肿瘤发生、浸润与转移有关的基因.ppt

,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,.,*,单击此处编辑母版标题样式,与肿瘤发生有关的基因分子基础,引 言,肿瘤是常见病、多发病。我国常见的十个恶性肿瘤是：,鼻咽癌、肺癌、食管癌、胃癌、大肠癌、肝癌、乳腺癌、子宫颈癌、白血病、淋巴瘤。,肿瘤概念,肿瘤是机体的细胞在各种致瘤因素的作用下，基因发生改变导致克隆性而形成的新生物，并常表现为肿块。,致瘤因素,正常细胞 肿瘤细胞 克隆性,基因改变 增生,一、肿瘤的发病学,肿瘤的发生和演进是在多种因素作用下，经过长期的、多步骤并有多种基因参与的一个过程。,各种因素,正常细胞 肿瘤细胞,一系列基因改变 演进,恶性肿瘤,目前认为是一系列复杂的、多步骤的、肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程。,肿瘤的形成过程：,正常体细胞,基因改变,多克隆性增生,基因改变,单克隆性增生（相对无限性增生）形成肿瘤,附加基因突变,各种亚克隆增生（肿瘤具有异质性）,亚克隆扩增生长异质化,转移性亚克隆,粘附和侵出基底膜,通过细胞外间质,侵入血管,与宿主淋巴样细胞相互作用,瘤细胞栓子,与基底膜粘附,出血管,转移灶形成,目前认为是一系列复杂的、多步骤的、肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程。,结肠癌肿瘤发生是一个多步骤的过程,正常上皮,APC,基因缺失,/,突变,过度增生上皮,DNA,甲基化异常,早期腺瘤,ras,基因突变,中期腺瘤,DCC,基因缺失,晚期腺瘤,p53,基因突变,结肠癌,其他突变,转移癌,家,族,成,员,产,物,src src,abl,fgr,yes,fms,ros,fps,EGF,受体、酪氨酸蛋白,fes,erb-B,mic,raf,mos,等 激酶（,TPK,）,sis sis PDGF,ras H-ras,K-ras,N-ras P21,（,G,蛋白）,myc C-myc,N-myc,L-myc,核内,DNA,结合蛋白,抑癌基因族,P,53,RB,APC,WT,NF,1,NF,2,VHL,P,16,，,PTEN,细胞凋亡,Bax,，,Bcl-2,，,Fas/FasL,，,Survivin,Telomerase,，,Granzyme B,，,P,53,肿瘤转移抑制基因,nm23,等,其他,myt,fas,Blym,Jwn,ski,等,核内,DNA,结合蛋白,肿瘤性的发生是与各种癌基因的激活、各种抑癌基因失活和凋亡调控基因的异常而导致的。,二、肿瘤发生的分子学基础,（一）癌基因,1,癌基因：,是具有潜在的转化细胞能力的基因。,2,病毒癌基因：,某些逆转录病毒含有能够转化细胞,的,RNA,片段，称为病毒癌基因。,3,、原癌基因：,正常细胞中，细胞癌基因以非激活形,式存在就叫原癌基因。,*,4,、细胞癌基因：,正常细胞基因组中存在一大类基因，当它们被激活时，能够促进细胞进行转化，这些已激活的基因叫细胞癌基因。,正常原癌基因编码的蛋白，大多都,是对细胞生长十分重要的,生长因子,和生,长因子的,受体,、,重要的,信号传导蛋白,以及,核调节蛋白。,它们都是刺激细胞增生的因素，所以原癌基因激活后 细胞过度增生 肿瘤。,（二）肿瘤抑制基因,1,概念：,正常细胞内有一类对细胞增殖起 负调节的基因，当它失去抑制活性时，往往会使细胞呈恶性生长，种类基因叫肿瘤抑制基因。,2,常见基因 见表,（三）凋亡调节基因 和,DNA,修复基因,（四）端粒、端粒酶,家,族,成,员,产,物,src src,abl,fgr,yes,fms,ros,fps,EGF,受体、酪氨酸蛋白,fes,erb-B,mic,raf,mos,等 激酶（,TPK,）,sis sis PDGF,ras H-ras,K-ras,N-ras P21,（,G,蛋白）,myc C-myc,N-myc,L-myc,核内,DNA,结合蛋白,抑癌基因族,P,53,RB,APC,WT,NF,1,NF,2,VHL,P,16,，,PTEN,细胞凋亡,Bax,，,Bcl-2,，,Fas/FasL,，,Survivin,Telomerase,，,Granzyme B,，,P,53,肿瘤转移抑制基因,nm23,等,其他,myt,fas,Blym,Jwn,ski,等,核内,DNA,结合蛋白,三、基因变异的方式与癌基因的活化,基因是在物理、化学、生物致癌因素的作用下点突变、基因扩增、染色体易位等引起。,1,、点突变是导致癌基因活化 的主要方式：,点突变包括碱基改变与结构的改变,2,、基因扩增是癌基因的活化的另一种主要方式：,细胞内某些基因通过不明原因的复制或多拷贝，这些多拷贝的,DNA,以游离的形式存在称双微体或再次整合入染色体形成均染区，它一般表示高度的染色体破坏或不稳定性。,3,、,染色体易位或重排,（,1,）,原癌基因被置于很强的启动子控制之下，转录增加，使得原癌基因过度表达。,如：,c-myc,在,Burkitt,淋巴瘤中是,8,号的,c-myc,转位到,14,号编码免疫球蛋白重链的位点上，导致,c-myc,过度表达。,（,2,）由于异位产生具有致癌能力的融合蛋白，导致细胞转化。,如：慢性粒细胞性白血病的“费城染色体”是,9,号,abl,到,22,号的,bcl,位点,4,、癌基因甲基化改变,DNA,甲基化状态的改变，可导致基因的功能和结构的异常，是细胞癌变过程的重要一步，研究发现它与肿瘤的生物学特性有关，,DNA,甲基化水平越低，其肿瘤浸润能力越强，临床分期越晚。,5,、基因过量表达,是指基因的转录、翻译水平增高,这些基因是有组织和细胞特异性，它们均参与细胞的增殖和分化过程。,如：,Ras,、,CerbB-2,、,Met,可出现基因过量,表达,三、与人类肿瘤有关的癌基因,家,族,成,员,产,物,src src,abl,fgr,yes,fms,ros,fps,EGF,受体、酪氨酸蛋白,fes,erb-B,mic,raf,mos,等 激酶（,TPK,）,sis sis PDGF,ras H-ras,K-ras,N-ras P21,（,G,蛋白）,myc C-myc,N-myc,L-myc,核内,DNA,结合蛋白,抑癌基因族,P,53,RB,APC,WT,NF,1,NF,2,VHL,P,16,，,PTEN,细胞凋亡,Bax,，,Bcl-2,，,Fas/FasL,，,Survivin,Telomerase,，,Granzyme B,，,P,53,肿瘤转移抑制基因,nm23,等,其他,myt,fas,Blym,Jwn,ski,等,核内,DNA,结合蛋白,（一）,Ras,基因,H-ras,K-ras,N-ras,三种,K-ras,是最易成为突变的靶基因，,H-ras,、,N-ras,，突变率少，虽然,H-ras,突变率少，,但它是最先分离出来的,Ras,基因，三种,ras,都分别编码一种鸟苷酸结合蛋白，,Ras,蛋白在细胞增殖分化信号的传导过程中起重要作用，突变的,Ras,基因降低了自身内源性鸟苷酸三磷酸酶（,GTPase),的活性，结果是导致,Ras,蛋白与,GTP,持续结合，并具有促进细胞生长的作用。,（二）,myc,C-myc,N-myc,L-myc,c-myc,在,Burkitt,淋巴瘤中是,8,号的,c-myc,转位到,14,号编码免疫球蛋白重链的位点上，导致,c-myc,过度表达。,N-myc,在神经母细胞瘤和胶质瘤等,转录增加，,N-myc,L-myc,小细胞肺癌,转录增加，使得原癌基因过度表达。,三种基因调控的下游基因不同,C-myc,基因的变化更明显,（三）,c-,erb-B-2 =Neu,基因,c-,erb-B-2,编码的蛋白质与上皮细胞生长因子的受体（,EGFR,）非常相似，因此又称为,P185,为一磷酸蛋白，,Neu,蛋白分三个区域：,1,、细胞外区,2,、跨膜区,3,、细胞内酪氨酸激酶区,Neu,基因是由点突变激活的癌基因，由基因扩增和蛋白过度表达与一些肿瘤的特性有关,（四）,c-Met,基因 的 变异,c-Met,基因编码的是跨膜糖蛋白，,链位于细胞外，,链具有细胞外配体结合区、,跨膜区、细胞内酪氨酸激酶区。,c-Met,基因蛋白表达位于腺样结构细胞的边缘，间叶细胞（成纤维细胞和平滑肌细胞）产生的肝细胞因子（,HGF,）或,离散因子（,SF,）作为,c-Met,受体的配体，形成了,HGF/SF,内分泌信号系统。,（五）,Bcl-2,基因,Bcl-2,基因是从,B,细胞淋巴瘤中鉴定出来的，是由染色体,t,（,14,，,18,）（,q32,，,q21,）易位而激活，,Bcl-2,基因编码的蛋白位于核膜、内质网和线粒体膜上,Bcl-2,基因具有抑制细胞凋亡的能力,家,族,成,员,产,物,src src,abl,fgr,yes,fms,ros,fps,EGF,受体、酪氨酸蛋白,fes,erb-B,mic,raf,mos,等 激酶（,TPK,）,sis sis PDGF,ras H-ras,K-ras,N-ras P21,（,G,蛋白）,myc C-myc,N-myc,L-myc,核内,DNA,结合蛋白,抑癌基因族,P,53,RB,APC,WT,NF,1,NF,2,VHL,P,16,，,PTEN,细胞凋亡,Bax,，,Bcl-2,，,Fas/FasL,，,Survivin,Telomerase,，,Granzyme B,，,P,53,肿瘤转移抑制基因,nm23,等,其他,myt,fas,Blym,Jwn,ski,等,核内,DNA,结合蛋白,（六）,Mdm2,基因,Mdm2,是一种进化保守基因，编码一个长度为,491,氨基酸的锌指蛋白，蛋白定位于细胞核，,Mdm2,基因 高表达时呈现癌基因功能。,Mdm2,蛋白可与,P53,与,RB,蛋白结合而使其功能失活，这是,Mdm2,促进癌细胞生长的重要机制，,野生型,P53,可以阻止细胞从,G1,期进入,S,期，,Mdm2,表达增高时，野生型,P53,的这种功能受到影响，,RB,、,aib,都可作用于,Mdm2,，影响细胞的增殖分化。,（七）细胞周期蛋白,Cyclin,蛋白,细胞周期的调控,细胞周期的进行依靠周期素（,cyclin,）和周期素依赖性激酶（,cyclin-dependent kinase,CDK,）复合物的推动。周期素的量呈周期依赖性升降，在细胞周期的不同时期出现不同类型的周期素。,cyclinD,是最早出现的细胞周期中周期素，,cyclinD,可与,Rb,蛋白结合，,CDK,使一些蛋白磷酸化（,Rb,蛋白磷酸化）,例如,cyclinD-CDK4,复合物可使,Rb,蛋白从低磷酸化状态转变为高磷酸化状态。通常，,Rb,蛋白处于低磷酸化状态，并与转录因子,E2F,家族成员结合在一起，阻止其转录激活作用。当,Rb,由于,cyclinD-CDK4,复合物的作用处于高磷酸化状态时，,E2F,与之解离并促进,S,期基因的转录。这对细胞从,G,1,期进入,S,期很重要（图,5-11,）。,四、与人类肿瘤有关的抑癌基因,家,族,成,员,产,物,src src,abl,fgr,yes,fms,ros,fps,EGF,受体、酪氨酸蛋白,fes,erb-B,mic,raf,mos,等 激酶（,TPK,）,sis sis PDGF,ras H-ras,K-ras,N-ras P21,（,G,蛋白）,myc C-myc,N-myc,L-myc,核内,DNA,结合蛋白,抑癌基因族,P,53,RB,APC,WT,NF,1,NF,2,VHL,P,16,，,PTEN,细胞凋亡,Bax,，,Bcl-2,，,Fas/FasL,，,Survivin,Telomerase,，,Granzyme B,，,P,53,肿瘤转移抑制基因,nm23,等,其他,myt,fas,Blym,Jwn,ski,等,核内,DNA,结合蛋白,（一）,RB,基因,是第一个被克隆的抑癌基因，与视网膜母细胞瘤有关。它位于,13q14,RB,基因的磷酸化状态为,RB,基因调节细胞生长分化的主要形式，在细胞周期的不同阶段，,RB,的状态不同，随着细胞周期以磷酸化和去磷酸化调节,RB,，,RB,在去磷酸化时，可与,E2F,结合，并抑制其活化基因表达的功能，,RB,在磷酸化时，则不能与,E2F,结合，,RB,的去磷酸化从,G1,期开始，一直持续到,G2,期和,M,期。,RB,基因与,P,53,、,C-myc,、,c-,fos,、,TGF,存在着调节关系。,（二）,P,53,基因,是最为广泛和深入的肿瘤基因之一，是一个明星分子。它位于,17q13.1,先已经明确,P,53,细胞生长周期中的负调控因子,与细胞周期的调控、,DNA,修复、细胞分化、细胞凋亡等重要的细胞功能有关，,P,53,基因分为野生型和突变型两种，其蛋白产物也有两种，野生型,P53,蛋白极不稳定，半衰期仅数分钟，突变型半衰期为,6-12,小时，,还可参与调节的细胞基因，其中关系最密切的是,Mdm2,、,P21,。,Mdm2,基因产物可与,野生型,P,53,基因和突变型,P,53,基因结合，抑制基因介导的反式激活及阻止,P,53,抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡。,P,53,基因,P21,上调,细胞周期素,/,细胞周期素依赖激酶的底物磷酸化作用,，导致,G1,期阻止，是细胞修复,DNA,，修复失败则启动凋亡。,（三）,P16,基因,它位于,9P21,其编码的产物是细胞周期素依赖激酶（,CDK4,）的抑制蛋白，,P16,既是细胞有效的调控者，又是抑制肿瘤生长的关键因子。,P16,与细胞周期素,D,（,cyclinD,）竞争与,CDK4,结合，当,P16,与,CDK4,结合后能特异地抑制,CDK4,的活性，而,CDK4,可使,RB,磷酸化，,CDK4,受到抑制，,RB,抑制转录因子（,E2F,），从而抑制细胞增殖，阻止细胞生长。当,cyclinD,与,CDK4,结合后能 刺激细胞生长分裂，正常时二者处于平衡，当,P16,异常时，,cyclinD,与,CDK4,优势结合，使细胞生长失控。,（四）,P15,基因 又称为,MTS2,基因,定位于,9P21,主要功能可能是通过与,CDK4,和,-CDK 6,结合，抑制,CDK4-cyclinD,与,CDK6 cyclinD,，从而抑制细胞的增殖，,P15,的功能可能被,TGF-,诱导。,P15,也使细胞停止在,G1,期，,P15,与,RB,基因无关，这一点与,P16,不同。,有关,P15,与,P16,的关系，有人认为,P15,纯合子的缺失常出现在,P16,纯合子的缺失时，而,P16,基因的缺失时，不一定出现,P15,的缺失。二种基因同时缺失，提示在肿瘤发生中的作用，,P16,是主要缺失的靶基因位点。,P15,与,P16,的关系有待进一步探索。,（五）,PTEN,基因,位于,10,q23.3,PTEN,蛋白通过拮抗酪氨酸激酶等磷酸化酶活性而抑制肿瘤的发生。,PTEN,蛋白还可通过特异地使,IP3,的第三位磷酸去磷酸化而间接抑制胰岛素诱导的磷酸肌醇,-3,激酶的活性，而,IP3,是胰岛素调节细胞生长信号传导通路中的重要的第二信使，认为,PTEN,蛋白在细胞信号传导通路中起重要的作用。,（六）,FHIT,定位于,3P14.2,FHIT,蛋白是一典型,AP3A,水解酶，催化,AP3A,的水解反应，使,AP3A,水平下降，,FHIT,基因突变导致,AP3A,水解酶活性丧，从而导致,AP3A,或类似的复合物水平升高并促发肿瘤 的发生。具体机制不清。,EBV,可能通过使,FHIT,基因失活而致癌。,FHIT,是新的侯选癌基因,（七）,BRCA,基因,定位于,13,q12,BRCA1,和,BRCA2,结构完全不同，但生物学功能、肿瘤发生机制有很多相似，都有与,DNA,结合的结构域，可作为转录因子对相应的基因转录起调控作用，还可与,Rad51,蛋白相互作用，在,DNA,损伤修复中起重要作用。,五、其他的抑癌基因,（一）,DCC,基因,18,q21.3,编码的是跨膜磷酸化蛋白,它的配体不请,与神经细胞黏附分子有同源性,它具有细胞,-,细胞外基质相互作用的功能。,缺失,DCC,基因，通过影响细胞间的机制导致肿瘤的侵袭和转移。,野生型的具有抑癌作用,（二）,APC,和,MCC,基因,5,q2122,APC,、,MCC,功能不十分清楚，,（三）,WT1,基因,11P13,WT1,蛋白与,DNA,的特定序列结合后抑制,EGR1,与,DNA,结合，抑制,EGR1,对转录的活性作用，通过,EGR1,发挥对细胞生长的抑制作用。,此外还对其它生长因子的基因也有抑制其转录的作用。如：胰岛素样生长因子,2,、血小板衍生生长因子,A,链,但在有些情况下起激活作用。也能与,P53,结合，,P53,缺失时起激活作用,（四）,NF1,和,NF2,基因,编码的产物与酶活性蛋白同源，而,可修饰,ras,基因产物的功能，可与,ras,基因产物结合，激活酶活性，下调蛋白活性，以次参与和有关的信号传导调节，所以认为是一种抵抗细胞增殖的蛋白,（五）,HNPCC,基因,HNPCC,基因异常，主要基因修复缺陷表现,五、其他的抑癌基因,（一）,DCC,基因,（二）,APC,和,MCC,基因,（三）,WT1,基因,（四）,NF1,和,NF2,基因,（五）,HNPCC,基因,（六）,VHL,基因,（七）,DPC4,基因,（八）,nm23,基因 肿瘤转移抑制基因,第十一节 环境致瘤因素,肿瘤的发生是内外环境各种因素共,同作用的结果。,一、化学物质,（一）间接化学致癌物：,1,多环芳烃,2,芳香胺类,3,亚硝胺类物质,4,真菌毒素,（二）直接化学致癌物：,二、物理致癌因素,（一）紫外线,（二）离子辐射：,x,中子，质子，等,三、病毒因素,（一）,DNA,致癌病毒,1,人类乳头状瘤病毒（,HPV,）,2 EB,病毒 （,EBV,）,3,乙肝病毒 （,HBV),（二）,RNA,致癌病毒,人,T,细胞白血病病毒,型（,HTIV-1),第十二节 遗传与肿瘤,（一）常染色体显性遗传的肿瘤,/,疾病,（遗传性癌综合征）,1,视网膜母细胞瘤,2,肾母细胞瘤,3,神经母细胞瘤,4,神经纤维瘤病,5,家族性腺瘤性息肉病,（二）家族性癌 机理不清,某种肿瘤在家族多个成员中发生,（三）常染色体隐性遗传综合征,第十二节 遗传与肿瘤,（一）常染色体显性遗传的肿瘤,/,疾病,（遗传性癌综合征）,1,视网膜母细胞瘤,2,肾母细胞瘤,3,神经母细胞瘤,4,神经纤维瘤病,5,家族性腺瘤性息肉病,（二）家族性癌 机理不清,某种肿瘤在家族多个成员中发生,（三）常染色体隐性遗传综合征,第十三节 肿瘤免疫,机体的肿瘤免疫主要是细胞免疫，免疫机能低下者，恶性肿瘤发病率明显增加。,目前认为是一系列复杂的、多步骤的、肿瘤细胞与宿主细胞相互作用的过程。一、与肿瘤浸润有关的因素,1,、与肿瘤不断的增生能力有关,正常细胞具有接处抑制作用。,肿瘤性的增生是一种单克隆性的相对无止境的增生，它是各种癌基因的激活、各种抑癌基因失活和凋亡调控基因的异常而导致的，它失去了接处抑制作用，它的这种增生能力是肿瘤浸润与转移的前提。,2,、与瘤细胞之间的粘着力降低有关,（,1,）与细胞膜的钙离子浓度下降有关,1,）正常细胞膜的钙离子可降低细胞,之间的排斥反应,2,）正常细胞之间的黏附需要钙离子参与,（,2,）与细胞之间的连接减少或消失有关,1,）桥粒芯蛋白,2,）桥粒胶原蛋白,（,3,）目前认为是细胞黏附分子所介导的肿瘤细胞之间的黏附力下降,细胞的识别与黏附是由细胞黏附分子（,Cell adhesin molecule CAM),所介,导的，它也是多步骤、多成分参与的复杂过程，并通过,CAM,而启动一定的信号传导途径，最终引起的生物学效应。,细胞黏附分子根据特性分为两类：,亲同性的：识别与结合同种分子,亲异性的：识别与结合异种分子,细胞黏附分子根据分子结构主要分为五类：,钙粘素族,=,钙连接素（约,30,余种）,是跨膜蛋白，属亲同性的细胞黏附分子，它的作用依赖与钙离子,有,E,、,N,、,P,三种，与肿瘤浸润转移最密切的主要是,E,钙粘素，参与上皮细胞间的粘合与连接，介导同种上皮细胞间的同种分子之间的识别与结合。,肿瘤细胞间,？,整合素族,是膜镶嵌糖蛋白，属亲异性的细胞黏附分子，它的作用也依赖与钙离子，介导细胞,-,细胞之间和细胞,-,细胞外基质之间的相互作用,整合素族细胞黏附分子均由,、,两种亚单位构成的异二聚体，由,16,种,亚单位、,9,种,亚单位组合成,20,余种整合素。为细胞 膜的一种受体，通过与相应的配体结合,决定与周围连接强度,1,亚单位组合成的整合素为细胞外基,质蛋白的受体。,2,亚单位组合成的整合素为主要介导,白细胞的黏合外基,3,亚单位组合成的整合素为主要介导,血小板的黏合,整合素的配体特性：,有单特性的,=,只有一种配体,如：,5 1,为,FN,受体,有多特性的,=,只有多种配体,如：,6 1,、,7 1,为,LN,受体,TCR,、,CD28,、,CD44,（它们不是整合素）可以增强整合素 与其配体的结合,肿瘤细胞间,？,：免疫球蛋白超家族类黏附分子,为一大类含有免疫球蛋白结构域的分子，包括各种,Ig,有的属亲同性的细胞黏附分子（,CAM,）：,包括：,N-CAM,（神经细胞黏附分子）,CEA,等,有的属亲异性的细胞黏附分子（,CAM,）：,包括：,I-CAM,（细胞间黏附分子）、,PE-CAM,（血小板内皮细胞黏附分子）、,V-CAM,（脉管细胞黏附分子）、等,肿瘤细胞间,？,：选择素族,=,选凝素族,属亲异性的细胞黏附分子，它的作用依赖与钙离子，通过碳氢键连接,分,L,、,E,、,P,三种,L,：存在于白细胞表面，参与白细胞,和 其他细胞的结合,E,：存在于内皮细胞表面，参与内皮细,胞和其他细胞的结合,以及肿瘤细胞和内皮细胞的结合,P,：存在于血小板与内皮细胞表面,参与肿瘤细胞与血小板的结合,肿瘤细胞间,？,透明质酸粘素家族,是一族与透明质酸糖链相结合的细胞黏附分子，为跨膜糖蛋白，介导细胞,-,细胞之间和细胞,-,细胞外基质之间的相互作用。,CD44,属于透明质酸粘素家族，广泛存在与多种细胞表面：内皮细胞、上皮细胞、软骨细胞、成纤维细胞、白细胞等。,肿瘤细胞间,？,3,、与肿瘤细胞和细胞外基质的连接增,强有关,(1),整合素 是膜镶嵌糖蛋白，为细胞,膜的一种受体，通过与相,应的配体结合,决定与周围,连接强度,LN,受体,和,FN,受体,TCR,、,CD28,、,CD44,可以增强整合素 与,其配体的结合,（,A,）,层粘连蛋白（,laminin,LN,）,a.,主要是由座落在基底膜上的上皮细胞和内皮细胞、以及被基膜包绕的肌上皮细胞产生，垂体细胞也可合成。,基膜的构成主要是由,LN+,型胶原,+,硫酸软骨素构成,。,b.,存在于早期的胚胎细胞及某些肿瘤细胞之间，在正常血液和组织液中浓度极低。,c.,它具有促进细胞增殖的作用。具有促进细胞粘着、迁移、生长的作用，还具有血管生成因子的作用，可使内皮细胞脱落母管，形成新的血管。,d.,具有与上皮细胞、内皮细胞、神经细胞、肌细胞及多种瘤细胞的结合作用，主要是因为这些细胞的细胞膜表面具有,LN,的受体。,（,B,）,纤粘连蛋（,fibconectin,FN,）,广泛存在于动物中，有三种形式存在。,a.,血浆,FN,：,（可溶的二聚体）,主要由肝细胞产生,存在于血浆和体液中参与凝血、创伤愈合，增强吞噬细胞的功能。,b.,细胞表面的,FN,：（不溶的寡聚体）,主要由间质细胞产生的：,纤维母细胞、软骨细胞、星形胶质细胞、神经鞘细胞、肝、肾、脑、乳腺，,与细胞的分化有关，如纤维母细胞、平滑肌细胞、原始间叶细胞，它们分化成熟的细胞表面,FN,/,消失。,c.,基质,FN,：,（高度难溶多聚体）,主要存在于细胞外基质中,细胞间质中,及,某些基膜中。,它与各种细胞的迁移都有关系,包括：正常细胞、,肿瘤细胞,它与肿瘤细胞趋化、侵袭、转移、转移时血管的定位相关,(2),：免疫球蛋白类黏附分子,亲异性的细胞黏附分子（,CAM,）：,包括：,I-CAM,（细胞间黏附分子）、,PE-CAM,（血小板内皮细胞黏附分子）、,V-CAM,（脉管细胞黏附分子）、,(3),：选择素 通过碳氢键连接,分,L,、,E,、,P,三种,L,：存在于白细胞表面，参与白细胞,和 其他细胞的结合,E,：参与内皮细胞和其他细胞的结合,以及肿瘤细胞和内皮细胞的结合,P,：参与肿瘤细胞与血小板的结合,（,4,）透明质酸粘素家族,是一族与透明质酸糖链相结合的细胞黏附分子，为跨膜糖蛋白，介导细胞,-,细胞之间和细胞,-,细胞外基质之间的相互作用。,CD44,属于透明质酸粘素家族，广泛存在与多种细胞表面：内皮细胞、上皮细胞、软骨细胞、成纤维细胞、白细胞等。,肿瘤细胞间,？,4,、与细胞外的基质降解有关,在肿瘤组织间有蛋白水解酶，它们可,以来源于肿瘤细胞或宿主细胞（间质）,目前研究较多的是,型胶原酶和组织蛋白酶,D,（,1,）,型胶原酶,（,2,）组织蛋白酶,D,细胞外基质降解,肿瘤细胞,a.,本身产生蛋白水解酶,b.,诱导宿主细胞合成蛋白水解酶,肿瘤边缘蛋白酶和抗蛋白酶之间平衡失调,已经肯定与肿瘤侵袭有关的蛋白酶：,a.,丝氨酸酶,b.,半胱氨酸酸,c.,金属蛋白酶（,MMPs,）：,20,余种,胶原酶类：,MMP,-1,、,MMP,-8,、,MMP,-13,明胶原酶：如,型胶原酶属于金属蛋白,（,MMP,-2,）,金属蛋白酶组织抑制因子（,T I M P,）,金属蛋白酶组织抑制因子（,T I M P,）的基因转染动物，肿瘤的转移率。,基质溶解素等：,d.,组织蛋白酶,D,、组织蛋白酶,B,e.,耐酸酶,降解,LN,、,FN,、,Pr,多糖,f.,纤维蛋酶原激酶,g.,尿激酶型胞浆素原活化物,（,1,）,型胶原酶,它是一种金属蛋白酶，它能溶解基底膜中的,型胶原，当肿瘤细胞表面的,LN,的受体与基底膜中,LN,结合后，可诱发肿瘤细胞直接分泌,型胶原酶,在内的各种蛋白水解酶使基底膜中,型胶原、,LN,、,FN,、蛋白多糖等溶解基底膜缺损，降解产,物对肿瘤细胞具有趋化性，有助于肿瘤细胞浸润与转移。,在乳腺癌的研究中发现，正常乳腺组织和良,性病变中,型胶原酶的表达水平低，且主要局限,于肌上皮细胞的胞浆内。,在乳腺癌组织中,型胶原酶表达水平高，且,主要位于上皮细胞内，这种由肌上皮细胞到上皮,细胞的转变，有助于鉴别良恶性，从原位癌浸,润癌的过程中伴随着,型胶原酶表达水平的明显,提高（这种表达规律与,LN,受体的表达规律一致），同时也发现基底膜的完整性的破坏，也是原位癌,与早期微小浸润癌的区别点。,（,2,）组织蛋白酶,D,（,cathepeim D,）,它是一种溶酶体的酶，正常它广泛存在于,人体的各种组织和细胞中，具有直接消化细胞,外间质或间接破坏基底膜的作用，目前关于它,的免疫组织化学的研究主要应用在乳腺癌、前,列腺癌、膀胱癌、涎腺肿瘤和黑色素瘤等研究,中，它们的表达都比相应的良性病变明显增高，,说明组织蛋白酶,D,在这些肿瘤的发展、浸润、,转移的机理中起着重要的作用。,Cath-D,的功能,作为蛋白水解酶溶解基底膜、细胞基质和结缔组织。,降解细胞外基质的同时，也使得一些贮存在基质中的生长因子释放，纤维母细胞生长因子（,FGF,）、,-,转化生长因子（,TGF-,）。,激活细胞蛋白酶,B,，从而触发链式反应，诱导产生活化的尿激酶型,-,血纤溶酶原激活剂。,作为增生因子，通过胰岛素样生长因子,的受体起作用。,关于它的分泌机制：,有人认为与,型胶原酶的分泌类似,，,也有人认为是间质细胞或宿主细胞分泌的,有人在乳腺癌的研究中发现：,肿瘤中：,上皮成分表达,Cath-D,与肿瘤的大小、复发、淋,巴结的状况及预后无关,间质成分表达则与肿瘤的分化程度、复发、转,移、无瘤生存期、生存率有关，（,主要与巨噬细,胞的表达有关）,这两种酶：目前关于它的研究也有相互矛盾的,结果，主要与检测的方法、抗体的种类及判定标,准不同有关。,关于能否作为预后的判定指标有待于进,一步研究。,5,、与肿瘤的血管形成有关,如果没有新生的血管提供营养，肿瘤在大到,1,2mm,的直径（,10,7,细胞）或厚度时就不再继续增大，因此肿瘤细胞和肿瘤内及周围的巨噬细胞能产生血管生成因子，诱导血管生成，这也是肿瘤生长、浸润、转移的前提。,肿瘤血管生成与抑制,（,1,）,.,肿瘤血管的生成：,包括三个过程,：,a.,肿瘤细胞产生一些可溶性血管生成因子,b.,血管生成因子刺激内皮细胞增生、迁移,c.,金属蛋白酶激活成熟的血管内皮细胞降,解细胞外基质和血管生成移动,与血管生成有关的因子：,（这些因子属于细胞因子）,可由免疫细胞产生（单,/,巨、,T,、,B,、,NK,）,也可由非免疫细胞产生（,BV,内皮细胞、,表皮细胞、纤维细胞等）,与肿瘤的血管生成有关的因子：,a.,血管内皮生长因子（,VEGF,）：,是碱性、可分泌的肝素结合蛋白，有许多亚型,b.,酸性或碱性成纤维细胞生长因子：,（,a FGF/bFGF,）,c.,血管生长素,d.,胎盘生长因子（,PGF,）,e.,表皮生长因子（,EGF,）,f.,血小板源性生长因子（,PDGF,）,g.,血细胞介素,-8,（,IL-8,）,h.,肿瘤坏死因子,-2,（,TNF-2,）,（,2,）,.,肿瘤血管的抑制,抑制的环节：,a.,阻断内皮细胞降解周围基质的能力,b.,直接抑制内皮细胞的功能,c.,阻断血管生成因子的合成和释放,d.,阻断内皮细胞表面整合素的作用,血管生成的抑制因子,a.,血管抑制素,=,血管稳定素（作用最强）,=,血管静止素,b.,血小板反应素,-1,c.,内皮抑制素,=,内皮静止素,d.,血小板因子,-4,e.,-,干扰素诱导蛋白,-10,（,I P-10,）,f.,脉管静止素,可以由肿瘤细胞产生，也可诱导产生,6,、与瘤细胞的运动有关,肿瘤细胞具有阿米巴样运动，与细胞的骨架结构有关（微丝、微管、中等纤维）。,促进 它运动的因素有：,（,1,）自分泌移动因子：肿瘤细胞产生,（,2,）肝细胞生长因子,（,3,）胸腺素,15,（,4,）表皮生长因子,（,5,）类胰岛素生长因子,（,6,）,IL-1,、,IL-3,、,IL-6,（,7,）干扰素等,二、与肿瘤转移有关的因素,1,、与肿瘤浸润有关的因素均与肿瘤的转,移有关。,2,、与肿瘤细胞进入血循环的状态及有无,黏附条件有关。,黏附 ：（,1,）通过血小板黏附,（,2,）栓塞,（,3,）血管内皮细胞表面选择性的黏附,因子有关,3,、与组织器官的微环境有关,软骨、心脏、肌肉和脾脏不宜形成转,移瘤,4,、与肿瘤对器官的选择性有关,5,、与肿瘤的休眠有关,6,、与机体的免疫状态有关,7,、与肿瘤的转移抑制基因有关,nm23,：,