地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响.pdf

中国畜牧兽医 ,():C h i n aA n i m a lH u s b a n d r y&V e t e r i n a r yM e d i c i n e地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响唐雨菲,周敬凯,莫烨云,朱盼,杨秋莉,李笑笑,李丽(广西中医药大学药学院,广西高校中药神经代谢及免疫药理重点实验室,南宁 ;右江民族医学院药学院,百色 )摘要:【目的】探讨地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝(NA F L D)模型大鼠脂代谢的影响.【方法】将 只S P F级雄性大鼠随机分成空白组、模型组、奥利司他组以及地菍总黄酮高、中、低剂量组,每组 只.空白组大鼠饲喂基础饲粮,其余各组饲喂高脂饲粮,奥利他司组给予 m g/k g奥利他司,地菍总黄酮高、中、低剂量组分别给予 、m g/k g地菍总黄酮,每天以 m L/g灌胃体积给予相应的药物,连续给药 d,空白组、模型组给予等体积蒸馏水.记录各组大鼠的一般状况,给药结束后检测各组大鼠空腹血糖(F B G)、空腹胰岛素(F I N S)、血清谷丙转氨酶(A L T)、谷草转氨酶(A S T)活性及脂联素(A D P)、瘦素(L E P)水平,并统计胰岛素敏感指数(I S I)、胰岛素抵抗指数(HOMA I R);检测肝脏组织中甘油三酯(T G)、总胆固醇(T C)含量;油红O染色观察肝脏病理变化;用实时荧光定量P C R和W e s t e r nb l o t t i n g方法分别检测各组大鼠肝脏中过氧化物酶增殖物激活受体(P P A R)、脂联素受体(A d i p o R)、p 的m R NA和蛋白表达量.【结果】与空白组相比,模型组大鼠血清A L T、A S T活性及L E P、F I N S、F B G、HOMA I R水平极显著或显著升高(P ;P ),A D P、I S I水平极显著下降(P ),肝脏中脂肪沉积较多,成功构建NA F L D大鼠模型.与模型组相比,奥利司他组、地菍总黄酮高剂量组大鼠血清A L T、A S T活性以及L E P、F I N S、F B G、HOMA I R水平显著或极显著下降(P ;P ),A D P、I S I水平极显著升高(P );奥利司他组及地菍总黄酮高、中、低剂量组肝脏T C和T G含量均极显著或显著降低(P ;P ),肝脏中脂肪沉积较少,且P P A R、A d i p o R、p 的mR NA和蛋白水平均极显著升高(P ).【结论】地菍总黄酮可明显改善高脂饮食诱导大鼠的NA F L D,其作用机制可能与其参与调节糖脂代谢、改善胰岛素抵抗、调控P P A R/A d i p o R/p /信号通路相关.关键词:地菍;总黄酮;非酒精性脂肪肝;脂代谢中图分类号:R 文献标识码:AD o i:/j c n k i 开放科学(资源服务)标识码(O S I D):收稿日期:基金项目:广西中医药大学 年自治区级大学生创新创业训练计划项目(S );广西壮瑶药重点实验室(桂科基字 号);壮瑶药协同创新中心(桂教科研 号);广西壮族自治区民族药资源与应用工程研究中心(桂发改高技函 号);广西重 点 研 发 计 划 项 目(桂 科A B );国 家 自 然 科 学 基 金 项 目();广 西 科 技 基 地 和 人 才 专 项(桂 科A D );广西一流学科中药学(民族药学)(桂教科研 号)联系方式:唐雨菲,E m a i l:q q c o m.通信作者李丽,E m a i l:l i l y g x n n c o mE f f e c t o fT o t a lF l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r o nL i p i dM e t a b o l i s mo fN o n a l c o h o l i cF a t t yL i v e rR a t s i n d u c e db yH i g h f a tD i e tT A N G Y u f e i,Z HO UJ i n g k a i,MOY e y u n,Z HUP a n,Y A N GQ i u l i,L IX i a o x i a o,L IL i(K e yL a b o r a t o r yo fT CM N e u r o m e t a b o l i s ma n dI mm u n o p h a r m a c o l o g yo fG u a n g x iE d u c a t i o nD e p a r t m e n t,C o l l e g e o fP h a r m a c y,G u a n g x iU n i v e r s i t yo fT r a d i t i o n a lC h i n e s eM e d i c i n e,N a n n i n g ,C h i n a;C o l l e g e o fP h a r m a c y,Y o u j i a n gM e d i c a lU n i v e r s i t yf o rN a t i o n a l i t i e s,B a i s e ,C h i n a)A b s t r a c t:【O b j e c t i v e】T h i ss t u d yw a sc o n d u c t e dt oe x p l o r et h ee f f e c to ft o t a lf l a v o n o i d sf r o m期唐雨菲等:地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响M e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r o n l i p i dm e t a b o l i s mi nr a t sw i t hh i g h f a t d i e t i n d u c e dn o n a l c o h o l i cf a t t y l i v e rd i s e a s e(NA F L D)【M e t h o d】S i x t yS P F m a l er a t sw e r er a n d o m l yd i v i d e di n t ob l a n kg r o u p,m o d e l g r o u p,o r l i s t a t g r o u p,h i g h,m e d i u ma n d l o wd o s eo f t o t a l f l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r g r o u p s,w i t h r a t s i ne a c hg r o u p T h er a t s i nb l a n kg r o u pw e r ef e dab a s a ld i e t,a n dt h eo t h e rg r o u p sw e r ef e dah i g hf a td i e t O r l i s t a tg r o u pw a sg i v e n m g/k go r l i s t a t,w h i l eh i g h,m e d i u ma n d l o wd o s eg r o u p sw e r eg i v e n ,a n d m g/k g t o t a l f l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r,r e s p e c t i v e l y T h ec o r r e s p o n d i n gd r u g sw e r eg i v e nb y i n t r a g a s t r i ca d m i n i s t r a t i o na t t h ev o l u m eo f m L/ge v e r yd a yf o r d a y s T h eb l a n ka n dm o d e lg r o u pw e r eg i v e ne q u a l v o l u m eo f d i s t i l l e dw a t e r T h eg e n e r a l s t a t u so f r a t s i ne a c hg r o u pw a s r e c o r d e d,a n df a s t i n g b l o o d g l u c o s e(F B G),f a s t i n gi n s u l i n(F I N S),t h ea c t i v i t i e s o fs e r u m a l a n i n ea m i n o t r a n s f e r a s e(A L T)a n da s p a r t a t ea m i n o t r a n s f e r a s e(A S T)a n dt h el e v e l so fa d i p o n e c t i n(A D P)a n d l e p t i n(L E P)w e r ed e t e c t e da f t e ra d m i n i s t r a t i o n I n s u l i ns e n s i t i v i t yi n d e x(I S I)a n di n s u l i nr e s i s t a n c e i n d e x(HOMA I R)w e r ea n a l y z e d T h ec o n t e n t so f t r i g l y c e r i d e(T G)a n dt o t a lc h o l e s t e r o l(T C)i nl i v e rw e r ed e t e c t e d O i l r e dOs t a i n i n gw a su s e dt oo b s e r v et h ep a t h o l o g i c a lc h a n g e so f l i v e r T h emR NAa n dp r o t e i ne x p r e s s i o n so fp e r o x i d a s ep r o l i f e r a t o r a c t i v a t e dr e c e p t o r(P P A R),a d i p o n e c t i nr e c e p t o r(A d i p o R)a n dp i nl i v e ro fr a t si ne a c hg r o u p w e r ed e t e c t e db yR e a l t i m eq u a n t i t a t i v eP C Ra n d W e s t e r nb l o t t i n g,r e s p e c t i v e l y【R e s u l t】C o m p a r e dw i t hb l a n kg r o u p,t h ea c t i v i t i e so fA L Ta n d A S T a n dt h el e v e l so fL E P,F I N S,F B G a n dHOMA I Ro f s e r u mi nm o d e lg r o u pw e r ee x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l yo rs i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e d(P o rP ),t h e l e v e l so fA D Pa n dI S Iw e r ee x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d(P ),a n dm o r e f a tw a sd e p o s i t e d i nt h e l i v e r T h eNA F L Dm o d e lo f r a tw a ss u c c e s s f u l l ye s t a b l i s h e d C o m p a r e dw i t hm o d e lg r o u p,t h ea c t i v i t i e so fA L Ta n dA S Ti ns e r u ma n dt h el e v e l so fL E P,F I N S,F B G a n d HOMA I R i n o r l i s t a ta n d h i g h d o s e o ft o t a lf l a v o n o i d sf r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r g r o u p sw e r es i g n i f i c a n t l yo re x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d(P o rP ),A D Pa n dI S I l e v e l sw e r ee x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l y i n c r e a s e d(P )T h ec o n t e n t so fT Ca n dT Gi n l i v e ro f o r l i s t a t a n dh i g h,m e d i u ma n d l o wd o s eo f t o t a l f l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r g r o u p sw e r ee x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l yo rs i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e d(P o rP ),t h e r ew a s l e s s f a t d e p o s i t i o n i n l i v e r,a n dt h em R N Aa n dp r o t e i n l e v e l so fP P A R,A d i p o R a n dp w e r ee x t r e m e l ys i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e d(P )【C o n c l u s i o n】T o t a lf l a v o n o i d sf r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r c o u l ds i g n i f i c a n t l y i m p r o v eN A F L Di nr a t s i n d u c e db yh i g hf a td i e t,a n di t sm e c h a n i s mm i g h tb e r e l a t e d t o i t s i n v o l v e m e n t i nr e g u l a t i n gg l u c o l i p i dm e t a b o l i s m,i m p r o v i n g i n s u l i nr e s i s t a n c e,a n dr e g u l a t i n gP P A R/A d i p o R/p s i g n a l i n gp a t h w a y K e yw o r d s:M e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r;t o t a l f l a v o n o i d s;n o n a l c o h o l i c f a t t y l i v e rd i s e a s e;l i p i dm e t a b o l i s m 非 酒 精 性 脂 肪 肝(n o n a l c o h o l i cf a t t yl i v e rd i s e a s e,NA F L D)是临床上常见的非酒精引起的继发性肝脏代谢紊乱综合征,主要表现为肝细胞脂肪变性和肝脏内脂肪过量沉积,当肝脏内脂肪积累超过肝脏正常重量的就会发生脂肪肝,逐渐发展为脂肪变性、非酒精性脂肪肝炎(NA S H)、肝纤维化和肝硬化.NA F L D已成为世界范围内最常见的慢性肝病,是肝脏及相关代谢性疾病发病率和死亡率增加的重要诱因之一.在发达国家和地区,有 人口受NA F L D困扰,调节饮食、加强运动等是目前预防和缓解NA F L D的有效手段之一,但由于现如今过快的生活节奏,很多人无法长期坚持,临床上也没有治疗NA F L D的有效药物,因此寻找高效安全的预防和治疗NA F L D的方法已成为公共卫生目标.目前,关于NA F L D的发病机制主要为多重打击假说,该假说认为NA F L D的发生发展受多种潜在损伤相互作用,包括胰岛素抵抗(I R)、脂代谢等.其中脂质代谢紊乱在NA F L D中中国畜牧兽医 卷起关键作用,脂质代谢紊乱导致肝脏脂质积蓄、炎症细胞因子堆积,进而引发氧化应激、细胞凋亡等,因此调节脂代谢紊乱,减轻氧化应激和炎症是治疗NA F L D的关键.中草药因其多活性成分、多调控靶点及低价高效的优点,以及具有相关抗炎、抗氧化的作用,在NA F L D领域中越来越受到关注,已有大量研究证明中草药治疗NA F L D效果显著.地菍为野牡丹科植物地菍(M e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r)的全草,又名地稔、铺地稔等,主要分布在广西、广东、云南等地,其药用价值高,是瑶族医药常用药材.桂本草 记载,地菍味甘、涩,性凉,归心、肝、脾、肺经,瑶医主要用于“消渴”、“虚劳”、“肠炎”、“肝炎”等病症.课题组前期研究发现,地菍不同提取部位能改善四氯化碳所致的肝损伤,降低不同糖尿病模型的空腹血糖,并对高脂饮食诱导的肥胖模型有减肥作用,其中地菍总黄酮同时具有改善胰岛素抵抗、调节脂代谢紊乱、抗氧化应激以及保护糖尿病大鼠肝功能等作用,代谢组学结果显示地菍总黄酮干预糖尿病作用主要与干预机体脂肪酸代谢及糖脂代谢通路有关 .地菍总黄酮干预脂质代谢相关通路具有潜在的抑制NA F L D的作用,机体中的过氧化物酶增殖物激活受体(p e r o x i s o m ep r o l i f e r a t e r a c t i v a t e dr e c e p t o r,P P A R)激活后抑制机体脂 滴 生 成 及 堆 积;脂 联 素脂 联 素 受 体(A D P A d i p o R)通过循环系统、旁分泌以及自分泌的途径对肝脏和脂肪组织等发挥促进脂肪酸氧化以达到维持机体脂代谢平衡 的作用;p 被上游A D P A d i p o R 激活后,间接参与机体脂质代谢,抑制脂质沉积.机体摄取的能量超量而不能被消耗时,无法被消耗的葡萄糖会以脂肪形式储存,是N A F L D产生及恶化的重要原因之一,而P P A R、A d i p o R、p 是机体脂代谢的重要靶点.目前关于地菍总黄酮对高脂饮食诱导的N A F L D大鼠的保肝作用及其作用机制的研究鲜见报道,因此,本试验拟以高脂饮食诱导建立NA F L D大鼠模型,检测大鼠血清、肝脏生化指标以及地菍总黄酮对大鼠脂质代谢相关基因和蛋白表达的影响,探究地菍在降脂、保肝等方面的药用价值,以期为地菍药材临床应用提供试验依据.材料与方法 药物及饲粮地菍总黄酮由广西高校中药神经代谢及免疫药理重点实验室制得.本试验所用地菍总黄酮溶液配制如下:地菍总黄酮干燥粉末放入研钵,朝一个方向仔细磨碎后加入蒸馏水,配制地菍总黄酮药液,保存备用.奥利司他片购自浙江海正药业股份有限公司,奥利司他药液制备如下:将奥利司他片碾碎,用研钵充分磨碎后加入蒸馏水溶解,保存备用.基础饲粮由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供;高脂饲粮参照 保健食品功能学评价程序和检验方法 规定制作,高脂饲粮配制如下:将事先溶解的蔗糖()和猪油()加入基础饲粮()中,待混合均匀后缓缓加入蛋白粉()、胆酸钠()及胆固醇(),边加边搅拌,使用模具制成圆柱体,在烘箱内烘干,保存备用.试验动物S P F级雄性S D大鼠(g g)购自湖南斯莱克景达 实验动物有 限公司,动 物生产许可证:S C X K湘 .大鼠分笼饲养于广西中医药大学动物实验中心.主要试剂及仪器谷丙转氨酶(A L T)检测试剂盒、谷草转氨酶(A S T)检测试剂盒、总胆固醇(T C)检测试剂盒、甘油三酯(T G)检测试剂盒均购自南京建成生物工程研究所;大鼠胰岛素(I N S)、大鼠脂联素(A D P)、大鼠瘦素(L E P)E L I S A试剂盒均购自武汉华美生物工程有限公司;HE染色液购自北京博尔西科技有限公司;R I P A裂解液、D E P C水均购自北京索莱宝科技有限公司;P V D F膜购自M i l l i p o r e公司;E C L发光试剂盒、山羊抗兔二抗、山羊抗鼠二抗均购自北京中杉 金 桥 生 物 技 术 有 限 公 司;p 、A d i p o R、P P A R、a c t i n等抗体均购自北京博奥森生物科技有限公司;T r i z o l试剂购自I n v i t r o g e n公司.C r y o t o m eE冷冻切片机、N a n o D r o p 核酸蛋白定量仪(T h e r m oF i s h e rS c i e n t i f i c公司);J J J脱水机、J B P 包埋机(武汉俊杰电子有限公司);血糖仪(R o c h e公司);I n f i n i t eM P R O全波长酶标仪(T E C AN公司);N i k o nE c l i p s eE 正置光学显微镜、N i k o nD S U 成 像 系 统(N i k o n公 司);H a m b u r g蛋 白 浓 度 定 量 仪(E p p e n d o r f公 司);D Y C Z D N电泳 仪(北 京 六 一 生 物 科 技 有 限 公司);WS E 半 干 转 膜 仪 系 统(AT T O公 司);T S 转移脱色摇床(海门其林贝尔仪器制造有限公司);A B I 荧 光 定 量P C R仪(A p p l i e dB i o s y s t e m s公司).N A F L D大鼠模型的建立、分组及给药将 只S P F级S D大鼠分为组,分别为空白组、模型组、阳性药物对照奥利司他组(m g/k g)、期唐雨菲等:地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响地菍总黄 酮高(m g/k g)、中(m g/k g)、低(m g/k g)剂量组,每组 只.整个试验期,空白组大鼠饲喂基础饲粮,其他各组大鼠饲喂高脂饲粮,连续造模 d后,空白组和模型组给予等体积蒸馏水.其余给药组大鼠以 m L/g灌胃体积给予相应的药物进行治疗,连续给药 d.检测指标及方法 一般状况观察每天观察各组大鼠的身体状况、精神状况及一般生理特征(如大便颜色、毛皮色泽等).生化指标检测末次给药后,麻醉后腹主动脉采血,r/m i n离心 m i n获得血清;屠宰后取 肝 脏.根 据 试 剂 盒 说 明 书 检 测 大 鼠 血 清 中A D P、L E P、空腹胰岛素(F I N S)、空腹血糖(F B G)含量及A L T、A S T活 性;胰 岛 素 敏 感 指 数(I S I)I n(/F B GF I N S);胰 岛 素 抵 抗 指 数(HOMA I R)(F I N SF B G)/.按照试剂盒说明书检测肝脏中T G、T C含量.肝脏组织病理学观察肝脏组织经蔗糖溶液脱水后,制备O C T包埋冰冻切片,肝脏组织切片经复温干燥、油红O工作液染色、乙醇洗片、H a r r i s苏木素复染、纯水洗片、盐酸酒精分化、纯水冲洗、氨水返蓝、纯水冲洗等步骤,吸除样本周围水分后,加入明胶甘油进行封片,置于显微镜下观察并采集图像.实时荧光定量P C R检测脂肪代谢相关基因的表达用T r i z o l法提取肝脏组织总R NA,用N a n o D r o p 检 测R NA浓 度,测 定D n m/D n m值检验R NA质量.按照CWb i oR T K i t说明书将检验合格的R NA样品反转录合成c D NA.参照N C B I中P P A R、A d i p o R等基因序列,设计实时 荧 光 定 量P C R引 物,引 物 序 列 见 表.以c D NA为模板,进行实时荧光定量P C R检测.P C R反应体系 L:c D NAL,T r a n s S t a r tT i pG r e e n Q p c r S u p e r M i x L,上、下 游 引 物(m o l/L)各L,R N a s e f r e e d d HO L.P C R反应程序:预变性 s;变性 s,退火 s,延伸 s,共 个循环.以a c t i n为内参基因,用 C t法分析目的基因的相对表达量.表实时荧光定量P C R引物信息T a b l eP r i m e r i n f o r m a t i o nf o rR e a l t i m eq u a n t i t a t i v eP C R基因G e n e s引物序列P r i m e r s e q u e n c e s()退火温度A n n e a l i n gt e m p e r a t u r e/G e n B a n k登录号G e n B a n ka c c e s s i o nN o P P A RF:C C AA C T C TA C AA C A G G C C A C A T NM_ R:AAAAAA C C C T T G C A T C C T T C A CA d i p o RF:T AA C AA T GA C AA C C A C C A C G NM_ R:C C C A C A C C T T A C AAA C AAA C T Cp F:C T C G G T G T G T G C T G C T T T T GA T NM_ R:C T C C C T G TA G G T C C T T T T G G C Ga c t i nF:C C T AG A C T T C G AG C AA GA G A NM_ R:G GAAG G AA G G C T G GAAG A W e s t e r nb l o t t i n g检测脂肪代谢相关蛋白的表达制备肝脏组织匀浆,裂解后提取肝脏组织总蛋白,采用B C A试剂盒对蛋白进行定量.取适量蛋白样本变性后进行电泳分离,并转移至P V D F膜;将P V D F膜封于脱脂奶粉孵育h,封闭完成后加入稀释的P P A R、A d i p o R、p 一抗过夜孵育;P V D F膜洗涤后,加入山羊抗兔二抗继续孵育 m i n;孵育完成的P V D F膜洗涤后,按照E C L发光试剂盒说明书操作,使用凝胶系统进行观察并采集图像,并用I m a g eJ软件计算蛋白条带灰度值.数据统计分析试验数据用S P S S 软件进行统计分析,利用单因素方差分析进行多组间比较,采用t检验进行两组间比较.结果以平均值标准差表示,P 表示差异显著.结果 地菍总黄酮对N A F L D大鼠一般状况的影响与空白组相比,模型组大鼠毛色粗糙、体型肥大,精神不振.空白组、模型组大鼠粪便呈黑褐色长颗粒状;奥利司他组大鼠排便量明显增多,且出现黄褐色长颗粒状的油性粪便;地菍总黄酮各剂量组大鼠出现少量油性粪便,粪便呈黄、黑褐色夹杂长颗粒状,尿液正常.中国畜牧兽医 卷 地菍总黄酮对N A F L D大鼠血清生化指标的影响由表可知,与空白组相比,模型组大鼠血清A L T、A S T活性以及L E P、F I N S、F B G、HOMA I R水平均极显著或显著升高(P ;P ),A D P、I S I水平极显著下降(P ).与模型组比较,奥利 司他组、地菍 总黄酮高剂 量组大鼠血 清A L T、A S T活性以及L E P、F I N S、F B G、HOMA I R水平显著或极显著下降(P ;P ),A D P、I S I水平极显著升高(P );地菍总黄酮中剂量组大鼠血清A L T、A S T活性及HOMA I R水平显著下降(P ),A D P水平显著升高(P ),L E P、F I N S、F B G水平降低,I S I水平升高,但差异均不显著(P );地菍总黄酮低剂量组大鼠血清A D P水平显著升高(P ),I N S水平显著下降(P ),A L T、A S T活 性 以 及L E P、F B G、HOMA I R水平降低,I S I水平升高,但差异均不显著(P ).表地菍总黄酮对N A F L D大鼠血清生化指标的影响T a b l eE f f e c t so f t o t a l f l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r o ns e r u mb i o c h e m i c a l i n d e x e so fN A F L Dr a t s组别G r o u p s谷丙转氨酶A L T/(U/L)谷草转氨酶A S T/(U/L)脂联素AD P/(g/mL)瘦素L E P/(n g/mL)空腹胰岛素F I N S/(m I U/L)空腹血糖F B G/(mm o l/L)胰岛素敏感指数I S I胰岛素抵抗指数HOMA I R空白组 B l a n kg r o u p模型组 M o d e lg r o u p奥利司他组 O r l i s t a tg r o u p高剂量组 H i g hd o s eg r o u p中剂量 M i d d l ed o s eg r o u p低剂量组 L o wd o s eg r o u p与空白组相比,差异显著(P );,差异极显著(P );无,差异不显著(P ).与模型组相比,差异显著(P );,差异极显著(P );无,差异不显著(P ).下同C o m p a r e dw i t hb l a n kg r o u p,S i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P );,E x t r e m e l ys i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P );N o,N os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P )C o m p a r e dw i t h m o d e lg r o u p,S i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P );,E x t r e m e l ys i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P );N o,N os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P )T h es a m ea sb e l o w 地菍总黄酮对N A F L D大鼠肝脏生化指标的影响由表可知,与空白组相比,模型组肝脏T C和T G含量均极显著升高(P ).与模型组相比,奥利司他组、地菍总黄酮各剂量组肝脏T C和T G含量均极显著或显著降低(P ;P ).表地菍总黄酮对N A F L D大鼠肝脏生化指标的影响T a b l eE f f e c t so f t o t a l f l a v o n o i d s f r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r o n l i v e rb i o c h e m i c a l i n d e x e so fN A F L Dr a t smm o L/L组别G r o u p s总胆固醇T C甘油三酯T G空白组B l a n kg r o u p 模型组M o d e l g r o u p 奥利司他组O r l i s t a tg r o u p 高剂量组H i g hd o s eg r o u p 中剂量组M i d d l ed o s eg r o u p 低剂量组L o wd o s eg r o u p 期唐雨菲等:地菍总黄酮对高脂饮食诱导非酒精性脂肪肝大鼠脂代谢的影响 地菍总黄酮对N A F L D大鼠肝脏脂肪沉积的影响油红O染色结果显示,空白组大鼠的肝脏组织未见脂肪沉积(图 A);模型组大鼠肝脏组织中脂肪沉积比较明显,肝细胞排列不均匀甚至部分已出现空泡性坏死,脂滴围绕在肝细胞周围(图 B);各给药组肝脏中脂滴含量相对较少(图 C F).A,空白组;B,模型组;C,奥利司他组;DF,地菍总黄酮高、中、低剂量组A,B l a n kg r o u p;B,M o d e lg r o u p;C,O r l i s t a tg r o u p;D F,H i g h,m e d i u m a n dl o w d o s eo ft o t a lf l a v o n o i d sf r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r g r o u p s,r e s p e c t i v e l y图各组大鼠肝脏组织切片()F i g L i v e r s e c t i o n so f r a t s i ne a c hg r o u p()地菍总黄酮对N A F L D大鼠脂肪代谢相关基因相对表达量的影响由表可知,与空白组相比,模型组肝脏组织P P A R、A d i p o R、p 基因相对表达量极显著降低(P ).与模型组相比,各给药组大鼠肝脏P P A R、A d i p o R、p 基因相对表达量极显著升高(P ).表地菍总黄酮对N A F L D大鼠脂肪代谢相关基因表达的影响T a b l eE f f e c t so ft o t a lf l a v o n o i d sf r o mM e l a s t o m ad o d e c a n d r u mL o u r o ne x p r e s s i o no fg e n e sr e l a t e dt of a tm e t a b o l i s mo fN A F L Dr a t s组别G r o u p s基因G e n e sP P A RA d i p o Rp 空白组B l a n kg r o u p 模型组M o d e l g r o u p 奥利司他组O r l i s t a tg r o u p 高剂量组H i g hd o s eg r o u p 中剂量组M i d d l ed o s eg r o u p 低剂量组L o wd o s eg r