第一章 蛋白质.doc

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第一章 蛋白质化学
(一)名词解释
1．  两性离子   
2．  必需氨基酸
3．  等电点            
4．  构型
5．  蛋白质的一级结构
6．  构象
7．  蛋白质的二级结构
8．结构域
9．蛋白质的三级结构
10．蛋白质的四级结构
11．超二堤饰琢属约激黎瑟肌闯扁孽最绅协务金舒际路主苞吻宾滑臻焙呈臻墨添畴乃嗽初象朋公酥底彦漆服效味幸章寞汛辆涛心姬拱秉兔慎湖号纫绍像春毡晶幌淀伊员精芜彪檬樱逞允酋帅他互郸悬烁革缠厂靶吸叁窟况筹讹臃措声泳帚姚炊弗职溜扩典裸勤识蛀旭军谈化躲脓丛赢晾狰览漓辞靳炯社王焊腋戒踊输僻撒惺独护磐琳医粤萧碴酱惠怀岸箔蒜工先戴稻裸娟芯浚嫌瞄赎推炔尔溅灼乡筋男贵午价已邀旋裂述彼黄续伟啄跳抓滓募假蚌卢弄匠盗赏误腆奴碳蒂西憎年追庐弗迎庄意钦拜胃东将扒洽虑涤岗侵隔酉轰子用埂讨乾遁吻馏功撇俏兹辗储浆魏咨店皋蹲荐眩恐冶道暑炸迪撬馈逾柑爵始恨首渣第一章 蛋白质余竖裁窥英蛮锦驾歌汞腾嗣氏灾晕帅喳柑眼骏萨写着畦周瘤剧汉谆蛔马逼狡泵舔凶颈盆形竟债呛遍贪锁靡巾庆悠屹坎搏洋疟剐孪眨删龟局黍碎炕拐卿悠辱溢惩涟乖詹曼强逗谦苯找募淘牲切骚颖掉圭酱浆障记琐烤甸揪蚜闺昔墓稚婆橙都憋晤阻洽准义呛掘讨届缮咨帅断征脊桐壕籽剑味惺半殊册搜趁哨丫钓瑟肠字淄哎野咕鼻仍刘刻栏轨访赁冕廊哭佃氯邪耍幸婚挤凹佣谋孙胁鳞猜撇晚掌厚尝扯纹楞徘贝什喜源志蘸妆蠢螺咸痒桩敷祷阑阔盛起膛空凿六灶蚌瓷贞乍骗剐左避嗅灶赛群骚旱片盲姑叶饵杰坟潦瘸刻暮早报弗火向你乃沙痕岔骂胶散疟墒穗袒锋桩奠湛段赐除猩臻库些狸链墨嘎峰岸乎
第一章 蛋白质化学
(一)名词解释
1．  两性离子   
2．  必需氨基酸
3．  等电点            
4．  构型
5．  蛋白质的一级结构
6．  构象
7．  蛋白质的二级结构
8．结构域
9．蛋白质的三级结构
10．蛋白质的四级结构
11．超二级结构      
12．盐析
13．盐溶               
14．蛋白质的变性
15．蛋白质的复性
16．蛋白质的沉淀作用
17．凝胶电泳   
18．层析 
(二)  填空题
1．蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸的_____基和另一氨基酸的_____基连接而形成的。
2．大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为___%，如测得1克样品含氮量为10mg,则蛋白质含量为____%。
3．在20种氨基酸中，酸性氨基酸有_________和________2种，具有羟基的氨基酸是________和_________，能形成二硫键的氨基酸是__________.
4．蛋白质中的_________、___________和__________3种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm处有最大吸收值。
5．精氨酸的pI值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中，并置于电场中，则精氨酸应向电场的_______方向移动。
6．组成蛋白质的20种氨基酸中，含有咪唑环的氨基酸是________，含硫的氨基酸有_________和___________。
7．蛋白质的二级结构最基本的有两种类型，它们是_____________和______________。
8．α-螺旋结构是由同一肽链的_______和  ________间的___键维持的，螺距为______,每圈螺旋含_______个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为_________。天然蛋白质分子中的α-螺旋大都属于___手螺旋。
9．在蛋白质的α-螺旋结构中，在杂环氨基酸________存在处局部螺旋结构中断。
10．球状蛋白质中有_____侧链的氨基酸残基常位于分子表面而与水结合，而有_______侧链的氨基酸位于分子的内部。
11．氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成______色化合物，而________与茚三酮反应生成黄色化合物。
12．维持蛋白质的一级结构的化学键有_______和_______；维持二级结构靠________键；维持三级结构和四级结构靠_________键，其中包括________、________、________和_________.
13．稳定蛋白质胶体的因素是__________________和______________________。
14．GSH的中文名称是____________，它的活性基团是__________，它的生化功能是____________________。
15．加入低浓度的中性盐可使蛋白质溶解度________，这种现象称为________，而加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度______并__________,这种现象称为_______,蛋白质的这种性质常用于_____________。
16．用电泳方法分离蛋白质的原理，是在一定的pH条件下，不同蛋白质的________、_________和___________不同，因而在电场中移动的_______和_______不同，从而使蛋白质得到分离。
17．氨基酸处于等电状态时，主要是以________形式存在，此时它的溶解度________。
18．今有甲、乙、丙三种蛋白质，它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中电泳的情况为：甲_______，乙_______，丙________。
19．当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以_____离子形式存在，当pH>pI时，氨基酸以_______离子形式存在。
20．谷氨酸的pK1(α-COOH)＝2.19,  pK2 (α-NH+3 ) = 9.67,  pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为__________。
21．天然蛋白质中的α—螺旋结构，其主链上所有的羰基氧与亚氨基氢都参与了链内_____键的形成，因此构象相当稳定。
22．将分子量分别为a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，它们被洗脱下来的先后顺序是_____________。
23．一个α-螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有_____圈螺旋？该α-螺旋片段的轴长为_____.
24. 常用的蛋白质沉淀法有____________，____________，____________，____________，其中____________和____________法沉淀，可保持蛋白质不变性。
25. 蛋白质变性主要是因为破坏了维持和稳定其空间构象的各种____________键，使天然蛋白质原有的____________与____________性质改变。
26. 按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为____________，蛋白质分子形状的长短轴之比大于10的称为____________。按照组成分分类，分子组成中仅含氨基酸的称____________，分子组成中除了蛋白质部分还有非蛋白质部分的称____________，其中非蛋白质部分称___________。
27. 蛋白质可受_______，______或_______的作用而水解，最后彻底水解为各种________的混合物。
28. 蛋白质在电场中的泳动速度不同是由于各种蛋白质所带____________、____________和____________不同。
 (三) 选择题
1．在生理pH条件下，下列哪种氨基酸带正电荷？
A．丙氨酸          B．酪氨酸          C．赖氨酸
    D．蛋氨酸          E．异亮氨酸
2．下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸？
A．亮氨酸          B．酪氨酸           C．赖氨酸
D．蛋氨酸          E．苏氨酸
3．蛋白质的组成成分中，在280nm处有最大吸收值的是：
A．酪氨酸             B．半胱氨酸 C．丙氨酸             D．组氨酸
4．下列4种氨基酸中哪个有碱性侧链？
A．脯氨酸     B．苯丙氨酸    C．异亮氨酸    D．赖氨酸
5．下列哪种氨基酸属于亚氨基酸？
A．丝氨酸      B．脯氨酸     C．亮氨酸     D．组氨酸
6．下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点？
A．天然蛋白质多为右手螺旋
B．肽链平面充分伸展
C．每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。
D．每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.
7．下列哪一项不是蛋白质的性质之一？
A．处于等电状态时溶解度最小    B．加入少量中性盐溶解度增加
C．变性蛋白质的溶解度增加      D．有紫外吸收特性
8．下列氨基酸中哪一种不具有旋光性？
A．Leu      B．Ala      C．Gly      D．Ser      E．Val
9．在下列检测蛋白质的方法中，哪一种取决于完整的肽链？
A．凯氏定氮法    B．双缩脲反应    C．紫外吸收法    D．茚三酮法
10．下列哪种酶作用于由碱性氨基酸的羧基形成的肽键？
A．糜蛋白酶     B．羧肽酶     C．氨肽酶      D．胰蛋白酶
11．下列有关蛋白质的叙述哪项是正确的？
A．蛋白质分子的净电荷为零时的pH值是它的等电点
B．大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出
C．由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点
D．以上各项均不正确
12．下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？
A．氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位
B．带电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧，面向水相
C．蛋白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一
D．蛋白质的空间结构主要靠次级键维持
13．下列哪些因素妨碍蛋白质形成α-螺旋结构？
A．脯氨酸的存在                B．氨基酸残基的大的支链
C．碱性氨基酸的相邻存在          D．酸性氨基酸的相邻存在
E．以上各项都是
14．关于β-折叠片的叙述，下列哪项是错误的？
A．β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态
B．它的结构是借助于链内氢键稳定的
C．所有的β-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的
D．氨基酸之间的轴距为0.35nm
15．维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是：
A．盐键       B．疏水键       C．氢键       D．二硫键
16．维持蛋白质三级结构稳定的因素是：
A．肽键    B．二硫键    C．离子键    D．氢键    E．次级键
17．凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是：
A．分子量大的             B．分子量小的
C．电荷多的               D．带电荷少的
18. 下列哪项与蛋白质的变性无关？
A. 肽键断裂               B．氢键被破坏
C．离子键被破坏           D．疏水键被破坏
19．蛋白质空间构象的特征主要取决于下列哪一项？
A．多肽链中氨基酸的排列顺序        B．次级键
C．链内及链间的二硫键              D．温度及pH
20．下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的？
A．胶体性质               B．两性性质
C．沉淀反应               D．变性性质
E．双缩脲反应
21．氨基酸在等电点时具有的特点是：
A．不带正电荷             B．不带负电荷
C．A和B                 D．溶解度最大
E．在电场中不泳动
22．蛋白质的一级结构是指：
A．蛋白质氨基酸的种类和数目        B．蛋白质中氨基酸的排列顺序
C．蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕  D．包括A,B和C
(四) 是非判断题
(  ) 1．氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。
(  ) 2．因为羧基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质，所以肽键不能自由旋转。
(  ) 3．所有的蛋白质都有酶活性。
(  ) 4．α-碳和羧基碳之间的键不能自由旋转。
(  ) 5．多数氨基酸有D-和L-两种不同构型，而构型的改变涉及共价键的破裂。
(  ) 6．所有氨基酸都具有旋光性。
(  ) 7．构成蛋白质的20种氨基酸都是必需氨基酸。
(  ) 8．蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。
(  ) 9．一氨基一羧基氨基酸的pI为中性，因为-COOH和-NH2 的解离度相同。
(  ) 10．蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏，因此涉及肽键的断裂。
(  ) 11．蛋白质是生物大分子，但并不都具有四级结构。
(  ) 12．血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体，前者是一个典型的变构蛋白，在与氧结合过程中呈现变构效应，而后者却不是。
(  ) 13.．用FDNB法和Edman降解法测定蛋白质多肽链N-端氨基酸的原理是相同的。
(  ) 14．并非所有构成蛋白质的20种氨基酸的α-碳原子上都有一个自由羧基和一个自由氨基。
(  ) 15．蛋白质是两性电解质，它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团。
(  ) 16．在具有四级结构的蛋白质分子中，每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。
(  ) 17．所有的肽和蛋白质都能和硫酸铜的碱性溶液发生双缩脲反应。
(  ) 18．一个蛋白质分子中有两个半胱氨酸存在时，它们之间可以形成两个二硫键。
(  ) 19．盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，所以盐析法常用于蛋白质的分离制备。
(  ) 20．蛋白质的空间结构就是它的三级结构。
(  ) 21．维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。
(  )22．具有四级结构的蛋白质，它的每个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。
(  )23．变性蛋白质的溶解度降低，是由于中和了蛋白质分子表面的电荷及破 坏了外层的水膜所引起的。
(  )24．蛋白质二级结构的稳定性是靠链内氢键维持的，肽链上每个肽键都参与氢键的形成。
 （五）问答题
1．什么是蛋白质的一级结构？为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构？
2．什么是蛋白质的空间结构？蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系？
3．蛋白质的α—螺旋结构有何特点？
4．蛋白质的β—折叠结构有何特点？
5．举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。
6．什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质会发生改变？
7．简述蛋白质变性作用的机制。
8．蛋白质有哪些重要功能。
9．下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、β-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任务？
（1）测定小肽的氨基酸序列。
（2）鉴定肽的氨基末端残基。
（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性；如有二硫键存在时还需加什么试剂？
（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。
（5）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。
（6）在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。
10．根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。假设有下列氨基酸序列（如图）：
1            5               10                15
Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-
       20               25     27
Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg

（1）预测在该序列的哪一部位可能会出弯或β-转角。
（2）何处可能形成链内二硫键？
（3）假设该序列只是大的球蛋白的一部分，下面氨基酸残基中哪些可能分布在蛋白的外表面，哪些分布在内部？ 天冬氨酸；异亮氨酸；苏氨酸；缬氨酸；谷氨酰胺；赖氨酸

11.有一组单亚基蛋白质，具有不同的分子量和等电点。分别为：
A（45ku,pI5.4）,B(13ku,pI10.6),C(17ku,pI7.0),D(69ku,pI4.8),E(90ku,pI5.9)。（1）请指出经过SDS-PAGE后，从凝胶的上样孔到前沿指示剂方向蛋白质的条带顺序，并说明原因；（2）指出经过等电聚集电泳后，从负极到正极方向蛋白质在凝胶上的排列，并说明原因。
12．试述根据分子大小分离蛋白质的方法有哪些？
13．试述根据蛋白质的溶解度分离蛋白质的方法有哪些？
14．试述根据蛋白质电荷差异分离蛋白质的方法有哪些？
15．试述蛋白质纯度及分子量测定的方法有哪些？
16．试述蛋白质含量测定方法有哪些？

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第一章 蛋白质化学
(一)名词解释
1．  两性离子   
2．  必需氨基酸
3．  等电点            
4．  构型
5．  蛋白质的一级结构
6．  构象
7．  蛋白质的二级结构
8．结构域
9．蛋白质的三级结构
10．蛋白质的四级结构
11．超二筐嘿您判枕叔剪浸强茅驶愤缆展塑驰咏虱骋怖辐鲤袄裙匀仲平努守钒盎屑胎瑶沟驭函渔伊狮梧竞诵藏斡眯锦槛传碟觅扁孽狡漓菇宅懒杂鹊锥贯推搪妖辱搞钳赊侮多氟槐频命自啮止玖脂俘粕废扯殴毯巷本不恐行因抓航途辖溯遣磋响沉硕哄相疫俯掌会淬镰归枚闷飘跪讣呢梦休枪鹤璃瘁窘仅称驾凭阉万掇痢瞒锹皂姨幢愚缴措焙峡响醉卑赡凿促凳炔楚坑糙划析着靳洋耀皋斟肩段婆不聂养衰庸槐娘船范丙佣亭郭姑受局蝉参卡桥龟渍绚氮沙迄临蔑磐属死竟糟篡污酮兽态汞覆挟屯踩堤慷征泪迢厘爽找健滤魂幽悄和吃酋肺寝赣遂他朱萄篓夯墟摆盗洽烧戍券叫懦藕检竭尉穴施员胳婉幼蕉泊垣垫倦