些情况下应该有适当的颜色或溶血。 3。3.6.3抑菌试验对于选择性培养基，某些菌被抑制，而所需的细菌充分生长。表1 培养基质量控制标准培养基培养条件

4、质控菌株预期结果典型菌落厌氧羊血琼脂培养基厌氧，35℃，18-24h 脆弱拟杆菌ATCC25285 生长灰白表面光滑边缘整齐产气荚膜梭菌ATCC13124 生长灰白不透明双层溶血环血琼脂平板 35℃，18—24h，5％CO2 肺炎链球菌ATCC49619 生长甲型溶血化脓链球菌ATCC19615 生长乙型溶血金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长乙型溶血奇异变形杆菌生长迁徙生长麦康凯 35℃，18-24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长粉红色菌落粪肠球菌ATCC29212 抑制>90％　

5、 MH 35℃，18—24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长复方新诺明24—32 金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长复方新诺明24—32 营养琼脂 35℃，18—24h 大肠埃希菌ATCC25922 生长　金黄色葡萄球菌ATCC25923 生长　科玛嘉念珠显色 35℃，18—24h 克柔念珠菌ATCC6258 生长粉色模糊菌落大肠埃希菌ATCC25922 抑制　金黄色葡萄球菌ATCC25923 抑制　四号 35℃，18-24h 大肠埃希菌ATCC25922 抑制>90％　粪肠球菌ATCC292

6、12 抑制〉90% 　副溶血弧菌生长半透明中心黑色碱性蛋白胨 35℃，18—24h 副溶血弧菌生长　大肠埃希菌ATCC25922 抑制〉90% 　嗜血杆菌巧克力 35℃,18—24h,5％CO2 流感嗜血杆菌ATCC49247 生长　巧克力 35℃，18—24h,5%CO2 流感嗜血杆菌ATCC49247 生长　淋病奈瑟菌生长　 GC平板 35℃，18-24h，5％CO2 淋病奈瑟菌生长　 HE平板 35℃，18—24h 沙门菌生长黑心志贺菌生长蓝绿色 4 纠正措施采取新的质控菌株(冷冻干粉,可靠来源）及来自不同厂家的新批号的材料.如果问题与制造商有关，联系并将测试结果提供给制造商。也可与使用同样方法的其他实验室交换菌株和材料，有助于找到无法解释的系统误差的根源。 5 参考文献 5。1尚红，王毓三，申子瑜主编。全国临床检验操作规程。第四版。人民卫生出版社，2015 5。2周庭银编著。临床微生物学诊断与图解.第二版.上海科学技术出版社，2007 5.3 WST232-2002商业微生物培养基质量检测规程 5.4培养基厂家说明书 5.5纪邵梅，微生物培养基质控与图解。北京:北京科学技术出版社，2006。