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Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,“,1893,年的一天,在演奏完第六交响曲(悲恸交响曲)之后,柴可夫斯基来到大街上散步,忽然感到口渴,就进了一家饭店,要了一杯,冷水,喝,谁知就是这样一杯水要了他的命。是情杀、仇杀还是另有原因呢?凶手是谁呢?,”,当时俄罗斯发生霍乱大流行,最后医生确认,这杯水中含有,霍乱弧菌,,致使天才音乐家柴可夫斯基染上致命的霍乱而死去。,为什么这个故事中特别指出是,“冷水”,?,霍乱可能通过什么,途径,传播?,冷水中有,多少,霍乱弧菌才可能使柴可夫斯基发病?,“千军万马过胃部”“集团作战”,。,1883,年,埃及发生了一次瘟疫大流行,成千上万的病人一批批死亡。患者往往起病急,出现严重的腹泻和呕吐,米泔样大便。若得不到及时救治,常常在短时间内因,全身脱水、肌肉痉挛和周围循环衰竭,造成休克而死。,一名在印度某水电站工作的,44,岁工程师,突发大量,水样泻,,由于每小时约,0.5L,液体的丢失,患者很快出现,紫绀及重度脱水症状,,肠鸣音减弱,低血压,血容量减少,其排出物呈等渗,暗视野显微镜检查,发现逗点状微生物。,Q1,、,患者最有可能患有何种疾病,?,Q2,、,如何确诊,?,病例分析,形态与染色:,革兰染色阴性,弧菌,单端鞭毛,运动活泼。,扫描电镜,霍乱弧菌,一、生物学特性,鱼群状排列,病人米泔水样粪便涂片,GS,镜检,可见大量弧菌首尾相互衔接,平行排列如鱼群状。,霍乱弧菌,Vibrio cholerae-vibrio-shaped prokaryote that causes cholera,霍乱弧菌(鞭毛染色),霍乱弧菌(扫描电镜),一、生物学特性,抗原构造与分群:,H,抗原:无特异性,O,抗原:分群,培养特性:,耐碱怕酸,,pH 8.8-9.2,,可在无盐环境中生长,古典生物型,O-1,群,EL Tor,生物型,非,O-1,群,引起散发性胃肠炎。,O-139,型,,1992,年起引起 霍乱流行。,一、生物学特性,与人类感染有关的主要弧菌,弧菌,人类疾病,霍乱弧菌,O1,和,O139,血清群,霍乱,可造成大流行甚至世界性大流行,非,O1,和非,O139,霍乱弧菌血清群,霍乱样腹泻,一般腹泻,偶尔,肠道外感染,副溶血性弧菌,胃肠炎,肠道外感染,其他:拟态弧菌、创伤弧菌、霍利斯弧菌、河弧菌,不常见,抵抗力:,较强,但,100 1-2,分钟可,灭活,怕酸(,1,份漂白粉加,4,份水,,1,小时),一、生物学特性,致病性与免疫性,致病物质:,鞭毛与菌毛:,运动并粘附至小肠粘膜,肠毒素:,A,A1,:,毒性组分,使腺苷酸环化酶活,性增高,,cAMP,大量增加。,A2,:,与,B,结合,B,与小肠上皮细胞神经节苷脂受体结合,霍乱肠毒素结构:,1A,、,5B,霍乱肠毒素(,CT,):由一个,A,亚单位和,5,个相同的,B,亚单位构成的一种聚合蛋白。,致病物质,-,霍乱肠毒素,:,激活腺苷环化酶,使细胞内,cAMP,水平升高,主动分泌,Na,+,、,K,+,、,HCO,3,和水,导致重的腹泻与呕吐,B,亚单位,A,亚单位,与小肠粘膜上皮细胞,GM1,神经节苷脂受体结合,介导,A,亚单位进入细胞,(结合亚单位),(毒性亚单位),B,亚单位与小肠粘膜上皮细胞,GM1,神经节苷脂受体结合,A,亚单位裂解为,A1,和,A2,两条多肽,,A1,亚单位进入细胞发挥毒性作用,A1,活化,AC(,腺苷环化酶,),,使,ATP,转化成,cAMP(,环磷酸腺苷,),,使之在细胞内含量增高,cAMP,水平升高,导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进,大量水和电解质在肠腔堆积,引起剧烈腹泻,霍乱肠毒素的作用机制,传染源,:患者及带菌者,人类是唯一易感者,摄入,10,8,-10,10,个细菌可造成感染,引起霍乱,传播途径,:,经水传播,经食物传播,经生活接触传播,经苍蝇传播,霍乱:一种残忍的瘟疫,霍乱病人,重型 腹泻次数一日,20,次以上,极度烦躁甚至昏迷,皮肤弹性消失,眼窝深凹,明显发绀,严重肌肉痉挛,脉搏微弱而速,甚或无脉,血压下降或测不到,尿量每日少于,50ml,或无尿,脱水程度儿童相当于体重,10%,以上,成人,8%,以上。,霍乱,剧烈的喷射状呕吐,休克、电解质紊乱及酸中毒,腹泻物呈米泔水样,不治疗,死亡率达,60%,致病性与免疫性,所致疾病:,霍乱,易感者:,人类是霍乱弧菌的唯一易感者,传播途径:,消化道,可疑水、食物,(菌,10,3,10,5,,,10,8,10,10,),2-3,天突然出现剧烈腹泻与呕吐,严重脱水,电解质紊乱,肾衰、死亡,致病性与免疫性,病后带菌一般不超过,2,周,个别,可长达数年,病菌主要存在于,胆囊,中。,免疫力:,同群免疫力较牢固,体液免疫为主。,微生物学检查,霍乱:烈性肠道传染病,为我国的甲类法定传染病(俗称,2,号病),霍乱是烈性传染病,对首例病人的病原学诊断应快速、准确,并及时作出疫情报告,微生物学检查,标本,:,呕吐物、米泔水样粪便,直接镜检,分离培养,PCR,G,-,弧菌 碱性蛋白胨水 肠毒素,运动活泼 凝集反应,标本,病人,粪便,肛拭,流行病学调查还包括,水样,粪便标本:,Cary-Blair,保存液,肠道病原菌:,甘油盐水缓冲,保存液,直接镜检,革兰染色,阴性,弧菌,悬滴法观察细菌呈,“鱼群穿梭样”,运动有助于诊断,分离培养,接种,碱性蛋白胨水,增菌,目前常用的选择培养基为,TCBS,(,硫代硫酸钠柠檬酸胆盐,蔗糖,培养基,),,霍乱弧菌因分解蔗糖呈,黄色菌落,挑选可疑菌落进行,生化反应,血清学反应,-,玻片凝集,反应,形成菌膜,在,PH8.8-9.0,碱性蛋白胨水中生长表面形成菌膜,霍乱弧菌在,TCBS,琼脂平板上的菌落特征(,18-24h,),在选择培养基琼脂平板(,TCBS,)上生长,形成较大,黄色菌落。,霍乱弧菌,血清学反应(,凝集反应),防治原则,防:,霍乱死菌苗:,肌肉注射,保护率,50%,,,3-6,个月,减毒重组活菌苗:,口服,保护率,82-100%,菌苗加类毒素:,B,亚单位,+,灭活菌细胞,,3,年以上,霍乱、伤寒杂交菌苗:,基因工程菌苗,致病性与免疫性,治:,隔离,及时补充液体,敏感抗菌素,抗生素,可选用四环素、,强力霉素、氟哌酸等。,
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