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镇痛药物实验实验报告.doc

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实验题目:药物的镇痛作用 班级:12级临七3班 姓名:廖梦宇 学号:2012021320 一、 实验原理: 扭体反应是药物镇痛作用实验的一个重要指标,是指给小白鼠某些药物所引起的一种刺激腹膜的持久性疼痛、且间歇发作的运动反应,表现为腹部收内凹、腹前壁紧贴笼底、臀部歪扭和后肢伸张,呈一种特殊姿势。本实验中采用醋酸溶液腹腔注射刺激腹膜引起疼痛,从而通过扭体反应观察杜冷丁、安痛定的镇痛效果。 二、 实验目的: 1. 比较分析杜冷丁、安痛定的镇痛效果及特点 ; 2. 掌握扭体反应 。 三、 实验步骤: 1. 分组:取6只小鼠,分为3组。分别称重并标记编号。观察一般活动。 2. 给药:1#, 2# 小鼠给杜冷丁, 0.1ml/10g 3#, 4# 小鼠给安痛定, 0.1ml/10g 5#, 6# 小鼠给生理盐水,0.1ml/10g 给药途径:皮下注射 15分钟后,腹腔注射醋酸溶液,0.1ml/10g 3. 观察:20分钟内扭体反应的次数,每次持续的时间 4. 动物最后全部处死。 四、 实验结果: 编号 2 3 4 5 6 给药 杜冷丁 安痛定 安痛定 生理盐水 生理盐水 扭体反应出现次数 0 10 0 17 13 每次持续时间(秒) 0 2 0 3 2 五、 讨论: 根据实验结果,生理盐水没有明显的药理作用,小鼠因腹痛而产生扭体反应;杜冷丁有显著的镇痛作用,为人工合成的阿片受体激动剂,是一种临床应用的合成镇痛药,对人体的作用和机理与吗啡相似,主要作用于中枢神经系统;安痛定是用于治疗紧急发热时的退热、发热时的头痛、关节痛、神经痛、风湿痛与痛经等病症的片剂、注射液药物,给药后产生即时解热镇痛作用。本实验中,由于操作失误,3号小鼠安痛定给药不足,所以也出现了几次扭体反应。理论上,杜冷丁与安痛定都有较好的镇痛作用,但杜冷丁的镇痛作用更强大。篇二:药理学实验 镇痛药的镇痛作用 篇三:热板法镇痛实验 热板法镇痛实验 [摘要] 目的 掌握镇痛药的实验法。观察麻醉性镇痛药度冷丁(dolantin)和非麻醉性 镇痛药罗通定(rotundine)的镇痛效应。 方法 将小鼠置于一定温度的热板上,热刺激小鼠足部产生痛反应,即舔足反应。以小鼠出现舔足的时间作用为痛反应指标,判断药物是否具有镇痛作用。结果 比较不同时间度冷丁、罗通定和对照组的痛阈提高百分率。度冷丁组、罗通定组、对照组的小鼠在注射药物前的痛阈值比较,没有显著性差异(p>0.05);15min时,度冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为163.1%,痛阈值为47±14.39 s,罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为100%,痛阈值为34±12.47s,两者的痛阈值比较有显著性差异(p<0.05);30min时,度冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为33.1%,痛阈值为24±9.72 s,罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为93.8%,痛阈值为38±15.00 s,两者痛阈值比较有显著性差异(p<0.05),此时是罗通定的痛阈提高百分率较大;30min时,度冷丁组的小鼠的痛阈提高百分率为22.5%,痛阈值为22±13.06 s,罗通定组的小鼠的痛阈提高百分率为70.2%,痛阈值为35±17.64 s,两者的痛阈值比较没有显著性差异(p<0.05)。 结论 注射度冷丁或罗通定后痛阈值均增加。 1. 材料和方法 1.1. 动物:20~25克左右雌性小鼠 1.2 器材:数控超级恒温槽,金属罐 1.3 药品:0.25%度冷丁、0.25%罗通定、生理盐水 1.4 热板温度:调节温度水浴恒定于55±0.1oc 1.5 动物筛选:筛选合格小鼠3只,30秒内有舔后足反应者,并各测定正常痛 阈值一次,对逃避跳跃者弃之。 1.6实验分组 甲鼠腹腔注射0.25%度冷丁0.1ml/10g 乙鼠腹腔注射0.25%罗通定0.1ml/10g 丙鼠腹腔注射生理盐水0.1ml/10g 1.7 测痛阈值 分别在注射药后15、30、60min各测痛阈值一次,并记录痛阈值。 1.8 数据统计 数据以?x±s表示,显著性差异采用t检验。 1.9痛阈提高百分率 按下式计算痛阈提高百分率 用药后平均热痛阈值—用药前平均痛阈值 痛阈提高百分率= 用药前平均痛阈值 2. 结果 见表1 ,图1。 * 100% 表1. 度冷丁、罗通定对小鼠痛阈的影响(n=9) 样本 1 2 3 4 5 6 7 8 9 x s 生理盐水痛阈值(秒) 0 18 26 17 21 15 20 18 15 21 19 15 23 27 17 21 16 17 11 20 15 19 30 14 27 14 14 10 21 15 18 11 16 60 21 22 17 17 14 18 13 21 12 17 度冷丁痛阈值(秒) 0 16 22 23 10 13 25 22 13 16 18 15 48 60 26 26 60 43 38 60 60 47 14.3 3.46 4.75 5.29 3.67 5.33 19± 19± 16±-15.0 8 - 9.4 / 17± 18± 9 47± x±s 痛阈提高百分率(%) 罗通定痛阈值(秒) 60 23 55 25 14 18 14 15 16 16 22 13.06 22±13.06 0 28 14 20 24 15 23 15 19 20 20 4.68 20±4.68 / 15 60 33 23 21 24 45 30 32 40 34 12.47 34±12.47 100 30 60 40 32 35 19 51 25 25 58 38 15.00 38±15.00 17.64 35±17.64. 60 60 35 28 28 13 43 14 22 60 34 30 14 39 40 27 20 18 21 19 15 24 9.72 24±9.72 14.39 163.1 3.46 4.75 5.29 3.67 5.33 33.1 22.5 93.8 70.2 图1 度冷丁和罗通定药物对小鼠热痛阈值的影响 * p<0.05,** p<0.05,***p<0.05 vs control group * p<0.05 vs rotundine group; ##p<0.05 vs dolantin group ; ***p>0.05 vs rotundine group 分析:在度冷丁实验组中,15min时,该组小鼠的痛阈值是最高的,可是在30分钟时,其痛阈值迅速下降,可能和15min实验时,小鼠在热板上停留时间(47±14.39 s)过久,导致足受伤;也有可能是实验提供的度冷丁试剂在小鼠体内发挥作用的时间过短。 3.讨论 3.1 在整个实验过程中,度冷丁组和罗通定组的小鼠与对照组的小鼠的痛阈值有显著性差异(p<0.05)。在15min时,观察记录到度冷丁组小鼠的痛阈值与罗通定组小鼠的痛阈值有显著性差异(p<0.05),其中度冷丁小鼠的痛阈值高;30min时,观察记录到度冷丁组小鼠的痛阈值与罗通定组小鼠的痛阈值有显著性差异(p<0.05),其中罗通定组小鼠的痛阈值高;60min时,观察记录到度冷丁组小鼠的痛阈值与罗通定组小鼠的痛阈值无显著性差异(p>0.05)。在本次试验中,在15min之前,度冷丁的镇痛效果比较理想,15min~30min左右,罗通定的镇痛作用比度冷丁有效;60min后,两者镇痛效果没有显著性差异。 原因分析:由于度冷丁的作用时间较短(吗啡皮下注射5~10mg,作用持续时间约为6小时[1] ,而度冷丁的效价强度仅为吗啡的1/7~1/10[1],作用时间也较短),而罗通定的作用时间较长,一次口服60~100mg,可维持作用2~5小时[1] ,所以在试验中,开始时,度冷丁的作用强度比罗通定好;过了一段时间后度冷丁的作用强度比罗通定弱。 3.2 度冷丁和罗通定的作用机制. 3.2.1度冷丁作用机制: 疼痛刺激使感觉神经末梢兴奋并释放兴奋性递质(可能为p物质),该递质与接收神经元上的受体结合,将痛觉冲动传入脑内。感觉神经元末梢上存在阿片肽受体,含脑啡肽的神经元释放脑啡肽,后者与阿片受体结合,减少感觉神经末梢p物质的释放,恻然防止痛觉冲动传入脑内。 dolantin为作用于中枢神经系统的阿片受体而发挥作用的人工合成品,是吗啡的代用品。其作用机理为:dolantin作用于中枢神经系统的阿片受体,抑制神经末梢释放p物质,细胞钙离子内流,钾离子外流,阻断神经冲动传递。 度冷丁→阿片受体→ca2+内流↓,k+外流↑→后膜超极化→兴奋传入↓ 3.2.2罗通定的作用机制:罗通定为四氢巴汀(左旋),具有良好的镇痛作用,并伴有镇静、安定和催眠作用,进入中枢后优先阻滞脑内da受体最丰富的脑区的d2受体亚型,然后通过这些神经核与下丘脑弓状核发生神经连接,由 此与内啡肽中央导水管灰质内源性抗痛系统相联系,加强脑干部位的抗痛功能,并抑制脊髓背角水平的致痛信息进人脑内,增强阿片肽的功能,最终达到镇痛目的。罗通定阻断脑内da受体,抑制痛觉传入和痛反应,增加与痛觉有关的特定脑区域脑腓肽原和内腓肽原的mrna的表达,促进脑腓肽、内腓肽的释放。 参考资料: [1] 陈季强 . 基础医学教程各论 上册 . 科学出版社 . 2004年版;351,356,357 . [2] 李秀芹 ,杨腾飞 ,张可璇 ,吕游 ,武静茹. 罗通定协同哌替啶镇痛作用的实验研究 . 徐州医学院学报 . 2009,29(5):319~320 [3] 王云娇 ,李武毅 ,张永云 . 罗通定片镇痛、镇静作用的实验研究. 中药材. 第29卷第7期2006年7月: 713~714. [4] 陆源,夏强. 生理科学实验 . 浙江大学出版社. 2004年版:257~258篇四:药理实验报告 药理学实验报告 学校: 学院: 班级: 学号: 姓名: 指导老师: 元胡止痛片对小鼠镇痛抗炎镇痛活性研究 组员: 指导老师: 摘要:目的:研究元胡止痛片是否具有镇痛抗炎的效果。 方法:使用小鼠热板法、醋酸扭体法、耳肿胀法,并分别建立小鼠的镇痛抗炎模型,观察元胡止痛片对小鼠的镇痛抗炎作用的影响。 结果:1.热板法:元胡止痛片对小鼠热板法实验中给药60分钟后有显著性差异,阳性药阿司匹林与生理盐水组相比有明显的痛阈降低,低浓度与生理盐水组相比有痛阈降低。2. 醋酸扭体法:实验结果有显著差异,阿司匹林阳性药与高浓度元胡溶液相比有显著性差异,阳性药有明显的镇痛作用。而阿司匹林组与生理盐水,低浓度与生理盐水组没有出现显著性差异。3. 热肿胀法:结果显示无显著性差异,阳性药阿司匹林没有明显的抗炎活性。 结论:阿司匹林阳性药有抗炎镇痛作用,元胡止痛片无抗炎镇痛作用。 关键词:元胡止痛片;镇痛;抗炎;热板法;醋酸扭体法;耳肿胀法 元胡止痛片为中药复方制剂,由延胡索(醋制)、白芷等中药组成,延胡索(醋制)具辛、苦、温,归肝脾经,由活血、理气、止痛等功效;白芷辛温,归胃、大肠、肺经,其功能与主治为散风除湿、通窍止痛、消肿排脓。该制剂为中国药典方,临床上用于气滞血淤的胃痛、胁痛、头痛及月经痛等。由于直肠给药50%以上的药物可以不通过肝脏而直接进入血液作 用于全身,可避免口服引起的胃肠道刺激,同时减少。胃液和肝脏对药物的破坏和降解,从而提高药效减轻药物的不良反应。另外,直肠给药药物吸收缓慢,可使药效维持较长的时间。本实验旨在对元胡止痛栓的镇痛抗炎作用的研究。 1 材料与方法 1.1 动物 健康昆明种小白鼠,体重25±8g,雌性32只,雄性32只。健康昆明种小白鼠,体重40±10g,雄性,32只。 1.2 药品与试剂 元胡止痛片,广西半宙天龙制药有限公司,批号130807;0.9%氯化钠注射液,新疆华世丹药业股份有限公司,批号214070702;阿司匹林肠溶片,临汾宝珠制药有限公司,批号140401;二甲苯,天津市富宇精细化工有限公司,批号120411;冰乙酸,天津市光复科技发展有限公司,批号090527。 1.3 仪器 yls-6b智能热板仪,淮北正华生物仪器设备有限公司,出厂日期071018;天孚牌jyt-5架盘药物天平,生产日期2011年8月;yls-25a电动耳肿打耳器,济南益延科技发展有限公司,出厂日期20140521;电子天平。 2 实验内容 2.1 热板法 2.1.1 动物筛选 致痛潜伏期 (痛阈值)为 5~45s 之间的合格雌性小鼠。32只,热板法镇痛试验,筛选痛阈值合格的小鼠,取♀小鼠于给药前先用热板仪于55 ± 0.5 ℃ 分别测定每只小鼠的正常痛阈值[将小鼠放于智能热板仪上至出现舔后足的所需时间作为痛阈值( s) ,连续2次,间隔30 s,测定平均值即为正常痛阈值]。将舔后足时间 < 5 s 或 >45s,或跳跃者不用于此实验。 2.1.2 分组 按体重随机分组,分4组,编号,每组8只。 2.1.3 给药 1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。 2.1.4 测定痛阈值 各鼠给药前测定正常痛阈值。取智能热板仪,调节温度,使温度恒定在55±0.5℃,取每组合格雌性小鼠,按2.1.2灌胃不同药液,测定给药后每组15、30、60、 90分钟后各鼠痛阈值。 2.1.5 痛阈提高百分率 用药后平均热痛阈值—用药前平均痛阈 痛阈提高百分率= 用药前平均痛阈值 2.2 耳肿胀法 2.2.1 分组 取雄性小鼠25±8g,32只,随机分为4组,编号,每组8只。 2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。 2.2.3 测量 每组给药30分钟后,给小鼠的右耳前后涂上二甲苯0.1ml/只,30分钟后处死小鼠,沿耳廓对称剪下两只耳壳,用yls-25a电动耳肿打耳器取耳片,称重,以两耳重量差计算肿胀度。 2.2.4 计算肿胀率 肿胀率(%)=[右耳片重(mg)-左耳片重(mg)]/左耳片重(mg)×100% 2.3 醋酸扭体法 2.3.1 分组 取雄性小鼠40±10g,32只,随机分为4组,编号,每组8只。 2.2.2 给药 1组生理盐水空白对照组(按0.1mg/10g灌胃生理盐水),2组阿司匹林阳性对照组(按4mg/10g灌胃20mg/ml的阿司匹林),3组元胡止痛片低剂量组(按0.6mg/10g灌胃2mg/ml的元胡止痛片溶液),4组元胡止痛片高剂量组(按1.3mg/10g灌胃10mg/ml的元胡止痛片溶液)。给药1h后给每组小鼠按0.1ml/10g腹腔注射0.6%的醋酸(临用前新鲜配制)。 2.2.3 观察 5min后记录15分钟内各小鼠出现“扭体反应”的次数。 3 结果 3.1热板法 表1 元胡止痛片对小鼠的痛阈影响(x?s,n=8) * 100% 组别 生理盐水空白对 照组 阿司匹林阳性药 对照组 低浓度元胡止痛 片对照组 高浓度元胡止痛 片对照组 给药剂量给药60min后 给药15min后(s) 给药30min后(s) 给药90min后(s) mg/10g (s)** 0.1 24.68 ±12.90 29.52 ± 19.42 23.61 ± 1.28 37.82 ±22.01 21.75 ±15.26 16.54± 9.85 20.96±8.69 15.76± 2.76* 23.81± 19.66 14.90±2.77* 30.72± 16.10 18.73±3.81 23.85±18.25 4 0.6 1.3 18.75 ±17.10 16.64±6.38 19.17±6.43 **,60分钟时各组出现显著差异,p<0.01 *,1生理盐水空白对照组 vs 2阿司匹林阳性对照组,p<0.05 *,1生理盐水空白对照组 vs 3低浓度元胡溶液组 , p<0.05 图1 元胡止痛片给药60分钟后对小鼠热板法实验的镇痛作用的影响 3.2耳肿胀法 表3 元胡止痛片对小鼠的抗炎作用(x?s,n=8) 组别 生理盐水空白对照组 给药剂量mg/10g 0.1 肿胀率(%) 62±33 67±46 72±32 64± 50 阿司匹林阳性药对照组 4 低浓度元胡止痛片对照组 0.6 高浓度元胡止痛片对照组 1.3 图2 元胡止痛片对小鼠耳肿胀实验抗炎作用的影响 3.2醋酸扭体法 表 2 元胡止痛片对小鼠的镇痛作用 (x?s,n=8) 组别 生理盐水空白对照组 给药剂量mg/10g 0.1 扭体次数* 15±18 2±3^ 20±19 33±24 阿司匹林阳性药对照组 4 低浓度元胡止痛片对照组 0.6 高浓度元胡止痛片对照组 1.3 *,小鼠镇痛作用出现显著差异,p<0.05 ^, 2阿司匹林阳性对照组 vs 4高浓度元胡溶液组 ,p<0.05篇五:(甲组)镇痛药与解热镇痛药镇痛作用比较实验报告 镇痛药与解热镇痛药镇痛作用比较 一、实验目的 1、观察镇痛药和解热镇痛药的镇痛作用。 2、学习药物镇痛作用的筛选方法(扭体法)。 二、实验原理 由于腹膜有广泛的感觉神经分布,某些化学物质(如冰醋酸等)注入小鼠腹腔内可刺激脏层和壁层腹膜,引起深部、大面积且持久的疼痛,致使小鼠产生扭体反应,表现为腹部两侧内凹、躯体扭曲、后肢伸展和臀部高起等行为反应,统称为扭体反应。该反应在注射15min内出现频率最高,故注射后15min内发生的扭体次数作为疼痛的定量指标。 三、实验仪器设备 电子天平、500ml烧杯、棉签、1ml注射器、鼠笼。0.2%哌替啶(度冷丁)生理盐水溶液、安痛定生理盐水溶液(取1ml安痛定加生理盐水稀释至12.5ml)、0.7%冰醋酸溶液、生理盐水、碘酊、2%苦味酸溶液。 四、实验方法与步骤 1、实验分组 取体重相近同性别小鼠33只,分别称重、标记、随机分成3组,每组11只动物。均由腹腔注射给药,甲组给生理盐水0.1ml/10g,乙组给哌替啶0.1ml/10g,丙组给安痛定0.1ml/10g。30min后,每只小鼠腹腔注射0.7%冰醋酸溶液0.1ml/10g。 2、观察扭体反应次数 观察15min内小鼠是否出现扭体反应,并记录15min内各小鼠出现扭体反应的次数。 3、计算受试药物镇痛百分率 综合全实验室结果,求甲、乙、丙三组15min内出现的平均扭体反应次数,并计算两种受试药物镇痛百分率。将结果填入下表。 五、实验结果 小鼠镇痛指标记录 六、分析与讨论 1 1、比较哌替啶、安痛定药物的镇痛作用机理、特点并联系其临床应用和不良反应分析有何不同? 答: 七、结论 1、度冷丁和安痛定两种药物都有镇痛作用。 2、度冷丁的镇痛效价大于安痛定。from sign 20220427001151
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