甲醛含量测定.ppt

单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,相关甲醛含量测定,1,主要内容,甲醛含量标定,甲醛残留量测定,2,甲醛溶液,(40%)的含量测定标准操作规程,1 目的,本操作规程用于规范甲醛溶液的含量测定。,2 适用范围,本操作规程适用于甲醛溶液（40%）的含量测定。,3 职责,该项检验的检验员应该按该操作规程进行检验，检测部门管理人员负责监督操作规程的正确执行。,4 检验,3,4.1 技术依据及原理,HCHO具有较强的还原性，能被氧化剂氧化成相应的羧酸。基于这个原理，HCHO可在碱性条件下，被氧化生成甲酸，加入定量、过量的NaOH滴定液在水浴上加热15分钟，以溴麝香草酚蓝为指示剂，用盐酸滴定液滴定剩余的NaOH，测得甲醛的含量。反应式如下：,HCHOH,2,O,2,HCOOHH,2,O,HCOOHNaOHHCOONaH,2,O,（定量、过量）,NaOHHClH,2,O,（过量的剩余量）,4,此测定方法属于剩余回滴法，加入定量、过量的NaOH滴定液和HCHO进行定量反应后，用HCl滴定液滴定反应后剩余的NaOH滴定液，同时作空白试验，两次滴定消耗HCl滴定液之差，即为NaOH和HCHO作用的量，根据滴定液定量作用于HCHO的量和甲醛溶液的取用量，即可计算出溶液中含有HCHO的百分量（g/g）。,5,4.2 规则,含量测定要求测试平行样3份，空白试验2份。,4.3 试剂和溶液,4.3.1 甲醛（HCHO）溶液,(40%)分析纯（含HCHO37.040.0）；,4.3.2 氢氧化钠滴定液（1mol/L）取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。,取澄清的氢氧化钠饱和溶液56,ml，,加新沸过的冷水使成1000,ml，,摇匀。,6,4.3.3 盐酸滴定液（1mol/L）配制与标定见盐酸滴定液（1mol/L）标准操作规程；,4.3.4 浓过氧化氢溶液（H,2,O,2,），分析纯，含量30；,4.3.5 过氧化氢试液：取浓过氧化氢溶液（30），加水稀释成3的溶液，即得；,4.3.6 溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml，使溶解，再加水稀释至200ml，即得。,7,4.4 仪器与设备,4.4.1 分析天平（感量0.1mg）；,4.4.2 锥形瓶（250ml 5个）；,4.4.3 玻璃漏斗（3只）；,4.4.4 恒温水浴锅，准确度,1；,4.4.5 刻度吸管（2ml，1支）,4.4.6 移液管（25ml，1支）；,4.4.7 酸式滴定管（50ml，1支）；,8,4.5 检验步骤,4.5.1 将甲醛溶液置于小滴瓶中，精密称定滴瓶加甲醛溶液的重量；,4.5.2 向加有10ml水的锥形瓶中滴入大约3840滴（相当于1.5ml1.6g）甲醛；,4.5.3 再精密称取滴瓶加剩余甲醛溶液的重量，记录称量数据，计算出称取甲醛溶液的重量；,4.5.4,加过氧化氢试液,25ml,与溴麝香草酚篮指示液,2,滴；,9,4.5.5 滴加氢氧化钠滴定液（1mol/L）至溶液显蓝色；,4.5.6 再精密加入氢氧化钠滴定液（1mol/L）25ml，瓶口置一玻璃小漏斗，置60水浴上加热15分钟，不时振摇；,4.5.7 冷却，用水洗涤漏斗，加溴麝香草酚蓝指示液2滴；,4.5.8,用盐酸滴定液（,1mol/L,）滴定至溶液显黄色,。,10,4.5.9 空白试验,4.5.9.1 精密量取氢氧化钠滴定液（1mol/L）25ml，置锥形瓶中；,4.5.9.2 加水10ml，过氧化氢试液25ml与溴麝香草酚蓝指示液2滴；,4.5.9.3 用盐酸滴定液（1mol/L）滴定至溶液显黄色。,11,4.6 注意事项,4.6.1,称取甲醛溶液时一定注意不要使甲醛滴到锥形瓶外面，否则重新称取；,4.6.2,甲醛溶液易挥发，称取后应立即滴定；,4.6.3,甲醛溶液在较低温度时易发生聚合作用，已发生聚合作用的甲醛溶液不能作为对照品用，所以甲醛在储存时室温不能过低。,4.6.4 浓过氧化氢溶液能烧伤皮肤，使用时须注意。,12,4.6.5 金属粉末或重金属离子，甚至灰尘及器皿表面粗糙等原因都可以加速H,2,O,2,分解，光线也能促使其分解，所以H,2,O,2,应在低温环境，密闭、避光保存。,4.6.6 由于H,2,O,2,极易分解，出厂时间或贮存时间较长时，其浓度可能会发生变化，必要时在使用前应测定其含量，根据H,2,O,2,的真实含有量加水将其稀释制成3的溶液。,4.6.7 H,2,O,2,的含量测定：30%，g/ml（100ml中含有30g H,2,O,2,）。精密量取本品1ml，置储有20ml水的锥形瓶中，加稀硫酸20ml，用高锰酸钾滴定液（0.2mol/L）滴定，即得。每1ml的高锰酸钾滴定液（0.2mol/L）相当于17.01mg的H,2,O,2,。,13,4.7 记录与计算,4.7.1 记录,应记录测定日期，室温，指示剂，滴定液名称、浓度，天平型号、编号，滴定管编号，移液管编号，记录有关的测试数据。,4.7.2 计算公式,TF(V,空,-V)100%,W,14,V,空,为两次空白溶液消耗盐酸滴定液,的毫升数平均值,V,为供试品溶液消耗盐酸滴定液的毫升数；,F,为盐酸滴定液的浓度校正因子；,T,=30.03,，即每,1ml,氢氧化钠滴定液（,1.000mol/L,）相当于甲醛的毫克数。,15,甲醛残留量测定,16,1 目的,本操作规程用于规范生物制品中甲醛的含量测定。,2 适用范围,本操作规程适用于生物制品中甲醛的含量测定。,3 职责,该项检验的检验员应该按该操作规程进行检验，检测部门管理人员负责监督操作规程的正确执行。,4 检验,17,4.1 技术依据及原理,甲醛与乙酰丙酮在一定的pH值条件下反应，生成物为黄色，利用分光光度法测定反应产物在410nm波长处的吸收度，根据供试品和对照品的吸收度算出被测样品中甲醛的含量。,4.2 注意事项,4.2.1 根据分光光度法的一般要求，一般测得的吸收度应在0.20.8范围内，所以在试验时，将溶液稀释到一定的浓度，使测得的吸收度在规定范围内。,18,4.2.2 配制对照品溶液时所取已测定含量的甲醛溶液的量可用下式计算：,W=1.0mg,P%100,式中W已测定甲醛溶液需取的量（mg）；,P测得甲醛溶液的含量。,19,例如：测得甲醛溶液的含量为37.2，取量为0.2688g，计算如下：,W,=,1.0mg,37.2%100=268.8mg,20,4.2.3 配制浓度为0.1mg/ml对照溶液，要求称取0.2688g（含量37.2）的市售甲醛溶液，精密称定，按规定可称取的量为0.2688g0.2688g10%,测得的吸收值就会比限度的值或大或小，需经折算后再进行比较。如果实际称取的量为0.2823g，置100ml量瓶中，该对照溶液的浓度为0.1050mg/ml，算式如下：,0.282337.2%1000 5,100 50 =0.1050,mg/ml,21,测得该浓度时的吸收度为,0.753,，应将其折算成,0.1mg/ml,的吸收度，计算如下：,0.7530.1,0.1050 =0.717,4.2.4 不同品种灭活所用甲醛的数量各不相同，在各该品种项下规定的限度是不得超过规定量，测定时需要根据甲醛的加入量来计算供试品溶液的稀释倍数。如果加入量为0.1，照“4.4检验步骤”操作即可，如加入的量为0.2，在4.4.2.1或4.2.2.2操作完后，要将该溶液稀释2倍，再继续“4.4.3检查法”，如果加入量为0.8，要稀释8倍后再继续“4.4.3检查法”，依次类推。,22,4.2.5 供试品溶液必须是澄清的，否则在下一步测定时，会影响吸收度的准确度。,4.2.6 油乳剂疫苗供试品溶液静置分层时间可适当延长，以增强分层效果，经过滤仍不能完全澄清，可继续试验，不影响结果。,23,4.3 仪器、试剂的准备及基本要求,4.3.1 仪器,4.3.1.1 紫外可见分光光度计；,4.3.1.2 精密天平；,4.3.1.3 恒温水浴锅；,4.3.1.4 量瓶（100ml、50ml）；,4.3.1.5 刻度吸管（5ml、0.5ml）；,4.3.1.6 移液管（5ml）；,4.3.1.7 量筒；,4.3.1.8 试管。,24,可见紫外分光光度仪,分光光度法,是个根据物质的不同颜色有不同物理性状和不同化学性质，进行了有效分析和判别。由于颜色就惹人注意，根据颜色的深浅测定物质在特定波长处或一定范围内的吸光度或发光强度，对该物质进行定性和定量分析法。,可见紫外分光光度仪的应用广泛,首先能检定物质：根据吸收光谱上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长和摩尔吸收系数是检定物质的常用参数。其二是与标准物和标准色谱对照：其三是比较最大吸收波长吸收系数的一致性。其四是纯度检验。其五是推测化合物的分子结构。其六是氢键强度的测定等等。,25,4.3.2 试剂,4.3.2.1 吐温80（AR）；,4.3.2.2 乙醇（AR）；,4.3.2.3 醋酸（AR）；,4.3.2.4 醋酸铵（AR）；,4.3.2.5 乙酰丙酮（AR）；,4.3.2.6 甲醛溶液（40%）（AR）,26,4.3.3 试液配制,4.3.3.1 20吐温80乙醇溶液：取吐温80 20ml，加乙醇使成100ml；,4.3.3.2 醋酸醋酸铵缓冲液（pH6.25）,醋酸液 醋酸（AR）12.9ml加水至100ml；,醋酸铵液 醋酸铵（AR）173.4g，加水至1000ml溶解；,醋酸液40ml与醋酸铵液1000ml混合，置冷暗处保存。,4.3.3.3,乙酰丙酮试液,乙酰丙酮（,AR,）,7ml,，加乙醇,14ml,混合，置冷暗处保存。,27,4.4 检验步骤,4.4.1 对照品溶液的制备,取已测定含量的甲醛溶液（,40%,）,测定方法见甲醛溶液（,40,）标准操作规程,适量，精密称定，置,100ml,量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成每,1ml,含甲醛,1.0mg,的溶液；精密量取上述溶液,5ml,，置,50ml,量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得（约,0.1mg/ml,）。如,被测样品为油乳剂疫苗，则精密量取上述每1ml含甲醛1.0mg的溶液5ml，置50ml量瓶中，加20吐温80乙醇溶液10ml，再加水至刻度，摇匀，即得。,28,4.4.2 供试品溶液的制备,4.4.2.1 油乳剂疫苗,用5ml刻度吸管量取被测样品5ml，置50ml量瓶中，用20吐温80乙醇溶液10ml，分数次洗涤吸管，洗液并入50ml量瓶中，加水稀释至刻度，强烈振摇，静置，分取下层清液备用。如下层清液不澄清，需经过滤，弃去初滤液，取续滤液，即得。,29,4.4.2.2 其他疫苗（与水互溶的产品）,用5ml刻度吸管量取被测样品5ml，置50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。如不澄清，需经过滤，弃去初滤液，取续滤液，即得。,30,4.4.3 检查法,4.4.3.1 取对照品溶液和供试品溶液各0.5ml，分别加醋酸醋酸铵缓冲液10ml，乙酰丙酮试液10ml，摇匀，置60水浴15分钟（此时溶液呈黄色），冷水冷却5分钟，放置20分钟，照分光光度法（中国兽药典一部附录）在410nm波长处测定吸收度，计算，即得。,31,4.5 计算,甲醛溶液（40%）含量%（g/ml）=,0.1 A,样,0.4 ,A,对,A,样,=供试品溶液的吸收度；,A,对,=对照品溶液（0.1mg/L）的吸收度；,0.1为对照品溶液的浓度；,0.4为甲醛溶液的含量（按40%计）,例如：,A,样,=0.300,，,A,对,=0.750,，则产品中甲醛的含量为,0.1%,。,32,谢谢,33,