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,单击此处编辑母版标题样式,#,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,家畜的精液品质检查,实验目的,掌握精子密度计数法测定精液密度方法;,掌握精子形态的分类和分析方法,;,掌握精子活力测定方法。,实验材料,材料:新鲜公猪精液,器械及用品:显微镜、载玻片、玻棒、,0.9%Nacl,溶液、,95%,和,75%,的酒精、染色缸、,3%,盐水、红墨水、血球计数板、计数器、,5ml,试管、移液管(,50,ul,、,1000ul,)。,畸形精子形态图,实验内容,1,、精子密度计数板,(,器,),简介,精子计数室长宽各,1mm,面积,1mm,2,高度,0.1mm,体积,0.1mm,3,由双线或三线组成,25,个,(5,X5),中方格,每个中方格内有,16,个小方格,(4,X4),共计,400,个小方格,(一)精子的密度检查,精子计数室及一个中方格,进行精子计数的中方格数可以是四角一中心共,5,个中方格,也可以是从左角到右下角五个中方格,以图示次序计数,精子的头部为准,依数上不数下,数左不数右的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数,2,、计算精子密度,精子密度,=5,个中方格总精子数,5101000 10,倍,注意:为了减少误差,必须进行,2-3,次计数,求出平均数,即为所确定的精子数。,3.,猪精子密度测定程序,放计数板,于载物台上,取样稀,释精液,精液注入,计数室,镜检,精子计数,密度计算,计数板和盖玻片一定要清洁,取,1800ul 3%,氯化钠于小试管中,加入,200ul,原精液,混合均匀,取,25ul,小心地从计数板与盖玻片的接缝中加入,使其自行吸入计数室中,用,100,倍和,400,倍观察,计数五个中方格的总精子数,计数以头部为准,在格线上的数上不数下,数左不数右,精子密度,=5,个中方格总精子数,5101000 10,1,、精液抹片的制作。,2,、将抹片放于空气中或用酒精灯烘干燥。,3,、置于,95%,酒精中固定,5-6,分钟,取出以水冲洗后,凉干或烘干,,4,、用红墨水染色,3-5,分钟,再用水冲洗,干燥后置于显微镜下检查。,5,、镜检:,将载玻片放在,400,或,600,倍的显微镜下进行观察,共记录若干个视野中,100-200,个左右的精子,(二)畸形率检查,精子的畸形率,=,畸形精子数,/,总精子精,100%,畸形精子,视野中的畸形精子,双头和双尾精子,猪精子活力检查的程序,载玻片,猪精液,取样检查,镜检,活力估测,活力记录,取,1,滴放在载玻片中间,盖上盖玻片,用,100,倍和,400,倍观察,判断视野中前进运动精子占的百分率,按,10,级制评分和记录,(三)精子活率评定,十级制,在显微镜下估计直线前进运动精子所占百分数,直线前进运动精子为,100%,者评为,1.0,级;,90%,者评为,0.9,级,依此类推。,精液活力评定标准,
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