DB32∕T 3237-2017 全雄黄颡鱼人工繁殖技术规程.pdf

ICS 65.150 B51 备案号： DB32 江苏省地方标准 DB 32/T 32372017 全雄黄颡鱼人工繁殖技术规程 Technical specification for artificial propagation of all-mall yellow catfish 2017-05-05 发布 2017-06-05 实施 江苏省质量技术监督局 发 布 DB32/ T 3237-2017 I 前 言 为规范全雄黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco Rich）人工繁殖的生产要求，特制定本标准。 标准遵照GB/T 1.12009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则编制。 本标准由江苏省海洋与渔业局提出。 本标准起草单位：射阳康余水产技术有限公司，射阳县水产技术推广中心。 本标准主要起草人：王德忠、徐汉连、李平、汤亚高、张学师。 DB32/ T 3237-2017 1 全雄黄颡鱼人工繁殖技术规程 1 范围 本标准规定了全雄黄颡鱼（Pelteobagrus fulvidraco Rich）人工繁殖技术的术语和定义、环境条件、亲鱼及亲鱼培育、人工繁殖、多次繁殖技术、鱼苗运输等生产、管理的技术要求。 本标准适用于全雄黄颡鱼的人工繁殖生产。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。 凡是注日期的引用文件， 仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB 11607 渔业水质标准 GB/T 18407.4 农产品安全质量 无公害水产品产地环境要求 NY 5361 无公害食品 淡水养殖用水水质 NY 5071 无公害食品 渔业药物使用准则 NY 5072 无公害食品 渔用配合饲料安全限量 NY/T 1351 黄颡鱼养殖技术规范 SC/T 1008 池塘常规培育鱼苗鱼种技术规范 SC 1070 黄颡鱼 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 超雄黄颡鱼 super male yellow catfish 在黄颡鱼的雌性同配鱼类中，性染色体为 YY 型的雄鱼。 3.2 全雄黄颡鱼 all-mall yellow catfish 应用黄颡鱼雌鱼和超雄黄颡鱼杂交得到的子代。 4 环境条件 4.1 场地环境应符合 GB/T 18407.4 的要求。 4.2 场地应选择在水源充足，环境安静的区域，水质符合 GB 11607 的规定，有独立的注排水系统。 4.3 人工繁殖用水应符合 NY 5361 的规定。 DB32/ T 3237-2017 2 5 亲鱼 5.1 亲鱼来源 5.1.1 雌鱼应从未经人工放养的江河、湖泊、水库等天然水域收集或按符合 SC 1351 第 8 章规定养殖的成鱼中择优挑选。 5.1.2 超雄鱼应从省级以上良种场引进，或通过遗传学方法培育并经鉴定的超雄鱼。 5.1.3 近亲繁殖的后代不得留作亲鱼。 5.2 形态要求 5.2.1 外部形态应符合 SC 1070 的规定。 5.2.2 应体型正常，体格健壮，体表光滑、无疾病、无畸形，体色黄黑间隔明显。 5.3 性别鉴定 黄颡鱼性别鉴定见表1。 表1 黄颡鱼性别特征 亲鱼性别 非繁殖季节特征 繁殖季节特征 雌鱼（） 具有圆形的泌尿孔和杏仁形的生殖孔。 腹部膨大，卵巢轮廓明显。手压腹部柔软而富有弹性，有移动感。生殖孔变圆，松弛和外翻，呈粉红色。 超雄鱼（） 具有长而尖的生殖乳突，体长明显大于雌鱼体长。 腹部无膨大感，生殖乳突膨大、粉红色，末端红色。 5.4 繁殖年龄、体重和使用年限 用于繁殖亲鱼允许使用的最小年龄、最小体重和最大年限见表2。 表2 繁殖亲鱼允许使用的最小年龄、最小体重和最大年限 亲鱼性别 允许繁殖的最小年龄（年） 允许繁殖的最小体重（g） 允许使用的最大年限（年） 雌鱼（） 2 75 3 超雄鱼（） 2 150 3 6 亲鱼培育 6.1 培育池 6.1.1 土池。面积 1333m24000m2，水深 1.5m 左右，每 667m2配备 0.5kw 左右的增氧设备。池底要求平坦，淤泥厚度10cm，注排水口有防逃和防敌害过滤设备。 6.1.2 池塘清整符合 SC/T 1008 的规定。 6.2 亲鱼放养 6.2.1 雌、雄亲鱼分开专池培育，单养，也可与滤食性鱼类混养。 6.2.2 放养时间应选择在上一年 10 月份水温下降至 15以前或当年 4 月份水温升至 15以后。 6.2.3 亲鱼的放养密度，在繁殖季节的亲鱼强化培育期间，放养密度以 0.22kg/m20.37kg/m2为宜，其他季节放养密度以 0.45kg/m20.60kg/m2为宜 DB32/ T 3237-2017 3 6.2.4 亲鱼放养时应用 10g/L 的食盐和 1mg/L 的高锰酸钾混合溶液浸泡消毒 15min。 6.3 饲料管理 6.3.1 投喂 6.3.1.1 饲料种类与要求 可根据当地情况选择使用黄颡鱼专用膨化饲料或鲜活饵料。膨化饲料的粗蛋白含量不低于40%，不得使用含有棉酚的原料；鲜活饵料可选择鱼、虾、去壳的螺和蚌等，添加适量的维生素预混料，加工成糜状饲料。饲料应新鲜、无腐败变质，符合NY 5072的规定。 6.3.1.2 投喂方式和投喂量 膨化饲料：投喂在固定的食台内，日投喂一次，时间选择在太阳下山1h之后，投喂量在水温20以下为体重的0.5%1.0%，20以上为体重的1.0%1.5%。 鲜活饵料：沿池塘固定的一条边投喂，日投喂一次，时间选择在上午9点左右，投喂量在水温20以下为体重的1%2%，水温在20以上为体重的3%4%。 6.3.2 日常管理 6.3.2.1 早晚巡塘各一次，观察天气、水质变化、亲鱼活动和摄食情况，发现问题及时解决。 6.3.2.2 保持水质清新，溶氧保持在 4mg/L 以上，催产前的一个月每隔 4d5d 注水一次。 6.3.2.3 做好鱼病防控，渔药使用应按 NY 5071 的规定执行。 7 人工繁殖 7.1 亲鱼选择 7.1.1 外部形态 按 5.2 的规定执行。 7.1.2 雌雄鉴别 按 5.3 的规定执行。 7.1.3 雌鱼成熟度检查 应取卵检查，要求卵粒大小整齐、饱满，有光泽，透明液（见附录 A）透明后，80%以上卵粒核偏位。 7.2 催产池 7.2.1 流水水泥池。面积 4m220m2，水深 0.5m0.8m。 7.2.2 要求内壁光滑或镶嵌瓷砖，配备充气式增氧设备，室外水泥池应搭建遮阳棚。 7.3 人工催产 7.3.1 催产季节和水温 DB32/ T 3237-2017 4 繁殖季节为4月份8月份， 人工繁殖以5月中下旬为宜。 繁殖水温1832， 适宜催产水温2230。 7.3.2 催情激素 鱼用促黄体素释放激素类似物（LRH-A） ， 马来酸地欧酮（DOM） ，鱼用绒毛膜促性腺激素 （HCG） 。 7.3.3 注射剂量 7.3.3.1 雌鱼每千克鱼用 LRH-A（25ug40ug）+DOM（5mg9mg）+HCG（1000IU1800IU）为宜，剂量可根据性腺发育的成熟度、水温和肥满度作调整。 7.3.3.2 自然产卵，雄鱼注射剂量与雌鱼相同。 7.3.3.3 人工授精，雄鱼注射剂量为雌鱼的 30%50%，水温高于 26时雄鱼可不注射催产激素。 7.3.4 注射方式 7.3.4.1 腹腔注射或肌肉直射，注射部位为胸鳍基部或背部肌肉。 7.3.4.2 一次注射或两次注射均可。如分两次注射，根据水温高低，间隔时间为 10h20h，第一次注射剂量为总剂量的 1/4 或单独注射 LRH-A 总剂量的 1/2；雄鱼在雌鱼第二次注射时一次注射。 7.3.5 效应时间 不同水温下的效应时间见表2。 表2 水温与效应时间的关系 水温， 2223 2425 2627 2829 3032 效应时间，h 2226 2024 1619 1215 1012 7.4 自然产卵 7.4.1 亲鱼配组 雌、雄亲鱼比例为(11.5):1。 7.4.2 鱼巢准备 鱼巢采用口径为 30cm、高 15cm 左右的灰色泥瓦桶，底部放入一个圆形的产卵盘。产卵盘的制作方法是依泥瓦桶底部内径，用直径 4mm 的铁丝制成一个圆形铁圈，将棕片缝制在铁圈上，剪掉铁圈外缘多余的棕片。 7.4.3 操作方法 将催产池注水 60cm 左右，沿池底放满鱼巢，再放入与鱼巢数量相等并注射催产剂后的雄鱼及相应比例的雌鱼，流水刺激亲鱼发情自行产卵。待亲鱼产卵完毕后，取出鱼巢，将粘附有鱼卵的产卵盘移至孵化池内孵化，产后亲鱼放回亲鱼池培育。 7.5 人工授精 观察亲鱼发情情况，达到效应时间后，轻压雌鱼腹部，泄殖孔中有卵粒流出时，即可人工授精。人工授精可按常规的人工授精方法或在低渗溶液中的人工授精方法执行。 7.5.1 常规人工授精方法 DB32/ T 3237-2017 5 按NY/T 1351第5章5.4.2的规定执行。 7.5.2 低渗溶液人工授精方法 7.5.2.1 取超雄鱼，剪断下颌处动脉放血 20s30s，取出精巢，称重后放在孔径 0.25mm0.35mm 的金属丝网筛上，在精子保存液中研磨，滤去精巢组织残渣。每克精巢用 50ml 的精子保存液（见附录 B）稀释后避光保存，稀释后的精子应在 3h 内用完。 7.5.2.2 擦干雌鱼体表水分，将卵挤入到干燥、干净的容器中。每批卵采集时间以不超过 20min 为宜。 7.5.2.3 取卵子体积约 1/2 左右的生理盐水，将精子放入生理盐水中搅拌 3s5s，激活精子，再放入到卵中搅拌 30s40s 进行受精。生理盐水的浓度为 0.2%0.5%，每 500g 卵加入 5ml 稀释精子。 7.5.2.4 受精后的卵均匀地撒在规格 60cm40cm、 孔径 0.35mm0.45mm 的网片上， 转移至孵化池孵化，或经 10%15%的黄泥浆脱粘处理后放入孵化桶孵化。 7.6 孵化 7.6.1 孵化用水 孵化用水应用网孔尺寸0.25mm的尼龙或乙纶网布过滤，严防敌害生物进入。水质应符合NY 5361的规定，其中溶解氧应在6mg/L以上。 7.6.2 孵化方式 粘附基质上的受精卵采用水泥池静水或微流水孵化，孵化期间用充气泵充气增氧。 脱粘的受精卵采用孵化桶孵化。 7.6.3 孵化密度 水泥池静水孵化放卵密度为每1000kg水体4104粒6104粒，微流水孵化放卵密度为每1000kg水体1.5105粒2105粒。孵化桶孵化放卵密度为每1000kg水体1106粒1.5106粒。 7.6.4 孵化时间 鱼苗孵化时间与水温高低、孵化方式有密切关系。水温、孵化方式与孵化时间的关系见表4。 表4 水温、孵化方式和脱膜时间的关系 水温， 2223 2425 2627 2829 3032 脱膜时间，h 水泥池孵化 7688 6882 5866 4654 3844 孵化桶孵化 6876 6066 5056 4044 3236 7.6.5 孵化管理 7.6.5.1 水泥池孵化应及时更换新水或调节水流大小，防止感染水霉，清洗死卵后要及时转池； 7.6.5.2 孵化桶孵化应及时调节水流流速，清洗过滤网。 7.6.5.3 孵化期间孵化设施内的溶解氧始终保持在4.5mg/L以上；在鱼苗出膜10h后，将水泥池水位降至30cm左右，孵化桶孵化的鱼苗转移至水泥池暂养。暂养过程保持微流水和充气式增氧。 8 多次繁殖 DB32/ T 3237-2017 6 8.1 繁殖次数 在同一繁殖季节中， 同批亲鱼能进行 35 次的人工繁殖， 但鉴于黄颡鱼在经过第 3 次人工繁殖后，亲鱼的怀卵量急剧下降，产后亲鱼的死亡率高，因此以不超过 3 次为宜。 8.2 亲鱼产后培育 产后的亲鱼用10g/L的食盐和1mg/L的高锰酸钾混合溶液浸泡消毒15min后放回培育池， 强化培育。培育过程按第 6 章的规定执行。在水温 2528条件下，产后亲鱼在强化培育 30d35d 后可重复进行人工繁殖；在水温 2932条件下，强化培育 25d30d 后即可。 8.3 人工繁殖 按第 7 章的规定执行。在 7 月份8 月份，水温超过 31以后，应配备水井，利用地下水将水温调节至 2830进行人工繁殖操作。 9 出苗 包装 运输 9.1 出苗 在鱼苗卵黄囊基本消失，肠通，能在水泥池壁上游动时转入鱼苗培育阶段。 9.2 包装 用双层专用聚乙稀塑料袋充氧运输，每袋装水1/4，装苗数量30000尾50000尾。 9.3 运输 运输时间不超过12h。 10 生产记录 10.1 记录内容 详细、逐日记录人工繁殖生产准备情况、亲鱼选育规格、数量、质量，人工繁殖用药、各阶段水质、温度、效应时间、生长发育情况，出苗时间、数量等。 10.2 记录保存 生产记录保存3年以上。 DB32/ T 3237-2017 7 附录A 透明液配制方法 95%酒精： 85 份 10%福尔马林： 10 份 冰醋酸： 5 份 三者按上述比例混合即成。 附录 B 精子保存液配制方法 NaCl： 8.5 g KCl： 0.2 g NaHCO3： 0.2 g 葡萄糖： 50 g 蒸馏水： 1000 ml