毛细血管采血-白细胞计数ppt.ppt

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验一 毛细血管采血 白细胞计数,临床基础检验技术实验,第一部分 毛细血管采血,毛细血管采血即皮肤采血法，主要用于需血量微小的检查项,目。所获得的末稍血不单纯是毛细血管血，实际是是微动脉、微,静脉和毛细血管的混合血，并依采血时挤压的力度不同含有少量,细胞间质和细胞内液。,毛细血管采血器具,采血笔,采血笔结构示意图,采血笔的使用,拧下采血笔前端笔帽,安装采血针,采血,采血针,1,、准备材料,2,、选择采血部位,3,、按摩皮肤,4,、消毒皮肤,用,75%,乙醇脱脂棉球擦拭采血部位的皮肤，待干。,5,、针刺皮肤,用左手拇指和示指固定绷紧皮肤，右手持采血针自指尖腹内侧迅速刺入,6,、拭去第一滴血,7,、吸血,血液自然流出时，用微量吸管吸血至刻度,8,、止血,毛细血管采血操作步骤,1,、采血前准备,患者、器材,2,、选择采血部位,皮肤完整处采血,3,、消毒皮肤,无菌操作、一人一针一管、皮肤消毒应待乙醇或碘酊挥发后采血,4,、针刺皮肤,迅速，伤口深度,5,、拭去第,1,滴血,6,、吸血与检测,微量吸管校准、血液充入管内的速度、应及时测定,毛细血管采血注意事项,第二部分 白细胞计数,原理：血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细胞，在血,细胞计数池内计数规定区域内的白细胞总数，换,算成每升血液中白细胞数。,试剂：,白细胞稀释液：冰乙酸,2.0ml,10g/L,亚甲蓝,3,滴,加蒸馏水 至,100ml,器材：,微量吸管、带孔吸头、,改良牛鲍血细胞计数板及专用盖片,1ml,刻度移液管、小试管、洁净软纱布、,干棉球、光学显微镜,微量吸管的使用,1,、将带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上，连接紧密不漏气；,2,、拇指和中指夹住吸头中下端，示指盖住吸头小孔，拇、中指轻微挤压排出适量空气；,3,、将微量吸管插入抗凝血，拇、中指缓慢松劲（松动快血液会吸入吸头），吸取抗凝血至所需刻度略上方（不能有气泡），吸管呈水平略下垂，松开示指；,4,、用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血（保证血量准确），轻触吸管下口吸去多余血量，使管内抗凝血正处所需刻度；,5,、将微量吸管插入小试管底部，三指轻微用力慢慢排出血液，用上清液冲洗管内余血,2-3,次，轻摇试管混匀；,6,、拔出微量吸管弃入污物桶。,改良牛鲍血细胞计数板结构,计数板上下各一个计数池,血细胞计数池的方格,计数区域分为,9,个大方格,四角的大方格各划分为,16,个中方格,中央大方格划分为,25,个中方格,四角的大方格为白细胞计数区,中央大方格四角和正中,5,个中方格为红细胞计数区,白细胞数,/L=N/4,10,10,6,稀释倍数,每个大方格的容积,=,面积,高度,=1mm,2,0.1mm=0.1mm,3,(l),每个大方格的面积,=1mm,1mm=1mm,2,（,N,：,4,个大方格细胞总数）,细胞计数原则,大方格四边压线细胞数左不数右，数上不数下，,弓形移动,（,1,）加稀释液 用移液管向小试管内加入,0.38ml,白细胞稀释液。,（,2,）采血、稀释用微量吸管采血,20ul,，拭去管外余血，释放于小试 管底部，用上部稀释液洗净吸管内余血，轻摇试管混匀，静置等其溶血。,（,3,）清洁计数板及盖片（动作轻柔），夹持盖片缘纵向前推轻放于两侧支持堤上。,（,4,）充计数池将小试管轻微振荡,2min,，立即以一次性微量吸管吸取混匀后的白细胞悬液，充入计数池内。静置,2-3min,，使细胞沉于计数池底面。,（,5,）调试显微镜 将计数板放置载物台上，转至低倍镜（,10,），调节聚光器使光线较暗，调节旋钮找到方格线，调节光亮。,（,6,）计数 低倍镜下计数四角,4,个大方格内白细胞总数，压线细胞数上不数下，数左不数右。,白细胞计数操作步骤,(1),稀释液密封保存，防止污染，小试管、计数板、盖片均须清洁，以免杂质、微粒等被误认为细胞。,(2),采血时针刺深度必须适当，不能过度挤压，防止组织液渗入或采血时间太长引起血液凝固。,(3),稀释液和采血量要准确，充分混匀，充液适量，无不足、外溢和气泡，细胞分布均匀。,(4),白细胞总数在参考范围内，大方格间的细胞数不得相差,10,个以上，两次重复计数误差不得超过,10,。,(5),白细胞数量过高时，可加大稀释倍数，白细胞数量过低时，可计数,8,个大方格的白细胞数或取双倍血量。,(6),调试显微镜 将血细胞计数板平放于载物台，低倍镜处所充计数池正中盖片略上方，向下微调载物台（防止压碎盖片）至看清计数区域内分隔线条为止。,白细胞计数操作注意事项,实验报告内容,原理,试剂器材,操作步骤,实验结果,注意事项,思考题,