植物细胞染色体标本的制作.ppt

单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,大连理工大学 环境与生命学院,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,植物细胞染色体标本的制作与观察,1,主要内容,实验目的,实验原理,实验材料,实验步骤,注意事项,实验讨论,2,1.,实验目的,（,1,）掌握常规压片技术制作植物染色体标本的一般方法。,3,1.,实验目的,（,2,）,了解显微镜下常规显色的植物细胞染色体的形态特点，熟练掌握显微镜的使用。,4,1.,实验目的,（,3,）,理解染色体与生命遗传的意义及染色体核型检查的应用。,5,1.,实验目的,掌握常规压片技术制作植物染色体标本的一般方法。,了解显微镜下常规显色的植物细胞染色体的形态特点，熟练掌握显微镜的使用。,理解染色体与生命遗传的意义及染色体核型检查的应用。,6,2.,实验原理,核型分析技术的应用,染色体标本制备的主要方法和环节,7,2.1,核型分析技术的应用,染色体与遗传的奥秘,孟德尔,遗传学说,遗传因子,2.,实验原理,8,遗传现象,-,孟德尔的豌豆实验,9,变异现象,-,摩尔根的果蝇实验,摩尔根是第一位以遗传学成就而荣获诺贝尔生理学或医学奖的科学家，是细胞遗传学的创始人。,伴性遗传,基因学说,基因与染色体,10,遗传物质是,DNA,11,基因本质的揭示,DNA,双螺旋结构的发现开启了分子生物学时代。,12,基因的本质是具有遗传效应的,DNA,片段。,染色体是基因的主要载体。,13,细胞分裂与染色体行为,细胞周期,14,染色质与染色体,染色质和染色体是真核生物遗传物质存在的两种不同形态，两者不存在成分上的差异，仅反映它们处于细胞分裂周期的不同功能阶段而已。,染色质,分裂间期,染色体,分裂期,15,有丝分裂,中期,是观察染色体的最好时期,16,2.1,核型分析技术的应用,核型分析技术的应用,物种细胞内染色体数目、形态、长度等信息的总和根据实验的观察和测量绘制成的模式图称为核型（,karyotype,）。,2.,实验原理,17,18,核型的应用,核型分析在物种亲缘鉴定，染色体变异分析，杂种分析，细胞分裂过程分析，孤雌生殖等研究中均有重要的作用。,19,i,微核,细胞核,染色体断裂,染色体数目变异,20,急性骨髓白血病,10,、,11,号染色体间易位,染色人体涂染,21,2.,实验原理,核型分析技术的应用,染色体标本制备的主要方法和环节,22,2.2,染色体标本制备的主要方法和环节,主要方法,2.,实验原理,压片法：植物根尖等组织,滴片法：动物细胞悬液,低渗涂片法,23,主要环节原理,取材：应取分生旺盛的组织或细胞。,预处理：秋水仙胺：破坏纺锤体形成，细胞阻断于,中期,；使染色体变粗变短，易于观察。,中期是观察染色体的最理想,时期。,24,主要环节原理,植物染色体标本制备过程中有两个重要环节，即,解离和固定。,解离：除去细胞间的果胶层，并使细胞壁软化，从而使细胞得以膨胀，为染色体的分散提供了空间。,动物细胞无细胞壁，通常不需解离，,而是用低渗液使细胞膨胀。,25,主要环节原理,固定：目的在于尽快使细胞的结构固定于接近存活状态；防止蛋白质分解而导致结构变化。,染色体分散：通过压片、滴片等机械力量使染色体分散,有利于观察。,26,2.,实验原理,核型分析技术的应用,染色体标本制备的主要方法和环节,27,3.,实验材料与试剂,实验材料：,市售大蒜与洋葱。,仪器及用具：,显微镜，冰箱，恒温水浴锅，载玻片，盖玻片，剪刀，镊子，滤纸等,28,3.,实验材料与试剂,试剂：,1g/L,秋水仙胺,解离液：,1mol/L,的盐酸。,卡诺固定液：按甲醇,:,冰醋酸以,3:1(,体积分数,),配制，现用现配。,改良石炭酸品红染液,29,实验内容,压片法观察大蒜、洋葱根尖染色体标本。,观察男人和女人染色体、洋葱根尖有丝分裂永久切片标本。,30,4.,实验步骤,催芽,31,4.,实验步骤,取材，预处理。,取大蒜或洋葱,0.51 cm,的根尖。,1 g/L,秋水仙胺处理,34 h,。,32,4.,实验步骤,固定：卡诺固定液卡诺固定液,4,下固定,30,min,后，用蒸馏水洗净。,33,4.,实验步骤,解离与洗涤：,60,水浴下,1 mol/L HCl,解离,10 min,；用蒸馏水清洗根尖组织。,若洗不净，会影响染色。,34,4.,实验步骤,染色：用改良的石炭酸品红染色,5 min,，可直接在载玻片上进行。,染色前去掉分生区以后部分，保留根尖,0.20.3 cm,即可。,35,将根尖置于载玻片上,根尖生长点,伸长区,分生区,36,切取0.,3cm,左右的根尖,37,4.,实验步骤,6.,压片,盖片,压片,敲片,38,7.,镜检观察,4.,实验步骤,敲至组织在玻片上呈现雾状,大蒜根尖细胞的染色体制片（,400,，箭头示染色体）,39,4.,实验步骤,40,5.,注意事项,过长的根尖分裂相会大大减少。,压片、敲片时力量要均匀合适，避免弄碎玻片；载玻片和盖玻片之间也不要移动。,可随时镜检判断敲片进行的程度，但要注意整个过程要保持标本的湿润。,41,染色体永久切片标本的观察,男人染色体标本（箭头分别表示,X,和,Y,染色体）,42,染色体永久切片标本的观察,43,6.,实验讨论,若染色体标本结果不理想，请分析一下可能的原因有哪些？,44,Any,Question?,45,